本发明专利技术公开了一种天然林下外生菌根合成的专用菌源的使用方法，培养健康林业苗木，实施苗木菌根化技术以获得目标菌的成熟菌根。精挑细选健康菌根，剪切成适宜长度后，按比例与蛭石、泥碳土、无菌水的混合物混匀，制成接种菌源，使用于天然林下或扩繁菌根化苗木。本发明专利技术不仅可以通过人工繁殖获得大量在天然林下存活时间较长、接种成功率高的菌源，同时还弥补少数难于分离纯化的菌根菌的繁殖问题。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于真菌学领域，具体涉及。
技术介绍
据国内报道，外生菌根食用菌占已知食用菌种数的677个/966个，且多数因含人类必须活性物质而归属于人类健康食品，加上外生菌根菌对森林生态的巨大贡献，必将成为未来食用菌产业的发展方向。包括正红燕、松鸾、美味牛肝菌、松乳燕、鸡纵、红牛肝、黄牛肝、干巴菌，但不限止这些种类，相当多种类被公认是世界著名的健康+美味食品。使林业树木感染菌根菌并形成共生体的技术称为菌根化技术。菌根化技术无疑是发展菌根食用菌的必由之路。目前实现产业化的块菌菌根化技术就是一个经济效益突显的应用例子。到目前为止，能够稳定地进行规模化、商业化仿生栽培的菌根化模式仅块菌{Ttuber sp)模式，该模式通过苗期接种、菌根合成、园林化移植、规范化管理来获得可食用子实体，这些获得成功的菌根食用菌的共同特征是可以在森林郁闭度较低环境下获得子实体。而对于更大比例的中后期菌根菌，该模式无效。由于中后期外生菌根菌需要在郁闭度较高的成熟林分下才能采集到，不能采用块菌菌根化的办法，天然林下菌根化技术是中后期菌根食用菌开发的前提，技术应用前景广阔。世界各地，包括我国主要进行林业苗木菌根化，成林菌根化研究进展缓慢。究其原因包括:其一，林木幼苗期的细根幼嫩，易于菌根侵入(孟繁荣邵景文曲绍义，1995);其二，苗圃的土壤易于人工控制环境，直至使用消毒土壤以减少菌根接种过程的杂菌干扰；其三，苗木接种较易控制光温水湿等外部条件。相比较而言，天然林下接种非但无上述有利条件，还得忍受林下土壤中丰富的微生物种类，包括先期定殖的菌根菌，对菌根菌接种的种种不利影响。林下接种难是外生菌根菌和菌根食用菌发展的瓶颈。试图绕过这个瓶颈，采用美味牛肝菌共生苗木移入成林的办法也无法成功(Hall 1.R.Lyon A.J.E.Wang Y.，1998)0菌根化技术中通常使用的接种源有人工培养菌丝体和真菌孢子，人工培养菌丝体在微生物种类丰富的森林土壤中存活时间很短，难以接种成功；真菌孢子可以在森林土壤中获得较长的存活期和较高接种率，但由于收集难、成本高，且无法进行人工繁殖，从而影响规模化、商业化发展，目前主要用于天然林下菌根化试验。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供，不仅可以通过人工繁殖获得大量在天然林下存活时间较长、接种成功率高的菌源，同时还弥补少数难于分离纯化的菌根菌的繁殖问题。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案: :培养与目标菌根菌有共生关系的健康林业苗木，实施苗期菌根化技术以获得目标菌的成熟菌根；将精挑细选的健康菌根截成2±0.5mm长的片断，按150±50个片断/L的比例混入预先混匀经高温灭菌且温度为10°C _25°C的蛭石、泥碳土、无菌水的混合物中，直接用作菌源实施苗木或成林菌根化，或用作下一代菌根的接种源。所述的蛭石、泥碳土、无菌水的混合物中蛭石、泥碳土、无菌水的重量比为1:1:0.44。精挑细选的健康菌根是指，剪切直径2mm以下的细根，用无菌水仔细清洗浮泥；置显微镜下检测，去除所有病变变色和/或菌套生长较弱的菌根，置10°c环境下无菌保存；使用前，先将菌根剪切成2±0.5mm长的片断，再次抽样镜检，确保菌根片断无病率达显著水平。天然林下接种或苗圃接种方法:将接种物包被于寄主细根周边，每穴放150±30ml容积的接种物，以确保接种后每个寄主细根的周边平均8个，至少有I个菌源菌索与目标细根近距离接触，接种时及其后的2周时间，按菌根菌对环境的要求进行光、温、湿、气调节。本专利技术的显著优点在于:本专利技术不仅可以通过人工繁殖获得大量在天然林下存活时间较长、接种成功率高的菌源，同时还弥补少数难于分离纯化的菌根菌的繁殖问题。本专利技术提供的接种源在10°C温度+70%湿度的阴暗环境下，存活时间可达4周以上(供试的红菇属及牛肝菌属真菌在15-20°C条件下，离体4周后的培养成功率30%);在25°C环境下，存活时间I周以上，比以菌丝或孢子为菌源的接种明显提高接种的成功率。I)技术简单:苗木菌根化是一个很成熟的技术，故本专利技术获得接种源技术简单，易于操作；2)效果显著:关键是将容易获得的菌根截成小片断后，其在适宜建立侵染关系的温、湿条件下的森林根系及土壤中可以保持活力I周以上，确保菌根上的菌丝或菌索有足够的时间延伸并获得成功侵染；3)对于难于分离纯化的菌根菌，也可通过其孢子作为初始接种源获得大量繁殖，大幅度扩大接种源数量，在生产上有着极为重要的意义；4)繁殖系数高:幼苗接种成功后移植到天然苗圃繁殖长达2年，繁殖系数高达10000倍以上，方便大面积推广应用。【附图说明】图1是处理Ihr后菌根(正常)及菌丝体(正常)显微照片。图2是处理40hr后菌根(正常)及菌丝体(菌丝体内出现大量液泡)显微照片。图3是处理I周后菌根(菌根周边出现大量杂菌，但菌根依然有一定活力)及菌丝体(菌丝体溶解)显微照片。图4是处理4周后的菌根显微照片，仍有一些菌索伸出，显示一定活力。图5是长满大量白色菌索的丝栗栲苗木根部。【具体实施方式】本专利技术介绍的一种外生菌根真菌接种专用菌源的使用，包括在严格无菌条件下培养无菌林业苗木，在苗木长出细根至I周年之间的任意时期，控制温光水湿气条件下，采用人工分离菌丝体或菌根菌的孢子进行人工接种苗木细根，在适当前第1页1 2 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种天然林下外生菌根合成的专用菌源的使用方法，其特征在于：培养与目标菌根菌有共生关系的健康林业苗木，采用苗木菌根化技术，以获得目标菌的成熟菌根；将精挑细选的健康菌根截成2±0.5mm长的片断，按150±50个片断/L的比例混入预先混匀经高温灭菌且温度为10℃‑25℃的蛭石、泥碳土、无菌水的混合物中，直接用作菌源实施苗木或成林菌根化，或用作下一代菌根的接种源。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：陈宇航，陈鹏达，周仲驹，陈柳英，
申请(专利权)人：陈宇航，
类型：发明
国别省市：福建;35
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。