环境土壤中PPCPs的测定方法技术

本发明专利技术涉及一种环境土壤样品中PPCPs的测定方法，包括样品提取步骤、富集净化步骤、分离净化步骤、分析检测步骤，其中，所述的样品提取步骤还包括向其中加入N种同位素内标提取液，其中N为大于1以上16以下的整数，优选4～16，更优选8～15。本发明专利技术涉及检测PPCPs的领域，特别是涉及一种在土壤和底泥样品中测定16种PPCPs含量的方法。通过本发明专利技术，改进原有分析方法，建立多同位素内标的分析方法，做到大多数目标物都有对应的同位素标记物作为内标，对应无法购买同位素标记物的目标物，选择结构、性质相近物质的同位素标记物作为内标。建立灵敏度更高、检测限更低、稳定性更强的多同位素内标的分析方法。

【技术实现步骤摘要】
环境土壤中PPCPs的测定方法
本专利技术涉及检测PPCPs的领域，特别是涉及一种在土壤和底泥样品中测定16种PPCPs含量的方法。
技术介绍
药物和个人护理品(PharmaceuticalsandPersonalCareProducts，PPCPs)包括治疗疾病、保障健康的人用和兽用药物，洗浴、护肤等个人护理用品以及香薰、消毒剂等日用化学品，是一类对生态环境和人体健康具有潜在危害的新兴污染物，其环境存在、风险评价和毒理学等方面的研究引起了环境科学领域的广泛关注。环境中PPCPs的来源非常广泛，制药厂、医院、畜禽养殖场、人类日常生活产生的废水和固体废物中都含有大量的PPCPs，并以污水、固体废物等形式进入环境。污水处理厂也是PPCPs进入环境的一个重要途径，PPCPs大都主要通过吸附至污泥的方式从水体中去除，如果污泥被当作肥料用于土壤，则PPCPs可能进入土壤和地下水中。在目前的相关研究中，PPCPs通常使用超声提取、固相萃取和液相色谱串联质谱(SPE-LC-MS/MS)法分析，方法主要基于EPA1694优化获得。现有的检测法规和大多数实验室，均使用典型的内标法对几种或十几种目标物进行分析，内标和目标物之间存在结构和性质差异，在前处理过程中的损耗、色谱保留行为及响应强度均存在较大差异，导致分析方法检出限较高、稳定性较差，无法对低浓度PPCPs准确定量。并且一些PPCPs本身具有稳定性差的特点，使用内标法进行测定时，样品的保存时间较短，对分析检测要求较为苛刻：采集的样品需避光低温保存，尽量在3天内完成前处理、45天内完成仪器分析检测。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种环境样品中16种PPCPs的分析方法，尤其是适用于土壤和泥底环境中的可以准确测定环境样品中的PPCPs含量，并有效补偿PPCPs因降解而导致的浓度变化。从而解决现有的测定方法无法准确测定环境样品中的PPCPs含量和延长保存时间的问题。为解决上述技术问题，本专利技术引入更多的同位素内标，改进原有分析方法，建立多同位素内标的分析方法，做到大多数目标物都有对应的同位素标记物作为内标，对应无法购买同位素标记物的目标物，选择结构、性质相近物质的同位素标记物作为内标。建立灵敏度更高、检测限更低、稳定性更强的多同位素内标的分析方法。本专利技术的目的在于提供一种环境土壤样品中PPCPs的测定方法，其特征在于，包括样品提取步骤、富集净化步骤、分离净化步骤、分析检测步骤，其中，所述的样品提取步骤包括，加入n种同位素提取内标的步骤，其中，n为1以上且16以下的整数，优选4～16，更优选8～15。本专利技术所述的测定方法，其特征在于，所述的样品提取步骤包括向样品中加入磷酸盐缓冲盐，调节pH后加入提取内标液后，再加入乙腈重复超声提取，合并提取液，旋蒸浓缩。本专利技术所述的测定方法，其特征在于，所述的富集净化步骤为将提取液用超纯水稀释、玻璃纤维滤纸过滤后，用固相萃取柱富集，优选亲水亲脂型固相萃取小柱。本专利技术所述的测定方法，其特征在于，所述的富集净化步骤中，在富集之前，将小柱用甲醇、高纯水、pH4～5的高纯水淋洗。本专利技术所述的测定方法，其特征在于，所述分析检测步骤采用HPLC-MS/MS仪器，对所述净化试样进行分析检测。本专利技术所述的测定方法，其特征在于，所述的分析检测步骤还包含：将得到的所述净化试样经浓缩后体积比为1:4的甲醇/水定容至500μL，加入13C-Atrazine的进样内标后涡旋混合均匀，用0.22μm的尼龙针筒过滤器过滤后，作为待仪器检测的净化试样。本专利技术所述的测定方法，其特征在于，所述分析检测步骤还包括采用HPLC-MS/MS仪器对所述净化试样分别进行分析测定，采用的测定参数为：HPLC检测条件为进样体积10μL；柱温30℃，色谱柱为C18液相色谱柱，规格为3.5μm×3.0mm×150mm，POS模式时的流动相为含0.01％的甲酸高纯水和甲醇，流速为0.30mL/min；NEG模式时的流动相为含10mMol/L的醋酸铵的高纯水和甲醇，流速为0.35mL/min；质谱条件为电喷雾电离源ESI，多反应监测模式MRM。本专利技术所述的测定方法，其特征在于，所述的PPCPs选自喹诺酮类、磺胺增效剂、抗高血压药、抗癫痫药、驱虫药、抗抑郁药、抗高血压药、兴奋剂、氯霉素类、消炎止痛药、调血脂药中任意一种以上。本专利技术所述的测定方法，其特征在于，所述PPCPs为，萘啶酸、甲氧苄啶、普萘洛尔、卡马西平、避蚊胺、舒必利、美托洛尔、咖啡因、氯霉素、双氯芬酸、吲哚美辛、甲芬那酸、酮洛芬、苯扎贝特、氯贝酸、吉非罗齐。本专利技术所述的测定方法，其特征在于，所述环境样品为土壤和底泥样品中的任一种。详细而言，本专利技术的具体操作步骤如下：(1)样品提取步骤：称取一定量冻干研磨后的样品，加15mL磷酸盐缓冲盐，用NaOH或HCl溶液调节pH至4～5后，加入13C标记的提取内标液；再加入20mL乙腈后，超声重复提取三次，合并提取液，旋蒸浓缩。(2)富集净化步骤：将上述所述提取液用超纯水稀释、玻璃纤维滤纸(450℃灼烧4小时)过滤后，用亲水亲脂型固相萃取柱富集，得到含有PPCPs的萃取小柱；富集前萃取柱使用前依次用10mL甲醇、6mL高纯水、高纯水6mL(pH＝4～5)淋洗，达到活化填料和去除杂质的目的，富集小柱规格为200mg，6mL。(3)分离净化步骤：将所述含有PPCPs的萃取小柱，用10mL高纯水清洗，抽真空至填料完全干(约需1～2小时)，再加入8mL甲醇洗脱，洗脱液收集于10mL玻璃离心管中，浓缩定容后得到净化试样；将得到的所述净化试样经浓缩后甲醇/水(体积比为1:4)定容至500μL，加入13C-Atrazine的进样内标后涡旋混合均匀，用0.22μm的尼龙针筒过滤器过滤后，作为待仪器检测的净化试样。所述浓缩采用的是氮吹浓缩至恰好吹干，干浴温度优选为35℃。(4)分析检测步骤：采用HPLC-MS/MS仪器，对所述净化试样进行分析检测，采用的测定参数为：HPLC检测条件为进样体积10μL；柱温30℃，色谱柱为C18液相色谱柱，规格为3.5μm×3.0mm×150mm，POS模式时的流动相为含0.01％的甲酸高纯水和甲醇，流速为0.30mL/min；NEG模式时的流动相为含10mmol/L的醋酸铵的高纯水和甲醇，流速为0.35mL/min；质谱条件为电喷雾电离源ESI，多反应监测模式MRM。通过各目标物的保留时间、定性离子对进行定性分析；通过同位素的峰面积比值进行定量分析，得出对所述净化试样中PPCPs含量的测定结果。本专利技术的有益效果是：(1)由于目标物和对应的同位素内标具有近乎完全相同的化学性质和状态，在样品过滤、净化、浓缩等前处理过程中，同位素标记物和目标物具有相同的损耗特性，可以有效补偿PPCPs因降解而导致的浓度变化，延长了样品的保存时间；(2)仪器测定时，两者在色谱柱中的吸附行为、在质谱中的响应强度同样具有很好的一致性，尤其在对低浓度样品测定时，即使存在本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种环境土壤样品中PPCPs的测定方法，其特征在于，包括样品提取步骤、富集净化步骤、分离净化步骤、分析检测步骤，其中，所述的样品提取步骤包括，加入n种同位素净化内标以及13C内标提取液的步骤，其中，n为1以上且16以下的整数，优选4～16，更优选8～15。

【技术特征摘要】
1.一种环境土壤样品中PPCPs的测定方法，其特征在于，包括样品提取步骤、富集净化步骤、分离净化步骤、分析检测步骤，其中，所述的样品提取步骤包括，向样品中加入磷酸盐缓冲盐，调节pH后加入提取内标液后，再加入乙腈重复超声提取，合并提取液，旋蒸浓缩，所述内标液为n种同位素净化内标以及13C内标提取液，n为4～16；
所述的富集净化步骤为将提取液用超纯水稀释、玻璃纤维滤纸过滤后，用亲水亲脂型固相萃取小柱富集；
所述的富集净化步骤中，在富集之前，将小柱用甲醇、高纯水、pH4～5的高纯水淋洗；
所述分析检测步骤采用HPLC-MS/MS仪器，对所述净化试样进行分析检测，采用的测定参数为：HPLC条件为：进样体积10μL；柱温30℃，色谱柱为C18液相色谱柱，规格为3.5μm×3.0mm×150mm，POS模式时的流动...

【专利技术属性】
技术研发人员：王薇，李文超，陆勇，山崎教正，宋晓倩，
申请(专利权)人：中持依迪亚北京环境监测分析股份有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11