一种快速检测小反刍兽疫病毒的RT-RPA检测试剂盒及其用途制造技术

本发明专利技术公开了一种快速检测小反刍兽疫病毒的RT-RPA检测试剂盒及其用途。所述试剂盒包括有一对引物和一条探针，所述引物的序列如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示，所述探针的序列如SEQ ID NO.3所示。实验证明本发明专利技术的试剂盒能够特异性的检测小反刍兽疫病毒，并且在同等条件下对绵羊痘病毒、山羊痘病毒、羊口疮病毒以及口蹄疫病毒等其他重要的羊感染病毒没有扩增，说明该方法具有很好的特异性。灵敏度实验表明本发明专利技术所设计的用于检测小反刍兽疫病毒的RT-RPA引物和探针能够在40℃下，扩增20min的条件下最少可检出150个拷贝的模板，且与RT-qPCR具有很高的符合度。因此，本发明专利技术的试剂盒能够快捷、高效、灵敏的检测小反刍兽疫病毒，为小反刍兽疫病毒的鉴别诊断提供了有效技术手段。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种检测小反刍兽疫病毒的试剂盒及其用途，特别涉及一种快速检测 小反刍兽疫病毒的RT-RPA检测试剂盒及其用途，本专利技术属于预防兽医学检验领域。
技术介绍
自PCR技术诞生以来已经有三十年了。从经典PCR、实时定量PCR再到现在的数字 PCR，这一技术在不断蜕变却从未淡出我们的视野。但是该技术需要特殊昂贵的热循环仪器 以及熟练的操作人员，费时费力，难以用在现场诊断以及实验条件差的地方。重组酶聚合酶 扩增（Recombinase Polymerase Amplification，RPA)自从2006年被英国TwistDx Inc公司 开发出来以来，就被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。以此为基础的TwistAmp?核酸 扩增产品，能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测。该技术对硬件设备的要求很低， 特别适合用于体外诊断、兽医、食品安全、生物安全、农业等领域。标准TwistAmp?试剂盒 的运行温度在37°C_42°C之间。进行实时监控的体系（如TwistAmp?ex 〇试剂盒），需要能够 激发和检测荧光团的恒温装置，比如酶标仪或实时检测的热循环仪。 自本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于快速检测小反刍兽疫病毒的RT‑RPA检测试剂盒，其特征在于包括有一对引物和一条探针，其中，所述的一对引物和一条探针的序列如下所示：上游引物：5’‑CCAAGGCGGTTACGGCACCGGATACGGCAGCTGAC‑3’下游引物：5’‑ACTGCGTCCAGCCACCCTTTGTCAAGGCGAAATTC‑3’探针：5’‑GATACGGCAGCTGACTCAGAACTGAGAAGG‑FAM‑dT‑G‑THF‑G‑BHQ1‑dT‑TAAATACACACAACA‑P‑3’。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨洋，张志东，秦晓东，宋一鸣，胡高维，窦永喜，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州兽医研究所，
类型：发明
国别省市：甘肃;62