一种制备马昔瑞林的方法技术

本发明专利技术涉及一种制备马昔瑞林的方法，更具体地，涉及一种固相合成马昔瑞林的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，更具体地，涉及一种固相合成马昔瑞林的 方法。
技术介绍
马昔瑞林（macimorelin)是一种新型合成小分子，是胃促生长素受体激动剂。马 昔瑞林具有口服活性，可以刺激生长激素（GH)的分泌。马昔瑞林由阿斯利康公司研发，已 向FDA递交了新药申请（IND)。III期试验数据证实该化合物可能成为第一个获批的口服 产品，其通过诱发生长激素释放从而评价成人生长激素缺乏，准确度与现有的静脉和肌内 检查方式相仿。FDA已授予该药在AGHD治疗领域的罕见药资格。 马昔瑞林的结构式： US2009305300A1及US2002165343A1记载了用液相合成法制备马昔瑞林。该方法 的缺点是，每一步反应完成后，需要的化合物和副产物都以混合物形式存在，需要被纯化后 再进行下一步合成。因此操作较繁琐，收率较低。 因此，需要一种操作上简便且收率较高的制备马昔瑞林的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供，该方法通过固相合成法进行。所 述方法可以简化液相合成法的操作步骤，提高反应收率。 因此，本专利技术提供，该方法包括以下步骤： A采用固相多肽合成方法，将Sieber树脂脱除Fmoc，得到H2N_Sieber树脂，然后与 Fmoc-D-Trp(Boc) -0H偶联，重复脱除Fmoc步骤和偶联步骤，依次偶联Fmoc-D-Trp(Boc) -0H 和Boc_Aib-〇H，得到线性肤树脂Boc-Aib-D-Trp(Boc) _D_Trp(Boc)-Sieber树脂； B将步骤A中得到的线性肽树脂裂解，得到侧链全保护肽8〇(^让-0-1^出〇(3)-0-Trp(Boc)-NH2； C将步骤B中得到的全保护肽的酰胺基还原成氨基，得到侧链全保护肽Boc-Aib-D -Trp(Boc)-D-gTrp(Boc)-H； D将步骤C中得到的全保护肽的氨基进行酰化，得到侧链全保护马昔瑞林肽Boc-A ib-D-Trp(Boc)-D-gTrp(Boc)-CH0 ；E脱除步骤D中得到的全保护马昔瑞林肽中氮上的Boc保护基，得到马昔瑞林 H-Aib-D-Trp-D-gTrp-CHO。 本专利技术的方法与现有技术的液相合成法相比，避免了大量的纯化步骤，提高了反 应收率。【具体实施方式】 本专利技术中的宽泛的、优选的、更优选的和最优选的定义和范围可以相互组合。 术语解释 本文中，术语"固相多肽合成方法"是指多肽合成领域已知的Fmoc固相合成方法， 例如记载于FmocSolidPhasePeptideSynthesis:APracticalApproach,W.C.Chan,Peter D.White著，March2, 2000 (ISBN-10:0199637245)，英国OxfordUniversityPress。 本文中，"替代度"是指单位量的树脂负载的物质（例如苯甲酸或氨基酸等）的数 量，单位为"mm〇l/g"。 本文中，本专利技术中"肽"是指类似地通过多肽合成中的固相合成方法得到的偶联产 物。 本文中，"适量"表示所修饰的物质的用量对反应而言不是关键的，只要能达到所 需目的即可，无需限于一个具体范围，而且还可以一次添加或分多次添加，本领域技术人员 可以根据经验结合实际情况进行选择，例如通过检测反应终点来控制用量。 本文中，"适当时间"表示所修饰的时间对反应而言不是关键的，只要能达到所需 目的即可，无需限于一个具体范围，本领域技术人员可以根据经验结合实际情况进行选择， 例如通过检测反应终点来控制时间。 对本专利技术中所用缩写及其含义说明如下：表1.文中缩写的含义 本专利技术提供，该方法包括以下步骤：A采用固相多肽合成方法，将Sieber树脂脱除Fmoc，得到H2N_Sieber树脂，然后与 Fmoc-D-Trp(Boc) -0H偶联，重复脱除Fmoc步骤和偶联步骤，依次偶联Fmoc-D-Trp(Boc) -0H 和Boc-Aib-OH，得到线性肤树脂Boc-Aib-D-Trp(Boc) _D_Trp(Boc)-Sieber树脂； B将步骤A中得到的线性肽树脂裂解，得到侧链全 Trp(Boc)-NH2；C将步骤B中得到的全保护肽的酰胺基还原成氨基，得到侧链全保护肽Boc-Aib-D -Trp(Boc)-D-gTrp(Boc)-H；D将步骤C中得到的全保护肽的氨基进行酰化，得到侧链全保护马昔瑞林肽Boc-A ib-D-Trp(Boc)-D-gTrp(Boc)-CH0 ；E脱除步骤D中得到的全保护马昔瑞林肽中氮上的Boc保护基，得到马昔瑞林 H-Aib-D-Trp-D-gTrp-CHO。步骤A 在一个具体的实施方案中，在本专利技术步骤A中，固相合成方法包括将Sieber树脂 脱除Fmoc，然后用溶剂洗涤，直至用检测方法检测到完全脱除Fmoc为止；将适量的游离氨 基酸和偶联剂溶解于溶剂中，然后一起加入到固相反应柱中进行偶联反应，直至用检测方 法检测到反应终止为止；重复脱除Fmoc步骤和偶联步骤。 在一个具体的实施方案中，本专利技术步骤A中Sieber树脂的树脂替代度为 0· 3-1.Ommolg，优选 0· 6-0. 8mmol/g。 在一个具体的实施方案中，本专利技术步骤A中脱除Fmoc的试剂可为本领域已知的可 实现该目的的任何试剂，优选有机碱溶液，更优选体积浓度为5-50 %，进一步优选体积浓度 10-30%，更进一步优选体积浓度20%的哌啶的DMF溶液（DBLK)，其用量不受限制，适量即 可。脱保护反应的压力优选为常压，也可在适当提高或降低的压力下进行；反应温度优选为 室温（即20±5°C)，也可在适当提高或降低的温度下进行。 在一个具体的实施方案中，基于树脂上所负载的氨基的摩尔量计，参与偶联的游 离氨基酸Fmoc-D-Trp(Boc) -0H和Boc-Aib-ΟΗ每次的用量为2-20当量，优选3-10当量，更 优选4-7当量。 在一个具体的实施方案中，本专利技术步骤A中的偶联在适当的偶联剂的存在下进 行，偶联剂为HOBT/DIC、HATU/HOBT/DIPEA、HBTU/HOBT/DIPEA、HATU/HOAT/DIPEA、PyAOP/ H0AT/DIPEA、PyB0P/H0BT/DIPEA，优选H0BT/DIC。其中，基于偶联的游离氨基酸的摩尔量计， Η0ΒΤ、DIC、HBTU、HATU、Η0ΑΤ、PyAOP、DIPEA和PyBOP的量分别为 1-5 当量，优选 1-3 当量， 更优选1-2当量。 在一个具体的实施方案中，本专利技术步骤A中的偶联反应在适当的溶剂中进行，所 用的溶剂为常用于此目的的溶剂，例如，但不限于，DMF、DCM、DMS0、NMP、THF、乙酸乙酯、甲 醇、乙醚等及其任意混合物，优选体积比为1:1的DMF和DCM的混合溶液，溶剂的用量不受 限制，适量即可。 在一个具体的实施方案中，本专利技术步骤A中的反应在固相反应柱中进行。对固相 反应柱无特别限制，可为可实现此目的的任意固相反应柱。此外，每种氨基酸进行偶联反应 的时间通常为1-4小时，优选2-4小时，更优选2-3小时；反应压力优选为常压，也可在适当 提高或降低的压力下进行；反应温度优选为室温（即20±5°C)，也可在适当提高或降低的 温度下进行。 在一个具体的实施方案中，本专利技术步骤本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制备马昔瑞林的方法，该方法包括以下步骤：A采用固相多肽合成方法，将Sieber树脂脱除Fmoc，得到H2N‑Sieber树脂，然后与Fmoc‑D‑Trp(Boc)‑OH偶联，重复脱除Fmoc步骤和偶联步骤，依次偶联Fmoc‑D‑Trp(Boc)‑OH和Boc‑Aib‑OH，得到线性肽树脂Boc‑Aib‑D‑Trp(Boc)‑D‑Trp(Boc)‑Sieber树脂；B将步骤A中得到的线性肽树脂裂解，得到侧链全保护肽Boc‑Aib‑D‑Trp(Boc)‑D‑Trp(Boc)‑NH2；C将步骤B中得到的全保护肽的酰胺基还原成氨基，得到侧链全保护肽Boc‑Aib‑D‑Trp(Boc)‑D‑gTrp(Boc)‑H；D将步骤C中得到的全保护肽的氨基进行酰化，得到侧链全保护马昔瑞林肽Boc‑Aib‑D‑Trp(Boc)‑D‑gTrp(Boc)‑CHO；E脱除步骤D中得到的全保护马昔瑞林肽中氮上的Boc保护基，得到马昔瑞林H‑Aib‑D‑Trp‑D‑gTrp‑CHO。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈永汉，刘建，马亚平，袁建成，
申请(专利权)人：深圳翰宇药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44