一种徳舍瑞林的合成方法技术

本发明专利技术公开了一种徳舍瑞林的合成方法，属于化学制药技术领域。本发明专利技术以2-氯三苯甲基氯树脂为原料，在碱性条件下与芴甲氧羰基保护脯氨酸的羧基相连，得到芴甲氧羰基保护脯氨酸-2氯三苯甲基氯树脂，再通过接肽反应依次接入徳舍瑞林剩余氨基酸，用全保护切割试剂裂解获得全保护9肽片段，再通过乙胺化获得全保护徳舍瑞林片段，最后裂解全保护徳舍瑞林片段获得徳舍瑞林粗品。本发明专利技术通过固液结合合成德舍瑞林，收率可达84.1％。同时，避免了纯固相合成从树脂上切割不安全，不方便，缩短了合成时间，简化了纯液相片段合成的繁琐，使生产成本大大降低，适于产业化推广。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，属于化学制药
。
技术介绍
德舍瑞林又称LHRH-Hydrogel implant, RL0903,分子式是=C64H83N17O12,分子量是:1282.47，结构式如图1所示。德舍瑞林是一种人工合成的九肽，用于治疗中枢性性早熟症。德舍瑞林是一种促黄体激素释放激素(LHRH)激动剂，美国学者Shore等报告，对于晚期前列腺癌患者，每年一次给予德舍瑞林长效埋植剂皮下埋植，能长期稳定地抑制睾酮，使其保持去势水平。现有的合成方法均存在着一定的缺点，每一次脱保护均需用三氟乙酸，故三废污染多，接肽收率低，生产成本高，限制了德舍瑞林的大规模生产和应用。
技术实现思路
为解决现有技术中徳舍瑞林合成接肽收率低,三废污染多的技术问题,本专利技术提供了，采取的技术方案如下:一种徳舍瑞林合成的方法，是以2-氯三苯甲基氯树脂为原料，在碱性条件下与芴甲氧羰基保护脯氨酸的羧基相连，得到芴甲氧羰基保护脯氨酸-2氯三苯甲基氯树脂，再通过接肽反应依次接入徳舍瑞林剩余氨基酸，用全保护切割试剂裂解获得全保护9肽片段，再通过乙胺化获得全保护徳舍瑞林片段，最后裂解全保护徳舍瑞林片段获得徳舍瑞林粗品O所述方法的步骤如下:I)制备芴甲氧羰基保护脯氨酸-2氯三苯甲基氯树脂；2)在步骤I)所得的芴甲氧羰基保护脯氨酸-2氯三苯甲基氯树脂上依次接入徳舍瑞林的剩余氣基酸，获得9妝树脂；3)用全保护切割试剂裂解步骤2)所得的9肽树脂，获得全保护9肽片段；4)乙胺化步骤3)所得全保护9肽片段，获得全保护徳舍瑞林片段；5)裂解步骤4)所得全保护徳舍瑞林片段，获得徳舍瑞林粗品。所述方法步骤I)所述制备芴甲氧羰基保护脯氨酸-2氯三苯甲基氯树脂，具体为用二氯甲烷浸泡2氯三苯甲基氯树脂，充分溶胀后吹干，加入接肽试剂溶解的芴甲氧羰基保护脯氨酸，反应后吹干，再分别用N，N- 二甲基甲酰胺和甲醇洗涤吹干，获得芴甲氧羰基保护脯氨酸2-氯三苯甲基氯树脂；所述接肽试剂是由N，N- 二异丙基乙胺、N，N- 二甲基甲酰胺按体积比=1:15混合得到，2-氯三苯甲基氯树脂的体积浓度为5-20ml/g，参与反应的芴甲氧羰基保护脯氨酸摩尔数为2-氯三苯甲基氯树脂的1.5-2倍。方法2)所述中依次接入徳舍瑞林的剩余氨基酸，具体为按照徳舍瑞林9肽序列，从脯氨酸端依次接入除脯氨酸以外的剩余8个氨基酸:精氨酸、亮氨酸、色氨酸、酪氨酸、丝氨酸、色氨酸、组氨酸和焦谷氨酸，每次接入氨基酸均经过脱保护反应和接肽反应。所述方法中脱保护反应的条件为:脱保护剂为哌啶、N, N- 二甲基甲酰胺按体积比=1:4混合，脱保护剂相对于被接肽树脂的添加量为5-20ml/g树脂，反应温度为20_25°C，反应时间为5-15min ；所述接肽反应的条件为:接肽试剂为N，N- 二异丙基乙胺和N，N- 二甲基甲酰胺按体积比=1:15混合，被接物体积浓度为5-20ml/g，接入物摩尔数为被接物的2_3倍，反应温度为20-25°C，反应时间为1-1.5h。方法3)所述用全保护切割试剂裂解，具体为向步骤2)所得的9肽树脂中加入按体积比1:99混合的三氟乙酸和二氯甲烷，反应1-3小时，过滤，收集滤液，将滤液减压蒸馏，获得全保护的9肽片段。方法4)所述的乙胺化，具体为将1-羟基苯并三唑加入到方法3)所得的全保护9肽片段中，再加入二异丙基碳二亚胺，20-25°C下反应24小时后减压蒸馏，获得全保护的德舍瑞林片段。方法5)所述的裂解全保护的德舍瑞林片段，具体为将步骤4)所得的全保护的德舍瑞林片段加入预冷至0-10°C的切肽试剂中，反应2-3小时，加入乙醚沉淀，收集沉淀物，用乙醚淋洗3次，真空干燥，获得德舍瑞林粗品。所述切肽试剂是三氟乙酸、三异丙基硅烷和水按体积比95:2.5:2.5组成的混合物。 所述合成方法的具体步骤如下:I)取150g2_氯三苯甲基氯树脂，用1000ml 二氯甲烷浸泡，使树脂充分溶胀，再取91.1g芴甲氧羰基保护脯氨酸，用1000ml接肽试剂溶解，加入反应器，20-25°C反应1.5小时后吹干，分别用N，N- 二甲基甲酰胺和甲醇洗涤吹干，获得芴甲氧羰基保护脯氨酸2-氯三苯甲基氯树脂；2)以步骤I)所述的芴甲氧羰基保护脯氨酸2-氯三苯甲基氯树脂为被接物，按照徳舍瑞林9肽序列，从脯氨酸端依次接入精氨酸、亮氨酸、色氨酸、酪氨酸、丝氨酸、色氨酸、组氨酸和焦谷氨酸；每次接入前，向被接物中加1000ml脱保护试剂，室温下反应15分钟，吹干，分别用N，N-二甲基甲酰胺和甲醇洗涤3次，吹干，再取540mmol接入物，用173.4g 0_(苯并三唑-1-氧)-N, N, N, N-四甲基脲鎗六氟硼酸盐，72.9gl-羟基苯并三唑，用1000ml接肽试剂溶解，加入反应器，20-25°C反应1.5h，吹干后再分别用N，N-二甲基甲酰胺和甲醇洗涤3次，吹干，接完焦谷氨酸后获得9肽树脂；3)将512.3g步骤2)所的9肽树脂转移至5000ml的容器中，加入3500ml预先配制好的体积比为1:99的三氟乙酸和二氯甲烷中反应2.5小时，过滤，收集滤液，将滤液减压蒸馏，获得361.2g全保护的9肽片段；4)将26.1gl-羟基苯并三唑和27.2g乙胺盐酸盐加入到512.3g步骤3)所得全保护的9肽片段中，再加入39ml 二异丙基碳二亚胺，20-25°C下反应24h，减压蒸馏，获得全保护的德舍瑞林片段；5)向步骤4)所得的全保护的德舍瑞林片段中加入到3500ml预冷至0_10°C的切肽试剂，反应2-3小时，加入1000Oml乙醚沉淀，收集沉淀物，用乙醚淋洗3次，真空干燥，获得德舍瑞林粗品。本专利技术的有益效果是:通过固液结合合成德舍瑞林，避免了纯固相合成从树脂上切割不安全，不方便，缩短了合成时间，简化了纯液相片段合成的繁琐，使生产成本大大降低，提高了市场竞争力。【附图说明】图1为徳舍瑞林的结构式。【具体实施方式】下面结合实施例对本专利技术做进一步说明，但本专利技术不受实施例的限制。实施例11.制备 Fmoc-Pro-CTC 树脂Fmoc-Pro-CTC树脂的制备，按照以下步骤进行:I).取 Ig CTC树脂(Loading: 1.2mmol/g, 1.2mmol)，用 15ml DCM浸泡，使树脂充分溶胀；2).取0.607g Fmoc-Pro-OH(FW:337.4，1.8mmol)，用 15ml 接肽试剂溶解，加入反应器，室温反应1.5小 时；3)吹干，分别用DMF和甲醇洗涤3次，吹干。2.徳舍瑞林氨基酸的连接2.1 制备 Fmoc-Arg (pbf)-Pro-CTC 树脂I).加15ml脱保护试剂，室温下反应15分钟，吹干，分别用DMF和甲醇洗涤3次，吹干，2)取 2.4gFmoc-Arg(pbf)-OH(FW:648.8，3.6mmol), 1.2gTBTU(FW:321，3.6mmol)，0.5gH0BT (Fff: 135，3.6mmol)，用15ml接肽试剂溶解，加入反应器，室温反应1.5h，3)吹干，分别用DMF和甲醇洗涤3次，吹干。2.2 制备 Fmoc-Leu-Arg (pbf) -Pro-CTC 树脂I).加15ml脱保护试剂，室温下反应15分钟，吹干，分别用DMF和甲醇洗涤3次，吹干；2).取 1.27g本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种徳舍瑞林的合成方法，其特征在于，以2‑氯三苯甲基氯树脂为原料，在碱性条件下与芴甲氧羰基保护脯氨酸的羧基相连，得到芴甲氧羰基保护脯氨酸‑2氯三苯甲基氯树脂，再通过接肽反应依次接入徳舍瑞林剩余氨基酸，用全保护切割试剂裂解获得全保护9肽片段，再通过乙胺化获得全保护徳舍瑞林片段，最后裂解全保护徳舍瑞林片段获得徳舍瑞林粗品。

【技术特征摘要】
1.一种徳舍瑞林的合成方法，其特征在于，以2-氯三苯甲基氯树脂为原料，在碱性条件下与芴甲氧羰基保护脯氨酸的羧基相连，得到芴甲氧羰基保护脯氨酸-2氯三苯甲基氯树脂，再通过接肽反应依次接入徳舍瑞林剩余氨基酸，用全保护切割试剂裂解获得全保护9肽片段，再通过乙胺化获得全保护徳舍瑞林片段，最后裂解全保护徳舍瑞林片段获得徳舍瑞林粗品。2.权利要求1所述方法，其特征在于，步骤如下: 1)制备芴甲氧羰基保护脯氨酸-2氯三苯甲基氯树脂； 2)在步骤1)所得的芴甲氧羰基保护脯氨酸-2氯三苯甲基氯树脂上依次接入徳舍瑞林的剩余氨基酸，获得9肽树脂； 3)用全保护切割试剂裂解步骤2)所得的9肽树脂，获得全保护9肽片段； 4)乙胺化步骤3)所得全保护9肽片段，获得全保护徳舍瑞林片段； 5)裂解步骤4)所得全保护徳舍瑞林片段，获得徳舍瑞林粗品。3.权利要求1或2所述方法，其特征在于，步骤I)制备所述芴甲氧羰基保护脯氨酸-2氯三苯甲基氯树脂，具体为用二氯甲烷浸泡2氯三苯甲基氯树脂，充分溶胀后吹干，加入接肽试剂溶解的芴甲氧羰基保护脯氨酸反应后吹干，再分别用N，N-二甲基甲酰胺和甲醇洗涤吹干，获得芴甲氧羰基保护脯氨酸2-氯三苯甲基氯树脂； 所述接肽试剂由N，N-二异丙基乙胺，N，N-二甲基甲酰胺按体积比1:15混合得到，2-氯三苯甲基氯树脂的体积浓度为5-20ml/g，芴甲氧羰基保护脯氨酸摩尔数为2-氯三苯甲基氯树脂的1.5-2倍。4.权利要求1或2所述方法，其特征在于，步骤2)所述向芴甲氧羰基保护脯氨酸-2氯三苯甲基氯树脂依次接入徳舍瑞林的剩余氨基酸时，每次接入氨基酸均经过脱保护反应和接肽反应。5.权利要求4所述方法，其特征在于，所述脱保护反应，条件为脱保护剂哌啶:N，N-二甲基甲酰胺体积比=1:4，脱保护剂相对于被接肽树脂的添加量为5-20ml/g树脂，反应温度为20-25°C，反应时间为5-15min ； 所述接肽反应，条件为接肽试剂N，N-二异丙基乙胺:N，N-二甲基甲酰胺体积比=I: 15，被接物体积浓度为5-20ml/g，接入物摩尔数为被接物的2_3倍，反应温度为20_25°C，反应时间为1-1.5h。6.权利要求1或2所述方法，其特征在于，步骤3)所述用全保护切割试剂裂解，具体为向步骤2)所得的9肽树脂中加入体积比为1:99的三氟乙酸和二氯甲烷中反应1-3小时，过滤，收集滤液，将滤液减压蒸馏，获得全保护的9肽片段。7.权利要求2所述方法，其特征在于，步...

【专利技术属性】
技术研发人员：张旭光，汪国兴，
申请(专利权)人：安徽瀚海博兴生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽;34