草木犀药材的UPLC指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱技术

本发明专利技术提供一种草木犀药材的UPLC指纹图谱的构建方法以及通过该方法获得的草木犀药材的标准指纹图谱。根据本发明专利技术的草木犀药材的UPLC指纹图谱的构建方法包括制备供试样品溶液的步骤和超高效液相色谱分析步骤。根据本发明专利技术的方法简单、色谱分析条件容易实现、精密度高，而且分析结果的稳定性和重现性较好，与现有技术的其它测试分析方法相比，缩短了在线分析时间，节省了材料成本和时间成本。

【技术实现步骤摘要】
201410706092

【技术保护点】
一种草木犀药材的超高效液相色谱指纹图谱的构建方法，包括：(1)制备草木犀药材的多个供试样品溶液及香豆素对照样品溶液；(2)将步骤(1)所制备的供试样品溶液及对照样品溶液分别进行超高效液相色谱分析，得到超高效液相色谱图；以及(3)以对照样品溶液的超高效液相色谱图作为对照，从步骤(2)所得到的供试样品溶液的超高效液相色谱图中选择共有特征峰构建草木犀的标准指纹图谱，所述步骤(2)中超高效液相色谱分析的条件为：采用反相填料色谱柱，用流动相乙腈‑0.05～0.2体积％磷酸或醋酸水溶液进行梯度洗脱，紫外检测波长为220～277nm。

【技术特征摘要】
1.一种草木犀药材的超高效液相色谱指纹图谱的构建方法，包括：
(1)制备草木犀药材的多个供试样品溶液及香豆素对照样品溶液；
(2)将步骤(1)所制备的供试样品溶液及对照样品溶液分别进行超高效
液相色谱分析，得到超高效液相色谱图；以及
(3)以对照样品溶液的超高效液相色谱图作为对照，从步骤(2)所得到
的供试样品溶液的超高效液相色谱图中选择共有特征峰构建草木犀的标准指
纹图谱，
所述步骤(2)中超高效液相色谱分析的条件为：
采用反相填料色谱柱，用流动相乙腈-0.05～0.2体积％磷酸或醋酸水溶液进
行梯度洗脱，紫外检测波长为220～277nm。
2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述步骤(1)中制备
草木犀药材的供试样品溶液及香豆素对照样品溶液的方法包括用30～70体
积％的甲醇水溶液处理。
3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述反相填料色谱柱
为WatersAcquityUPLCTMBEHC18，其中色谱柱尺寸为50mm×2.1mm，填料
颗粒度为1.7μm。
4.根据权利要求1～3中任一项所述的构建方法，其特征在于，所述梯度
洗脱的程序为：0min→1.5min→3.5～4.0min→5.0min，乙腈5～10体
积％→13～22体积％→13～22体积％→5～10体积％；优选地，所述梯度洗脱程
序乙腈5体积％→13～15体积％→13～15体积％→5体积％。
5.根据权利要求1～3中任一项所述的构建方法，其特征在于，所述梯度
洗脱的程序为：0min→1.5min→4.0min→5.0min，乙腈5体积％→13体
积％→13体积％→5体积％。
6.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述步骤(2)中超高
效液相色谱分析的条件还包括：所述流动相的流速为0.3～0.7mL/min，柱温在
25～40℃范围内；优选地，所述流动性的流速为0.6～0.7mL/min。
7.根据权利要求1～6任一项所述的构建方法，其特征在于，所述步骤(2)

\t中超高效液相色谱分析的条件为：所述流动相为乙腈-0.1体积％磷酸水溶液，
流速为0.6mL/min，波长为277nm，柱温为30℃。
8.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，从步骤(2)在紫外检
测波长277nm时得到的供试样品溶液的超高效液相色谱图中选择共有特征峰
构建了UPLC标准指纹图谱，包含14个共有特征峰，以12号峰香豆素为参照
峰，其相对保留时间分别为：峰1：0.062(±5％)、峰2：0.080(±5％)、峰3：
0.102(±5％)、峰4：0.345(±5％)、峰5：0.445(±5％)、峰6：0.669(±5％)、
峰7：0.686(±5％)、峰8：0.713(±5％)、峰9：0.801(±5％)、峰10：0.866
(±5％)、峰11：0.912(±5％)、峰12：1.000(±5％)、峰13：1.036(±5％)
和峰14：1.101(±5％)。
9.根据权利要求8所述的构建方法，其特征在于，所述14个共有特征峰
中，峰10为草木犀酸；峰12为香豆素；峰14为邻香豆酸。
10.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，从步骤(2)在紫外
检测波长220nm时得到的供试样品溶液的超高效液相色谱图中选择共有特征
...

【专利技术属性】
技术研发人员：张丹，冯彩丽，徐江平，
申请(专利权)人：舒泰神北京生物制药股份有限公司，北京舒泰神新药研究有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11