促进角膜内皮细胞粘附的药剂制造技术

提供的是能够有效地生长角膜内皮细胞的方法和稳定地供应角膜内皮制剂的方法。促进角膜内皮细胞的粘附的含有Rho激酶抑制剂的药剂，含有Rho激酶抑制剂的用于角膜内皮细胞的培养介质，用于保存角膜的含有Rho激酶抑制剂的溶液，以及生产角膜内皮制剂的方法，该方法包括使用以上培养介质培养角膜内皮细胞的步骤。

【技术实现步骤摘要】
促进角膜内皮细胞粘附的药剂本申请是国际申请日为2008年8月28日、国际申请号为PCT/JP2008/065459、进入国家阶段的申请号为200880112897.X、专利技术名称为“促进角膜内皮细胞粘附的药剂”的PCT申请的分案申请。
本专利技术涉及促进角膜内皮细胞粘附的药剂(agent)，它用于角膜内皮细胞的粘附、维护或保护。
技术介绍
当从角膜(在眼球的最前部的透明组织)进入的光线到达视网膜激发视网膜神经细胞时，认识到视觉信息，并且所产生的电信号经由视神经被传输到脑视觉皮层。为了具有良好的视力，该角膜需要是透明的。当利用角膜内皮细胞的泵吸功能和阻隔功能将水含量保持在恒定水平时，维持角膜的透明度。人的角膜内皮细胞的密度在出生时是约3000个细胞/1mm2。一旦损伤，该细胞丧失再生的能力。在由于各种原因引起的角膜内皮的功能性障碍所造成的内皮角膜营养不良和大疱角膜病中，角膜会发生水肿和变得不透明，并且该视力明显下降。目前，大疱角膜病是通过其中角膜的上皮、主质和内皮的整个三层结构被移植的穿透性角膜成形术来治疗的。然而，角膜的捐献在日本是不够的，并且虽然有大约5500名的角膜移植术等待患者，但是每年在日本进行约2700例角膜移植。近年来，仅仅移植损伤组织的“部分移植”的想法已经引起人们的注意以减少排异反应和手术后并发症的风险，因此获得更好的视觉功能。在角膜移植中，已经进行了仅仅移植角膜上皮的上皮移植，移植口腔粘膜而不是移植角膜上皮的已培养的口腔粘膜上皮移植，移植主质组织的深层式板层角膜移植术等等。也考虑了仅仅移植角膜内皮的方法。对于角膜内皮的移植，由在胶原层培养的角膜内皮层组成的角膜内皮状片是已知的(参见专利文件1和2)。然而，至于角膜内皮细胞，特别地从人衍生的那些，因为角膜捐献者的数量是有限的并且离体培养是困难的，因此以移植所需的数量生产培养细胞需要花费时间和成本。人胚胎茎(ES)细胞显示出高自复制性和多潜能性，并且从药物应用方面引起人们的注意。然而，它具有急剧减少的细胞数的实际问题，因为在培养步骤中分散细胞的手术容易引起细胞死亡。最近已经发现在人ES细胞的培养过程中发生的细胞死亡是由Rho激酶(ROCK)的活化所引起，并且ROCK的抑制显著地抑制细胞死亡，和报道说，通过使用ROCK抑制剂如Y-27632等，人ES细胞的大量培养和脑细胞的产生能够可行(非专利文件1)。Rho激酶(ROCK)抑制剂已知具有各种作用。例如，专利文件3公开了Rho激酶抑制剂促进角膜轴索形成并且Rho激酶抑制剂用作恢复角膜感知的药剂。另外，专利文件4公开了Rho激酶抑制剂对于视网膜的神经节细胞具有轴突长出促进作用，并且用于视觉功能紊乱的医治。专利文件1：JP-A-2004-24852专利文件2：JP-A-2005-229869专利文件3：WO2005/118582专利文件4：WO2002/083175非专利文献1：NatBiotechnol.2007，25，681
技术实现思路
本专利技术解决的问题本专利技术的目的是提供能够有效地粘附角膜内皮细胞的方式和稳定地供应角膜内皮制剂的方式。解决问题的手段鉴于上述问题，本专利技术人已经进行了深入的研究并且发现角膜内皮细胞在培养底物上的粘附能够通过在Rho激酶抑制剂的存在下培养细胞而引人注目地得到促进，这导致了本专利技术的完成。因此，本专利技术提供下列这些。[1]促进角膜内皮细胞的粘附的药剂，它包括Rho激酶抑制剂。[2]上述[1]的药剂，其中该Rho激酶抑制剂是选自(+)-反式-4-(1-氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷，1-(5-异喹啉磺酰基)高哌嗪(homopiperazine)和其可药用盐中的至少一种。[3]上述[1]的药剂，其中该角膜肉皮细胞源自于人。[4]上述[1]到[3]中任何一项的药剂，它是用于角膜内皮功能紊乱的预防或治疗的制剂。[5]上述[4]的药剂，它是前房内(intracameral)注射或眼内灌注流体的形式。[6]角膜内皮细胞的培养介质，它包括Rho激酶抑制剂。[7]上述[6]的培养介质，其中该Rho激酶抑制剂是选自(+)-反式-4-(1-氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷，1-(5-异喹啉磺酰基)高哌嗪和其可药用盐中的至少一种。[8]上述[6]的培养介质，其中该角膜内皮细胞源自于人。[9]角膜保存溶液，它包括Rho激酶抑制剂。[10]上述[9]的保存溶液，其中该Rho激酶抑制剂是选自(+)-反式-4-(1-氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷，1-(5-异喹啉磺酰基)高哌嗪和其可药用盐中的至少一种。[11]上述[9]的保存溶液，其中该角膜源自于人。[12]生产角膜内皮制剂的方法，它包括使用上述[6]到[8]中任何一项的培养介质培养角膜内皮细胞的步骤。[13]上述[12]的方法，其中角膜内皮细胞源自于人。[14]Rho激酶抑制剂用于生产促进角膜内皮细胞的粘附的药剂的用途。[15]上述[14]的用途，其中该Rho激酶抑制剂是选自(+)-反式-4-(1-氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷，1-(5-异喹啉磺酰基)高哌嗪和其可药用盐中的至少一种。[16]上述[14]的用途，其中角膜内皮细胞源自于人。[17]上述[14]到[16]中任何一项的用途，其中促进角膜内皮细胞的粘附的药剂是用于角膜内皮功能紊乱的预防或治疗的制剂。[18]上述[17]的用途，其中促进角膜内皮细胞的粘附的药剂是前房内注射或眼内灌注流体的形式。[19]Rho激酶抑制剂用于生产角膜内皮细胞的培养介质的用途。[20]上述[19]的用途，其中该Rho激酶抑制剂是选自(+)-反式-4-(1-氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷，1-(5-异喹啉磺酰基)高哌嗪和其可药用盐中的至少一种。[21]上述[19]的用途，其中角膜内皮细胞源自于人。[22]Rho激酶抑制剂用于生产角膜保存溶液的用途。[23]上述[22]的用途，其中该Rho激酶抑制剂是选自(十)-反式-4-(1-氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷，1-(5-异喹啉磺酰基)高哌嗪和其可药用盐中的至少一种。[24]上述[22]的用途，其中角膜源自于人。[25]促进角膜内皮细胞的粘附的方法，它包括让有效量的Rho激酶抑制剂与需要促进角膜内皮细胞的粘附的靶或角膜内皮细胞进行接触。[26]上述[25]的方法，其中该Rho激酶抑制剂是选自(+)-反式-4-(1-氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷，1-(5-异喹啉磺酰基)高哌嗪和其可药用盐中的至少一种。[27]上述[25]的方法，其中角膜内皮细胞源自于人。[28]上述[25]的方法，它为了防止或治疗角膜内皮功能紊乱。[29]上述[25]的方法，包括施用有效量的前房内注射或眼内灌注流体形式的Rho激酶抑制剂。[30]培养角膜内皮细胞的方法，它包括使用包括Rho激酶抑制剂的培养介质培养角膜内皮细胞的步骤。[31]上述[30]的方法，其中该Rho激酶抑制剂是选自(+)-反式-4-(1-氨基乙基)-1-(4-吡啶基氨基甲酰基)环己烷，1-(5-异喹啉磺酰基)高哌嗪和其可药用盐中的至少一种。[32]上述[30]的方法，其中角膜内皮细胞源自于人。[33]保护角膜的方法，它本文档来自技高网...

【技术保护点】
Rho激酶抑制剂用于生产角膜内皮细胞的培养介质的用途。

【技术特征摘要】
2007.08.29 JP 2007-223141;2008.01.28 JP 2008-016081.Rho激酶抑制剂用于生产角膜内皮细胞的培养...

【专利技术属性】
技术研发人员：木下茂，小泉范子，上野盛夫，
申请(专利权)人：千寿制药株式会社，木下茂，
类型：发明
国别省市：日本;JP