新南五味子酸A在制备抗埃博拉病毒药物中的应用制造技术

技术编号:12851922 阅读:93 留言:0更新日期:2016-02-11 16:17
本发明专利技术涉及医药技术领域。本发明专利技术提供了一种从五味子中提取的化合物单体—新南五味子酸A在制备抗埃博拉病毒药物中的应用。本发明专利技术采用表面结构与埃博拉病毒相似的单循环感染的埃博拉假病毒颗粒为模型,利用埃博拉病毒的多种易感细胞系,包括人胚肾成纤维细胞293T,猴肾细胞Vero、人肝癌细胞HepG2、人肺泡上皮细胞A549、人脐静脉血管内皮细胞HUVEC,检测新南五味子酸A的抗埃博拉病毒活性。实验结果显示,新南五味子酸A能有效抑制埃博拉假病毒对上述各种易感细胞的感染,作为潜在的抗埃博拉病毒药物,具有进一步开发前景。

【技术实现步骤摘要】

: 本专利技术涉及医药
,具体涉及一种从五味子中提取的化合物单体一新南五 味子酸A在制备抗埃博拉病毒药物中的应用D
技术介绍
: 新南五味子酸A(NeokadsuranicacidA)是从华中五味子(Schisandra sphenantherarehd.et.wils)果实中分离得到的化合物,目前尚无文献报导其药效。有 文献报道,五味子中含大量抗病毒活性物质,对人类免疫缺陷病毒、乙型肝炎病毒等病毒的 感染具有明显抑制作用(参见文献:MaWH,LuY,ChenDF.Dibenzocyclooctanelignans fromthestemsofSchisandrawilsoniana.PlantaMed. 2013 ;79 (12):1051-5.; XuL,GrandiN,DelVecchioC,MandasD,CoronaA,PianoD,EspositoF,Parolin C,Tramontane)E.FromthetraditionalChinesemedicineplantSchisandra chinensisnewscaffoldseffectiveonHIV-1reversetranscriptaseresistant tonon-nucleosideinhibitors.JMicrobiol.2015 ;53(4):288-93.;XueY,LiX,Du X,LiX,WangW,YangJ,ChenJ,PuJ,SunH.onandanti-hepatitisBvirusactivity ofdibenzocyclooctadienelignansfromthefruitsofSchisandrachinensis. Phytochemistry. 2015 ;116:253-61.)〇 本专利技术对从华中五味子中提取的如下十三种化合物单体进行了抗埃博拉病毒活 性分析。 埃博拉(Ebola)病毒感染对人类健康的危害及其严重,其死亡率达50~90%,缺 少有效的治疗药物。埃博拉病毒为高感染、高致病性病原体,真正的埃博拉病毒研究只能在 生物安全四级实验室里开展。 假病毒是表面结构与真正病毒高度相似的一种模拟病毒,具有感染性,其感染特 性与真病毒相同:1,靶细胞的特异性相同;2,对靶细胞受体的依赖性相同;3,侵入靶细胞 的途径相同;4,针对真病毒的保护性抗体能抑制假病毒的感染;5,阻断真病毒侵入的药 物能抑制假病毒的感染。因此,假病毒技术被广泛用作高感染、高致病性病毒的替代模 型,在抗病毒药物筛选和疫苗评价方面发挥重要作用。(ElshabrawyHA,FanJ,Haddad CS,RatiaK,BroderCC,CaffreyM,PrabhakarBS.Identificationofabroad-spectrum antiviralsmallmoleculeagainstsevereacuterespiratorysyndromecoronavirus andEbola,Hendra,andNipahvirusesbyusinganovelhigh-throughputscreening assay.JVirol. 2014 ;88(8) :4353-65.) 本领域一直致力于寻找到能够有效抗埃博拉(Ebola)病毒的药物,特别是中药和 中药单体。
技术实现思路
: 本专利技术的目的在于提供一种能够有效抗埃博拉病毒的药物,本专利技术的另一目的在 于提供新南五味子酸A的新的医药用途。 本专利技术米用表面结构与埃博拉病毒相似的埃博拉假病毒为模型,利用埃博拉病毒 的多种易感细胞系,包括人胚肾成纤维细胞293T,猴肾细胞Vero、人肝癌细胞Η印G2、人肺 泡上皮细胞Α549、人脐静脉血管内皮细胞HUVEC,对从华中五味子中提取的十余种化合物 单体进行抗埃博拉病毒活性检测。 结果显示,只有新南五味子酸Α能有效抑制埃博拉假病毒侵入上述各种易感细 胞,本专利技术证实了新南五味子酸A能有效抑制埃博拉假病毒感染靶细胞,并且毒性较小,能 够作为潜在的抗埃博拉病毒药物,具有进一步开发前景。 本专利技术提供了新南五味子酸A在制备抗埃博拉病毒药物中的应用。 本专利技术所述的新南五味子酸A的化学结构如下: 新南五味子酸A可以通过市售方式购得,也可以通过文献记载方法提取 得到(陈佳宝,刘佳宝,崔保松,李帅。南五味子根的化学成分研究.中草药, 2015,46(2) :178-184. )〇 本专利技术所述的制备抗埃博拉病毒药物,是指预防或治疗埃博拉病毒感染的药物。 本专利技术所述的药物,可以是以新南五味子酸A作为唯一活性成份,也可以是包含 了新南五味子酸A的活性成份。 本专利技术所述的药物,可以是由药物活性成分和药学上可接受的辅料组成的药物组 合物。 所述的药学上可接受的辅料是指药学领域常规的药物辅料,其中,稀释剂、赋形剂 如水等;粘合剂如纤维素衍生物、明胶或聚乙烯吡咯烷酮等;填充剂如淀粉等;崩裂剂如碳 酸钙或碳酸氢钠;也可以在药物组合物中加入其他辅助剂如香味剂和/或甜味剂。 所述的药物组合物可采用医学领域常规的方法,可采用医学领域常规的方法,将 新南五味子酸A作为全部或部分活性成分,与药学上可接受的辅料制成各种剂型。当口服 时,可将其制备成常规的固体制剂如片剂、粉剂或胶囊剂等;用于注射时,可将其制备成注 射液。 在各种药物制剂中,活性成分的重量含量为0. 1%~99. 9%,优选的重量含量为 0· 5 ~90%〇 本专利技术为寻找抗埃博拉病毒药物提供了新的药物。【具体实施方式】: 以下结合具体实施例,对本专利技术作进一步说明。应理解,以下实施仅用于说明本发 明而非用于限定本专利技术的范围。 实施例1 一、实验药物、试剂及材料 1.化合物:新南五味子酸A、五味子醇甲、五味子素、五味子甲素、五味子乙素、五 味子酯甲、五味子丙素、五味子酯乙、五味子酚、五味子酯戊、五味子酮、五味子脂甲、右旋五 味子乙素由中国人民解放军第二军医大学药学院提供。 2.人胚肾成纤维细胞系293T、猴肾细胞系Vero、人肺泡上皮细胞系A549、人脐静 脉血管内皮细胞系HUVEC、人肝癌细胞系Η印G2、人肝癌细胞系Huh7,购自中国科学院上海 细胞所,由中国人民解放军第二军医大学基础部微生物教研室保存。 3.DMEM细胞完全细胞培养液,含10%胎牛血清、0.03%谷氨酰胺、非必需氨基酸、 氨苄青霉素和链霉素l〇〇U/ml,调pH至7. 4。 4.细胞消化液,含0.25%胰蛋白酶,用磷酸缓冲液配制。 5.阳离子脂质体转染试剂Lipofectamine2000为Invitrogen公司产品。 6.埃博拉假病毒颗粒制备用质粒:pCMV为含人巨细胞病毒启动子和牛生长激素 转录终止信号的真核细胞质粒表达载体;pCMV-GP,为埃博拉病毒扎伊尔新流行株(Genbank aCCeSsi〇n:KM034550. 1)的包膜蛋白表达质粒,含有该株病毒包膜蛋白全长基因,根据 Genbank公布的序列委托上海捷瑞生物技术公司合成;pCMV-Gag/Pol,为人类免疫缺陷病 毒衣壳蛋白和逆转录酶表达质粒;pCMV-Rev,为人类免疫缺陷病毒调节蛋白Rev表达质粒; pLenti-EGFP为含绿色荧光本文档来自技高网
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【技术保护点】
新南五味子酸A在制备抗埃博拉病毒药物中的应用。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:朱善邦陈行辉
申请(专利权)人:中国人民解放军第二军医大学
类型:发明
国别省市:上海;31

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