【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物
，具体涉及一种利用纳米金修饰的材料用于蛋白质N末端分离的方法。
技术介绍
蛋白质N末端的氨基酸起点常与数据库中的起始位点不同。蛋白质在翻译和加工过程中，N端可能涉及到RNA的剪切，多种可选的翻译起点，信号肽的切割，以及各种化学层面的翻译后修饰等过程，而导致蛋白质N末端的复杂性。鉴定蛋白质N末端序列对于理解蛋白质的生物功能等具有重要意义。目前，蛋白质N末端的方法主要基于正向富集和反向去除策略。正向富集策略的主要原理是先在蛋白质N末端引入特异性基团，经胰蛋白酶酶切后，蛋白变成肽段，再利用相应的材料对蛋白质N末端进行特异性地分离。反相去除策略主要原理是先在蛋白质层面进行所有的氨基全封闭，经过胰蛋白酶酶切后，蛋白变成肽段，再利用非N末端肽段上的游离氨基，结合氨基反应材料去除非N末端肽段，并对蛋白质N末端肽段进行分离富集。反相去除方法相较正向富集方法，有望富集到更多因化学修饰而导致游离氨基封闭的N末端，然而，去除材料的效率相对略有不足。因此，许多研究合成不同的可离去基团修饰的材料，包括三氟乙磺酸基材料等，利用氨基的亲核性对非N末端肽段进行...
【技术保护点】
一种纳米金修饰的石墨烯用于蛋白质N末端分离的方法，其特征在于，具体步骤为：首先，合成纳米金修饰的石墨烯；然后，对蛋白上的所有游离氨基进行封闭，再对封闭蛋白进行溶液酶解；然后，用特劳特试剂对非N末端肽段进行巯基衍生，加入纳米金修饰的石墨烯对含巯基的非N末端肽段进行分离富集；最后，利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱进行蛋白质N末端的检测。
【技术特征摘要】
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