一种动物组织核酸提取液的制备方法技术

技术编号:12437893 阅读:108 留言:0更新日期:2015-12-04 01:21
一种动物组织核酸提取液的制备方法,该方法包括磁性微球的制备和表面活化以及最终提取液的配置。其中磁性微球先通过聚碳硅烷包覆纳米级磁性粉体,再通过热处理和磁选手段制得。根据本发明专利技术的制备方法所制得的提取液,能够对动物组织进行快速解离并高效分离提纯DNA,能够广泛应用到动物疫病检测领域。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及。
技术介绍
动物疾病对畜牧业以及人类的食品安全都有着重要的影响,采用分子生物学方法对动物组织进行病原菌诊断能够获得最准确的结果。关键步骤是要从动物组织样品中提取细菌或病毒的DNA。能获取不同种类的细菌DNA或不同种类病毒的DNA,以及基因组的完整性、纯度和浓度,是从动物组织中提取DNA用于动物病原菌诊断的首要目标。现有的DNA提取过程中常常有污染,并且步骤繁琐,提取过程时间较长。如高氯酸钠法、SDS法和尿素法等提取方法,但这些方法需要样本量较大,并且苯酚类等有机物容易在DNA溶液中残留,特别是在后续的PCR扩增过程中会干扰扩增过程,影响扩增结果,使得该方法的应用受到一定的限制。磁性微球在外加磁力的作用下,可快速分离纯化核酸DNA/RNA,因安全并易于实现自动化而迅速发展。磁性微球核酸提取方法是指以超顺磁性的磁性微球在高盐、低PH溶液中吸附核酸,而在低盐溶液中将核酸从磁性微球表面脱离的原理进行核酸提取的方法。现有的磁性微球通常是由四氧化三铁或三氧化二铁等磁芯与二氧化硅等材料复合而成的具有一定磁性的球形微粒。中国专利技术专利(CN1217352)公开了一种二氧化本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种动物组织核酸提取液的制备方法,包括以下步骤:(一)磁性微球的制备(1)将聚碳硅烷固体溶解到有机苯类溶剂中,形成乳液;将纳米级磁性粉体加入到含有表面活性剂的有机醇类溶剂中,搅拌均匀形成悬浮液;将悬浮液加入到乳液中,搅拌均匀,得到混合液;其中聚碳硅烷与磁性粉体的质量比为2‑5:1;(2)将混合液通过微孔膜滴入到含有交联剂的温水溶液中,水温保持在60‑80℃;使得混合液中聚碳硅烷交联固化在磁性粉体表面;利用减压蒸馏手段将水分和有机溶剂去除,得到聚碳硅烷包覆磁性粉体的固体微球;(3)将固体微球在500‑1000℃下、氮气或惰性气体保护下进行保温1‑2小时,聚碳硅烷裂解后形成表面多孔的固体微球;(4...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:赵林萍贾松涛董瑞静李梦雨张娟张丹鹤
申请(专利权)人:河南中标检测服务有限公司
类型:发明
国别省市:河南;41

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