本文中描述了针对癌症的肽疫苗。具体地，提供了衍生自KNTC2基因的分离的表位肽，其引发CTL，并且如此适合于在癌症免疫的背景中使用。创造性的肽涵盖KNTC2衍生的肽和其经修饰的型式(其中取代、缺失、插入或添加了1、2或几个氨基酸)两者，只要此类经修饰的型式保留初始序列的必需的CTL诱导能力。进一步提供了编码此类肽的多核苷酸及包含任何此类肽或多核苷酸作为活性剂的药物组合物。还提供了靶向此类肽的抗原呈递细胞和分离的CTL，及用于诱导抗原呈递细胞或CTL的方法。此外，本发明专利技术提供了用于治疗和/或防范(即预防)癌症(肿瘤)，和/或预防其转移性或术后复发的方法，及用于诱导CTL的方法，用于诱导抗肿瘤免疫的方法，其使用本发明专利技术的衍生自KNTC2的表位肽，编码肽的多核苷酸，或呈递肽的抗原呈递细胞，或药物组合物进行。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】KNTC2肽及包含它们的疫苗
本专利技术涉及生物科学领域，更具体的说是癌症治疗领域。具体而言，本专利技术涉及作为癌症疫苗有效的新肽，及用于治疗和/或预防肿瘤的药物。优先权本申请要求2013年3月12日提交的美国临时申请61/777,334的权益，通过述及将其全部内容收入本文用于所有目的。
技术介绍
已经显示CD8阳性细胞毒性T细胞细胞(CTL)可识别主要组织相容性复合物(MHC)I类分子上找到的肿瘤相关抗原(TAA)所衍生的表位肽，然后杀死肿瘤细胞。从TAA的第一个例子(黑素瘤抗原(MAGE)家族)被发现起，主要通过免疫学手段(NPL1-2)已经发现了许多其它TAA。这些TAA中的一些目前正在作为免疫治疗靶标进行临床开发。有利的TAA对于癌细胞的扩增和存活而言是不可或缺的。使用这样的TAA作为免疫治疗的靶标，可以最大程度的减小人们熟知的癌细胞免疫逃逸的风险。癌细胞免疫逃逸可归因于治疗驱动的免疫选择(therapeuticallydrivenimmuneselection)而导致的TAA删除、突变或下调。因此，能够诱导强力且特异性的抗肿瘤免疫应答的新TAA的鉴定保证了进一步开发。如此利用针对各种类型癌症的肽疫苗接种策略的临床考察正在进行中(NPL3-10)。迄今为止，已经有数项使用这些TAA衍生的肽进行临床试验的报告。不幸的是，这些癌症疫苗试验至今仅产生较低的客观应答率(NPL11-13)。因此，仍然对作为免疫治疗靶的新TAA存在需求。KNTC2(又称为“动粒(kinetchore)关联2”、HEC1或NDC80)是Ndc80复合物的成员，该Ndc80复合物由Ndc80(KNTC2)-Nuf2(CDCA1)和Spc24-Spc25(NPL14)的两种亚复合物构成。动粒外板内的CDCA1-KNTC2复合物的附着位点产生染色体移动的微管依赖性力，并且调节在动粒上的纺锤体检查点蛋白装配(NPL15)。在通过使用含有27,648种基因的cDNA微阵列的全基因组表达概况分析阐明非小细胞肺癌(NSCLC)中的分子机制的过程中，发现KNTC2在NSCLC中频繁过表达(NPL16,17,18,19,20)。Northern印迹分析揭示了此基因转录物在肺癌组织中高度表达，但是在除了睾丸外的正常组织中不表达。此外，显示了随后用siRNA敲低KNTC2表达显著抑制NSCLC细胞的生长(NPL21,PTL1)。还已经报告了KNTC2在癌症组织中上调，诸如膀胱癌、乳腺癌、宫颈癌、胆管细胞癌、慢性髓样白血病(CML)、结直肠癌、食道癌、非细胞肺癌(NSCLC)、淋巴瘤、骨肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肾癌、小细胞肺癌(SCLC)和软组织肿瘤(PTL2)。另外，本专利技术人已经鉴定出KNTC2肽，其可以结合HLA-A24并诱导CTL，并且可用于靶向HLA-A24阳性患者的免疫疗法(PTL2)。然而，尽管这些肽可以适合于表达HLA-A24亚型的患者，但是仍然需要在表达其它类型的HLA抗原的患者中诱导CTL的肽。引用表专利文献[PTL1]WO2007/013480[PTL2]WO2008/102557非专利文献[NPL1]BoonT,IntJCancer1993,54(2):177-80[NPL2]BoonT&vanderBruggenP,JExpMed1996,183(3):725-9[NPL3]HarrisCC,JNatlCancerInst1996,88(20):1442-55[NPL4]ButterfieldLHetal.,CancerRes1999,59(13):3134-42[NPL5]VissersJLetal.,CancerRes1999,59(21):5554-9[NPL6]vanderBurgSHetal.,JImmunol1996,156(9):3308-14[NPL7]TanakaFetal.,CancerRes1997,57(20):4465-8[NPL8]FujieTetal.,IntJCancer1999,80(2):169-72[NPL9]KikuchiMetal.,IntJCancer1999,81(3):459-66[NPL10]OisoMetal.,IntJCancer1999,81(3):387-94[NPL11]BelliFetal.,JClinOncol2002,20(20):4169-80[NPL12]CouliePGetal.,ImmunolRev2002,188:33-42[NPL13]RosenbergSAetal.,NatMed2004,10(9):909-15[NPL14]CiferriC,etal.JBiolChem2005；280:29088-95[NPL15]WiggeP.A,etal.JCellBiol.2001；152:349-60[NPL16]KikuchiT,etal.,Oncogene.2003；22:2192-205[NPL17]SuzukiC,etal.,CancerRes.2003；63:7038-41[NPL18]KakiuchiS,etal.,MolCancerRes.2003；1:485-99[NPL19]ZembutsuH,etal.,IntJ.Oncol.2003；23:29-39[NPL20]KakiuchiS,etal.,HumMolGenet.2004；13:3029-43[NPL21]HayamaS,etal.CancerRes.2006Nov1；66(21):10339-48专利技术概述本专利技术至少部分基于可以充当免疫疗法的合适靶物的新肽的发现。由于TAA一般被免疫系统察觉为“自身的”，因此经常没有先天性免疫原性，合适的靶物的发现仍然是有意义的。在本专利技术的过程中，证明了KNTC2(一种在SEQIDNO:79中所示的典型氨基酸序列；一种在SEQIDNO:77(GenBank登录号NM_006101)或SEQIDNO78(GenBank登录号AF017790)中所示的典型核苷酸序列)在癌症中特异性过表达，所述癌症的例子包括但不限于膀胱癌、乳腺癌、宫颈癌、胆管细胞癌、慢性髓样白血病(CML)、结直肠癌、食道癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、淋巴瘤、骨肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肾癌、小细胞肺癌(SCLC)和软组织肿瘤。如此，本专利技术聚焦于KNTC2作为癌症/肿瘤免疫疗法的候选靶物。为了那个目的，本专利技术至少部分涉及在衍生自KNTC2的肽中拥有诱导对KNTC2特异性的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的能力的特定表位肽的鉴定。本文中公开的结果证明了鉴定的肽是HLA-A2限制性表位肽，其可以诱导针对表达KNTC2的细胞的有力且特异性的免疫应答。因而，本专利技术的目的是提供KNTC2衍生的肽，其可以用于在体外、离体或在体内以HLA-A2限制性方式诱导CTL，或者直接对受试者施用以诱导针对癌症的体内免疫应答，所述癌症的例子包括但不限于膀胱癌、乳腺癌、宫颈癌、胆管细胞癌、慢性髓样白血病(CML)、结直肠癌、食道癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、淋巴瘤、骨肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、肾癌、小细胞肺癌(SCLC)和软组织肿瘤。本专利技术的肽的长度一般小于15、14本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种具有细胞毒性T淋巴细胞(CTL)诱导能力的分离的肽，其中所述肽包含下述的氨基酸序列(a)或(b)：(a)选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO:2、3、7、17、41、53和68；(b)选自下组的氨基酸序列中取代、缺失、插入和/或添加了1、2或数个氨基酸的氨基酸序列：SEQ ID NO:2、3、7、17、41、53和68。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.03.12 US 61/777,3341.一种具有细胞毒性T淋巴细胞(CTL)诱导能力的分离的肽，其中所述肽由SEQIDNO:7的氨基酸序列组成。2.一种分离的多核苷酸，其编码权利要求1的肽。3.一种组合物，其包含至少一种选自下组的活性成分：(a)权利要求1的肽；(b)编码权利要求1的肽的多核苷酸；(c)抗原呈递细胞(APC)，该抗原呈递细胞在其表面上呈递HLA抗原和权利要求1的肽的复合物；(d)外来体，该外来体在其表面上呈递HLA抗原和权利要求1的肽的复合物；和(e)CTL，该CTL靶向HLA抗原和权利要求1的肽的复合物。4.一种用于治疗表达KNTC2的癌症的药物组合物，其中所述组合物包含至少一种选自下组的活性成分：(a)权利要求1的肽；(b)编码权利要求1的肽的多核苷酸；(c)APC，该APC在其表面上呈递HLA抗原和权利要求1的肽的复合物；(d)外来体，该外来体在其表面上呈递HLA抗原和权利要求1的肽的复合物；和(e)CTL，其能识别呈递HLA抗原和权利要求1的肽的复合物的细胞。5.权利要求4的药物组合物，其中所述药物组合物配制用于对其HLA抗原为HLA-A2的受试者施用。6.一种用于诱导具有CTL诱导能力的APC的体外方法，其中该方法包括选自下组的步骤：(a)使APC与权利要求1的肽接触，和(b)将编码权利要求1的肽的多核苷酸导入APC。7.一种用于诱导CTL的体外方法，其中该方法包括选自下组的步骤：(a)将CD...
【专利技术属性】
技术研发人员：角田卓也，大泽龙司，吉村祥子，渡边朝久，
申请(专利权)人：肿瘤疗法科学股份有限公司，
类型：发明
国别省市：日本;JP
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