双室双向反向流装置制造方法及图纸

本发明专利技术总体上涉及用于检测样品中的分析物的固相色谱测定装置、测试套件和方法。更具体地，本发明专利技术提供了具有双诊断室以检测两种或更多种分析物的双向色谱测定装置。测定装置或测试套件包括：(a)色谱元件，其包括中央样品接收区和多个试剂释放端和反应区；(b)邻近所述中央样品接收区的吸收垫；和(c)位于所述色谱元件与所述吸收垫之间的可移动的分隔件。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术总体上涉及用于检测样品中的分析物的固相色谱测定装置、测试套件和方法。更具体地，本专利技术提供了具有双诊断室以检测两种或更多种分析物的双向色谱测定装置。
技术介绍
本说明书中提供的参考文献的书目详情在本说明书的最后列出。本说明书中对任何现有技术的参考不是，也不应被认为是承认或以任何形式暗示该现有技术构成任何国家的公知常识的一部分。用作快速测定装置的色谱测定系统是用于检测生物样品中给定分析物的存在的多种方法之一。这些系统的一个优点是它们不需要专门的设备或经培训人员。另一个优点是使用这种类型的测定可以检测各种各样的分析物。因此，用于检测生物材料中分析物的存在的快速色谱技术的使用取得了进展，超越了临床实验室的范围，原因是发现采用这些技术的测定装置在“及时现场护理(pointofcare)”情况下(例如，在医生办公室或家庭环境中)尤其有价值。典型的快速色谱测试利用“夹心(sandwich)”测定或“竞争”测定之一来检测期望分析物的存在。在夹心测定中，使分析物结合或“夹”在未标记的第一结合配偶体与标记的第二结合配偶体之间。例如，分析物(如HCV抗体)，可以被固定化在膜上的第一结合配偶体(在这种情况下为HCV抗原)捕获。然后，抗体-抗原复合物可以通过具有标记的第二结合配偶体(例如，标记有有色颗粒的另一种HCV抗原/抗人抗体)来检测。相比之下，在竞争测定中，样品中的分析物与标记的分析物或标记的分析物类似物竞争固定在固体支持物上的结合配偶体。样品中较大浓度的分析物在测定中产生较低的信号，原因是标记的分析物因竞争而远离固体支持物上的结合配偶体(即，在竞争测定期间产生的信号随样品中分析物的浓度增加而降低)。因此，夹心测定提供了具有高灵敏度的定性评估，而竞争测定提供了分析物浓度的定量测量。无论使用何种分析物检测方法，目前可用的快速测定装置常常归类为以下四种基本方式之一：“试纸(dipstick)”方式、“流经(flowthrough)”方式、“横向流(lateralflow)”方式和反向流(reverseflow)方式。“试纸”方式(如在美国专利No.5,275,785；5,504,013；5,602,040；5,622,871和5,656,503中举例说明的)通常由具有样品接收端的多孔材料条带、试剂区和反应区组成。样品依靠毛细作用从样品接收端开始沿着测定装置移动到试剂区中。待检测分析物与引入试剂区中的试剂(优选标记的结合配偶体)结合，形成复合物。通常，这些结合对是抗体:抗原复合物或受体:配体复合物，所述标记具有引入所述复合物试剂部分中的标记如胶体金属。然后，标记的结合配偶体-抗原复合物迁移到反应区中，在其中复合物被牢牢固定化在反应区中的另一种特异性结合配偶体捕获。因此，标记的复合物在反应区内的保留导致了可见读出。“流经”方式(如在美国专利No.4,020,046中举例说明的)也利用多孔固相材料。这种测定方式通常具有包含位于吸收层之上的固定化结合配偶体的多孔膜。一旦将样品添加到膜表面上，目标分析物就与固定化结合配偶体反应形成分析物-结合配偶体复合物。所述复合物通过添加具有标记(如酶、染料颗粒或胶体金属)的第二结合配偶体而可视化。吸收层充当过量测定试剂的槽，并且可以用于调节反应物的流量以实现分析物与结合配偶体之间的最佳反应。在这种方式中，可以通过以下方法来提高读出的灵敏度：用额外的溶液“洗涤”膜以减少标记物的任何非特异性结合或移除可干扰测定读出的任何其他材料。“横向流”方式(参见例如美国专利No.5,075,078；5,096,837；5,354,692和5,229,073)利用多孔固相材料并且具有与试纸测定方式相似的线性结构：样品施加位点、试剂释放位点和反应位点。然而，横流方式使样品横向流过多孔固相材料，而不是使样品垂直地以毛细作用沿“试纸”向上。将样品直接施加到施加位点，目标分析物横向流至试剂释放位点，并与标记的结合配偶体形成复合物。然后，该分析物:结合配偶体复合物迁移到反应位点中，在这里其被固定化第二结合配偶体捕获并进行检测。“反向流”方式(例如，美国专利6,316,205)利用分析物的两向流动，其使第一结合配偶体从装置的一端流动并使第二结合配偶体从装置的另一端流动，并且使得该方式因背景更清晰而更灵敏。常规的快速测定可在各级医疗保健系统(“及时现场护理测试”)中用于确定样品中给定分析物的存在而不需要专门的设备或人员，并且在短时间段内产生结果。例如，用于传染性疾病如AIDS的简单快速的免疫测定装置已经使用了将近十年。然而，现有的快速测试并非没有其缺点。最重要地，由于目前可用方式存在各种限制，这样的装置的灵敏度经常受到质疑(Giles等，JournalofMedicalVirology，53104-109，1999)。此外，如以下举例说明的，该测定方式设计中固有地存在使用该测定装置的几个实用限制。最初设计用于尿液分析的试纸方式使用相对大体积的样品用于分析。这对于使用这样的装置来分析血清或血液样品是相当大的限制。相比之下，基于流经方式的测定装置显著减少了样品的体积需求。然而，在真正的自足式装置中不能采用流经方式。在基于流经方式的装置中，检测试剂(即，标记的结合配偶体)不直接并入该装置的多孔固体基质中并因此必须单独提供。这导致了关于试剂运输和稳定性的另外的限制。横向流方式克服了试纸方式的样品体积问题和流经方式的检测试剂问题两个问题。然而，横向流方式不允许洗涤步骤，与流经方式所固有的一样。未结合的标记或者由样品溶液引入的任何干扰物质(如颗粒或有色材料)可潜在地干扰测定装置的读出。因此，横向流方式在测定过程期间常常采用过滤(例如，使用专用过滤器)，例如，在检测分析物之前使用经特殊涂覆的过滤器以除去潜在的干扰物质。此外，由于着色剂从吸收垫中回流至色谱区和/或反应区中，所以横向流方式中测试线的强度不稳定，其可能在30分钟之后发生变化。反向流方式为最终用户提供了更多的便利，因为它仅需要小体积的样品、更高的滴定终点、更清晰的背景和稳定的测试线。然而，这种方式由于免疫相互作用而不能用于在同一色谱区域中检测抗原和抗体二者，并且无法满足物质如HIV、HCV和HBV感染在血清转换尚未形成时所需的早期检测的需求。需要开发改进的测定装置。
技术实现思路
本专利技术提供了测定装置、测试套件和方法，用于检测样品中分析物或特征分子的存在，特别是多种分析物或特征分子的存在。与常规测定相比，通过控制测定装置中所使用的多种试剂的释放，提高本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定装置或测试套件，包括：(a)色谱元件，所述色谱元件包括中央样品接收区及多个试剂释放端和反应室；(b)邻近所述中央样品接收区的吸收垫；和(c)设置在所述色谱元件的部分与所述吸收垫之间的可移动的分隔件。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.04.12 SG 201302808-91.一种测定装置或测试套件，包括：
(a)色谱元件，所述色谱元件包括中央样品接收区及多个试剂释放端和反应室；
(b)邻近所述中央样品接收区的吸收垫；和
(c)设置在所述色谱元件的部分与所述吸收垫之间的可移动的分隔件。
2.根据权利要求1所述的测定装置或套件，其中所述色谱元件包括一个样品释放端、两
个试剂释放端、和双反应室。
3.根据权利要求2所述的测定装置或套件，其中所述中央样品接收区包括以两个相反
方向吸收和释放第一结合配偶体的元件。
4.根据权利要求3所述的测定装置或套件，其中可释放的结合配偶体包含可检测标记。
5.根据权利要求2所述的测定装置或套件，其中所述中央样品接收区包含可释放的第
一结合配偶体，和所述试剂释放端包含可释放的第二结合配偶体。
6.根据权利要求2所述的测定装置或套件，其中所述反应室包含用于特定分析物的固
定化结合配偶体。
7.根据权利要求6所述的测定装置或套件，其中所述特定分析物包括一种或更多种捕
获剂。
8.根据权利要求6所述的测定装置或套件，其中在所述反应室之一中包括一种或更多
种作为捕获剂的抗原和/或抗体。
9.根据权利要求6所述的测定装置或套件，其中其他反应室中的所述特定分析物包括
作为抗原捕获剂和/或抗体捕获剂的抗原和/或抗体。
10.根据权利要求2所述的测定装置或套件，其中所述分隔件突出超过所述装置中央区
处的所述吸收垫和所述色谱元件。
11.根据权利要求1或2所述的测定装置或套件，还包括：
(d)壳体，所述壳体包围所述色谱元件、所述吸收垫和所述分隔件的至少一部分。
12.根据权利要求11所述的测定装置或套件，其中所述分隔件的一部分从所述壳体的
一侧突出。
13.根据权利要求1或2所述的测定装置或套件，还包含水溶液。
14.根据权利要求1或2所述的测定装置或套件，还包括以下中的一个或更多个：用于容
纳所述色谱元件、所述分隔件、所述吸收垫或其组合的两个容器；用于包装所述色谱元件、
所述分隔件、所述吸收垫或其组合的包装材料；和说明书。
15.一种检测样品中的分析物的方法，所述方法包括：
(a)将所述样品添加到根据权利要求1或2所述的测定装置或套件的色谱元件的中央样
品接收区中；
(b)使所述样品从所述中央样品接收区以两个相反方向流经所述色谱元件两侧的反应
室的至少一部分；
(c)使所述样品中的所述分析物与固定化在所述反应室中的第一结合配偶体反应以形
成第一复合物；
(d)向所述色谱元件的试剂释放端添加水溶液并使引入试剂释放端的可释放的第二结
合配偶体溶解，其中所述可释放的第二结合配偶体包含标记；
(e)从所述测定装置中移除分隔件以使吸收垫与色谱元件的部分接触；
(f)使所述可释放的第二结合配偶体从所述释放端流经所述色谱元件的所述反应室的
至少一部分；
(g)所述可释放的第二结合配偶体与底物之间形成第二复合物，所述底物选自所述分
析物、所述第一结合配偶体和所述第一复合物；和
(h)通过显色来检测所述第二复合物。
16.根据权利要求15所述的方法，其中在从所述测定装置中移除所述分隔件之前，添加
所述水溶液和使所述可释放的第二结合配偶体溶解。
17.根据权利要求15所述的方法，其中在添加所述水溶液和使所述可释放的第二结合
配偶体溶解之前，从所述测定装置中移除所述分隔件。
18.根据权利要求15所述的方法，其中在从所述装置的两端添加所述水溶液和使可释
放的第二结合配偶体溶解同时，从所述测定装置中移除所述分隔件。
19.根据权利要求15所述的方法，其中通过将所述分隔件从所述色谱元件与所述吸收
垫之间拉出，移除所述分隔件。
20.根据权利要求15所述的方法，其中所述分析物包括抗体、抗原、或者抗原和抗体二
者。
21.一种用于检测样品中的分析物的方法，所述方法包括：
(a)将样品添加到根据权利要求1或2所述的测定装置或套件的色谱元件的中央样品接
收区中；
(b)使所述分析物从所述样品接收区以两个相反的方向流经所述色谱元件的反应室的
至少一部分；
(c)使所述第一复合物与所述反应室中固定化的试剂反应以形成第一免疫复合物；
(d)向所述色谱元件的试剂释放端添加水溶液并使引入所述试剂释放端中的可释放的
第二结合配偶体溶解；
(e)从所述测定装置中移除分隔件以使吸收垫与所述色谱元件接触，从而使得所述吸
收垫能够吸收来自样品垫的流体；
(f)使所述可释放的第二结合配偶体以相反方向流经所述反应室的至少一部分；
(g)在所述可释放的第二结合配偶体与底物之间形成第二复合物，所述底物选自所述
分析物、所述可释放的第一结合配偶体和所述第一复合物；和
(h)通过显色来检测所述第二复合物。
22.根据权利要求21所述的方法，其中在从所述测定装置中移除所述分隔件之前，添加
所述水溶液和使可释放的第二结合配偶体溶解。
23.根据权利要求21所述的方法，其中在添加所述水溶液和使可释放的第二结合配偶
体溶解之前，从所述测定装置中移除所述分隔件。
24.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：比容·库马尔·西尔，胡伟平，陈韵莹，彭玉珍，赵丽心，苏迈雅，麦耀文，
申请(专利权)人：安倍生物医学亚洲太平洋私人有限公司，
类型：发明
国别省市：新加坡;SG