一种DNA提取的方法技术

技术编号:12815276 阅读:437 留言:0更新日期:2016-02-07 08:56
本发明专利技术公开了一种DNA提取的方法,该方法包括以下步骤:1)裂解;2)离心;3)加入吸附液;4)加入磁珠;5)DNA与磁珠结合;6)磁力架吸附;7)吸去吸附液;8)第一次洗涤;9)磁力架吸附;10)第二次洗涤;11)磁力架吸附;12)烘干磁珠;13)DNA洗脱等步骤,本发明专利技术方法采用移管过程取代手工DNA提取过程中采用的离心机离心步骤,充分去除残液,实现了DNA提取的自动化(非人工),提高了DNA提取的效率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种DNA提取的方法,具体是一种利用自动化平台进行DNA提取的方法。
技术介绍
磁珠法提取DNA试剂盒要比传统的方法,例如CheLexlOO法、有机法、二氧化硅法、盐析法等更为简单、方便,转移离心管的次数较少,不易污染等特点,因此该方法得到大范围利用。如专利文献CN104830833A公开的一种磁珠法结合离心套管提取DNA的方法,该方法包括以下步骤:1)将检材置入离心套管的内套管内,将TES缓冲液、十二烧基肌氨酸钠、蛋白酶K按体积比混匀后加入离心套管的内套管内,置金属浴上裂解;2)加入吸附液再次离心;3)去除内套管,加入吸附液,加入磁珠悬浊液置自动涡旋仪上吸附;4)置于磁力架上吸去上清后置离心机内离心再次吸去残液;5)加入冰乙醇涡旋后,置于磁力架上,充分吸去上清,置离心机内离心再次吸去残夜;6)烘干磁珠,加入洗脱液充分涡旋后置金属浴上孵化;7)PCR扩增液内扩增;本专利技术方法检出率高,最终模板保有量达50-70%,特别适用于微量检材的检验,可检出模板含量在lOOpg以上的现场DNA检材。但是如上所述的提取DNA方法基本上均采用手工进行,手动提取DNA的过程需本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种DNA提取的方法,其特征在于包括以下步骤:(1)将检材放入2mL离心套装的离心套管内,加入裂解液,在56~99℃下进行裂解10~30分钟;(2)在离心机上高速离心,离心后去离心套管,保留2mL离心管以及管内裂解后产物,将离心管放置在样品板上;(3)利用吸头向离心管加入吸附液1~1.2mL;(4)将10~16μL磁珠充分悬浊后分装到离心管中;(5)将样品板置于振荡器上振荡15~20分钟,使检材内的DNA与磁珠充分吸附结合;(6)DNA吸附结束后,通过机械手将样品板置于磁力架上吸附15~30秒,使磁珠充分贴壁;(7)通过吸头将离心管内混合液体吸出;(8)第一次洗涤:在离心管中加入漂洗液,然后充...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:刘宗伟汤晓吴渊虬杨超黄嘉伟言梦非管卫东
申请(专利权)人:常熟市公安局
类型:发明
国别省市:江苏;32

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