光学纯7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种光学纯7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇，其中所述R-型7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇化合物结构式如式(I)所示，所述S-型7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇化合物结构式如式(II)所示。本发明专利技术还公开了所述化合物在抑制细菌磷脂酰胆碱特异性的磷脂酶C(PC-PLC)活性中的应用，本发明专利技术的发现为R型和S型7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇作为一种有效的工具，用于抑制细菌的PC-PLC活性研究及研制和开发有关由细菌PC-PLC导致的人类疾病治疗药物奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】
光学纯7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇及其应用
本专利技术涉及7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇及其应用，尤其涉及光学纯(R-型和S-型)7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇及其在抑制细菌磷脂酰胆碱特异性的磷脂酶C(PC-PLC)中的应用。
技术介绍
PC-PLC，即磷脂酰胆碱特异性的磷脂酶C，是磷脂酶家族的重要成员之一，能够特异性水解甘油磷脂分子的第3位磷酸酯键，释放磷酸胆碱和二酰基甘油。PC-PLC是普遍存在于各种细胞内的一种重要的酶，其基本生化特性、功能和亚细胞分布等具有细胞特异性。它通过参与细胞信号转导调节多种细胞的凋亡、肿瘤细胞的增殖、转移和分化；另外，PC-PLC不仅是某些细菌在真核细胞之间的传播的重要武器，在免疫细胞的细胞毒性以及病理炎症反应中也起重要作用。某些细菌的PC-PLC具有致病性，甚至会威胁到人类的生命，例如由李斯特菌PC-PLC引起的李斯特菌病。李斯特菌病是由单增李斯特菌感染引起的食源性、致命性疾病，能够通过动物感染人类。细胞内的病原体可以在细胞间进行传播，因此能够穿过血脑、肠以及胎盘屏障。尤其对于年老者，孕妇和免疫力差的群体来说，李斯特菌病具有极大的健康危害性。感染了李斯特菌后，会引起一系列严重的疾病，包括败血症，脑炎，脑膜炎，关节炎，流产，死胎，围产期感染和肠胃炎等等，所以寻找预防和治疗这种疾病的方法迫在眉睫。然而，有关李斯特菌病的发病机制目前尚不清楚，而PC-PLC作为细菌重要的毒性因子，在李斯特菌的感染和传播过程中发挥着重要的作用。若从抑制PC-PLC活性的角度有望能找到解决办法。目前已经报道的PC-PLC特异性抑制剂是D609(tricyclodecan-9-yl-xanthogenate)，能专一高效地抑制PC-PLC的活性，因而其成为研究PC-PLC功能的良好工具。但其远远不能满足科研和临床治疗的需求，因此，研发更多具有抑制PC-PLC活性的化合物或制剂势在必行。苯并[b][1,4]氧氮杂卓衍生物是一类非常重要的结构单元，许多天然产物和合成药物中都含有该结构单元。例如阿莫沙平(Amoxapine),含有二苯并氧氮杂卓类结构，具有很强的抗抑郁和精神兴奋作用，抗抑郁谱广，对其他抗抑郁药无效的内源性抑郁病人也有效。生物体中的核酸、蛋白质、酶以及细胞表面受体是手性的，在生物体系的复杂手性环境中，手性分子的精确识别导致手性体系产生宏观的物理与化学性质的变化以及生理反应。当手性药物分子作用于生物体时，通过与体内酶、核酸等大分子中固有的结合位点产生诱导契合，从而抑制(或激动)该大分子的生理活性，达到治疗的目的，换言之，药物分子必须与靶分子进行严格地手性识别和匹配才能发生药理作用。不同构型的药物分子产生的对映相互作用往往不同，甚至截然相反，具有截然不同的药理和毒理作用。虽然一些研究报道了含有苯并[b][1,4]氧氮杂卓结构单元的化合物，但是有关光学纯(R型和S型)7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇及其在抑制细菌PC-PLC活性中的应用，目前国内外还没有报道。
技术实现思路
针对现有技术的不足，本专利技术要解决的问题是提供一种光学纯(R-型和S-型)7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇及其在抑制细菌磷脂酰胆碱特异性的磷脂酶C(PC-PLC)中的应用。本专利技术所述的光学纯7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇，其特征在于：所述R-型7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇化合物结构式如式(I)所示，所述S-型7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇化合物结构式如式(II)所示，式(I)式(II)。上述的光学纯7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇化合物的制备方法，步骤是：回流条件下，将光学纯2，4-二硝基苯氧甲基环氧乙烷与酸性介质以摩尔数为1﹕(1～9)的比例溶解到极性混合溶剂中，再以2，4-二硝基苯氧甲基环氧乙烷的摩尔数计，加入其3～6倍量的还原剂；反应混合物继续回流，至TLC检测反应完全；冷却至室温，以饱和Na2CO3溶液调其pH＝8，以C盐抽滤，常规方法浓缩掉滤液中的极性溶剂，以乙酸乙酯萃取；水洗乙酸乙酯相，无水MgSO4干燥，常规过滤，浓缩，得光学纯7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇粗品；将上述粗品，以体积比为1﹕3的石油醚/乙酸乙酯或乙醇作展开剂，经硅胶柱层析分离，得光学纯7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇纯品。其中：在上述的化合物制备方法中，所述的酸性介质优选是醋酸或氯化铵；所述的还原剂优选是铁粉或锌粉。在上述的化合物制备方法中：所述的2，4-二硝基苯氧甲基环氧乙烷与酸性介质及还原剂的摩尔数之比优选为1﹕(4～9)﹕(3～5)。在上述的化合物制备方法中：所述的极性混合溶剂为体积比优选是1﹕(1～9)的H2O/EtOH(水/乙醇)混合溶剂。上述光学纯7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇化合物制备反应式如下：本专利技术所述光学纯7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇在抑制细菌磷脂酰胆碱特异性的磷脂酶C(PC-PLC)活性中的应用。其中：所述R-型7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇能有效抑制细菌PC-PLC活性的剂量优选为5～10μM。其中：所述S-型7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇能有效抑制细菌PC-PLC活性的剂量优选为5～10μM。为了更好地理解本专利技术的实质，下面结合R型和S型7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇的细胞生物学实验及结果来阐明其在抑制细菌PC-PLC活性中的新用途。1.R型和S型7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇对细菌PC-PLC活性的影响实验组：分别将浓度为5μM，10μM，20μM的R型和S型7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇以及D609(浓度为5，10，20μM)与0.015U(0.15U/mL)蜡状芽孢杆菌的PC-PLC混匀并稀释至100uL，37℃孵育3h，再用AmplexRedPC-PLC-specificassaykit(MolecularProbesInc.,A12218)检测PC-PLC的活性。各个实验组的对照：用0.02％DMSO(v/v)代替0.015U(0.15U/mL)蜡状芽孢杆菌的PC-PLC。结果表明：与D609这一实验组相比，5μM的R型和S型7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇处理组就能够明显抑制蜡状芽孢杆菌的PC-PLC活性，而相同浓度下D609不起作用(见附图1)，由此可以看出R型和S型7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇在抑制细菌PC-PLC活性方面更具优势。2.R型和S型7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种光学纯7‑氨基‑2,3,4,5‑四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓‑3‑醇，其特征在于：所述R‑型7‑氨基‑2,3,4,5‑四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓‑3‑醇化合物结构式如式(I)所示，所述S‑型7‑氨基‑2,3,4,5‑四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓‑3‑醇化合物结构式如式(II)所示，

【技术特征摘要】
1.一种光学纯7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4]氧氮杂卓-3-醇，其特征在于：所述R-型7-氨基-2,3,4,5-四氢苯并[b][1,4...

【专利技术属性】
技术研发人员：苗俊英，赵宝祥，张尚立，苏乐，赵静，路玮，赵璇，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：山东;37