一株角担菌菌株，其命名为角担菌XCS-6，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.9817，保藏日期为2014年10月22日。该角担菌菌株可应用于制备缬草素，具体是利用液体培养基对角担菌菌株进行发酵培养，摇床振荡，常温下培养至少6天，得到含缬草素的发酵液。将本发明专利技术的角担菌XCS-6先应用于制备缬草素后，还可再利用缬草素制备镇静安眠类中成药。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种产缬草素的内生真菌及其应用，尤其涉及一种角担菌菌株及其应 用。
技术介绍
植物内生真菌作为一种新的微生物资源，受到了国内外学者的广泛关注，从植物 内生菌中发掘新的活性物质已成为研究的热点。研究表明：寄生于药用植物内的内生真 菌不但能促进宿主植物某些次生代谢产物的产生，而且自身也会产生相同或相似的代谢产 物。绝大部分代谢物质都具有明显的抗肿瘤、抗氧化、抑菌等作用，是良好的医药原料。 结I草（ValerianaofficinalisL.)为败酱科结|草属植物，是我国重要的传统药用 植物，以其根状茎及根入药，具有镇静催眠的功效。最新研究表明，缬草素是缬草镇静作用 的主要成分，但是缬草根中缬草素含量极低，野生缬草资源较少，同时缬草为多年生草本植 物，人工栽培生长缓慢，收获期长，无法满足市场需求。 利用内生真菌发酵，可以工业化生产某些生物活性成分，降低成本，满足市场需 求；同时可以避免药用植物被大量采伐引起的生态危机，有利于保护珍稀濒危药用植物资 源。对于本领域技术人员而言，尚未见到有利用内生真菌工业化生产缬草素的相关报道。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是，克服以上
技术介绍
中提到的不足和缺陷，提供一 株角担菌菌株，还相应提供前述角担菌菌株在制备缬草素中的应用以及前述角担菌菌株在 制备镇静安眠类中成药中的应用。 为解决上述技术问题，本专利技术提出的技术方案为一株角担菌菌株，所述角担菌 (Ceratobasidiumsp.AG-A)菌株命名为角担菌XCS-6,其于2014年10月22日保存在中国 微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，该保藏机构的简称为CGMCC，保藏机构的地址 为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中 心的保藏编号为CGMCCNo. 9817,保藏日期为2014年10月22日。 上述本专利技术的角担菌XCS-6属于一株能产缬草素的内生真菌，其是从缬草根上分 离、纯化获得，其在PDA平板上，菌落呈灰白色，菌丝呈辐射状生长；显微镜下观察，菌丝体 有隔，分生孢子梗和孢子无色，单胞，卵圆形，表面光滑，分生孢子梗自菌丝单个发生，呈树 枝状特征结构。 上述本专利技术的角担菌XCS-6,其ITS序列在NCBI数据库中用BLAST进行同源性分 析，得到相似性较高的序列，运用MEGA6. 06软件构建系统发育树；该角担菌XCS-6的ITS序 列与角担菌属（Ceratobasidiumsp.AG-A，编号：HQ270170. 1)的同源性达到100%，结合形 态学观察的结果，可以确定本专利技术的角担菌XCS-6为担子菌门伞菌纲鸡油菌目角担菌科角 担菌（Ceratobasidiumsp.AG-A) 〇 作为一个总的技术构思，本专利技术还提供一种上述角担菌菌株在制备缬草素中的应 用。 上述制备缬草素的应用中，优选的，具体包括以下步骤：利用液体培养基对所述角 担菌菌株进行发酵培养，摇床振荡，常温下培养至少一周，得到含缬草素的发酵液。 上述制备缴草素的应用中，优选的，所述摇床振荡的转速控制在120~180r/min， 培养温度具体控制在25°C~29°C，培养时间具体为6d~8d。 上述制备缬草素的应用中，优选的，所述液体培养基为PDA液体培养基，其包括以 下浓度的组分：去皮土豆200g/L，葡萄糖200g/L，pH值6. 5~7. 0,121°C下灭菌30min。 作为一个总的技术构思，本专利技术还提供一种上述角担菌菌株在制备镇静安眠类中 成药中的应用。优选的，先依据上述的应用方法制备缬草素，再利用缬草素制备镇静安眠类 中成药。 与现有技术相比，本专利技术的优点在于： 1.本专利技术中通过反复的研究和实验，最终成功分离、筛选出一株能够产缬草素的 内生真菌，其命名为角担菌XCS-6,通过利用PDA液体培养基进行发酵培养，其缬草素的产 量可达2.2mg/L左右，明显优于传统植物栽培的获取途径，对于工业化生产缬草素具有良 好的工业化应用前景； 2.本专利技术通过菌株生产获得的缬草素是缬草药材中的主要活性成分，具有良好的 镇静催眠效果，镇静作用温和，在医学上可应用于制备治疗失眠等症状的中成药。 -株能产缴草素的内生真菌，其命名为角担菌（Ceratobasidiumsp.AG-A)XCS_6， 已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏机构地址为：北京市朝阳 区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCCNo. 9817,保藏日期为2014年10月22日。【附图说明】 为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现 有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术 的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据 这些附图获得其他的附图。 图1为本专利技术【具体实施方式】中角担菌XCS-6的菌落形态图；其中，左图为菌株形态 正面图，右图为菌株形态背面图。 图2为本专利技术【具体实施方式】中角担菌XCS-6的显微结构图（放大40倍）。 图3为本专利技术【具体实施方式】中角担菌XCS-6的PCR扩增后的电泳图。 图4为本专利技术【具体实施方式】中角担菌XCS-6的ITS序列构建的系统发育树图。 图5为本专利技术【具体实施方式】中角担菌XCS-6的发酵液HPLC图。 图6为缬草素标准品的HPLC图。【具体实施方式】 为了便于理解本专利技术，下文将结合说明书附图和较佳的实施例对本专利技术作更全 面、细致地描述，但本专利技术的保护范围并不限于以下具体的实施例。 除非另有定义，下文中所使用的所有专业术语与本领域技术人员通常理解的含义 相同。本文中所使用的专业术语只是为了描述具体实施例的目的，并不是旨在限制本专利技术 的保护范围。 除非另有特别说明，本专利技术中用到的各种原材料、试剂、仪器和设备等均可通过市 场购买得到或者可通过现有方法制备得到。 实施例： 我们采用微生物学方法，从健康的缬草植株中分离出产缬草素的内生真菌，然后 利用PDA液体培养基进行发酵，采用HPLC法对发酵液中缬草素的含量进行测定，确定其为 一株产缬草素的内生真菌，再通过形态学观察和ITS序列分析对该株产缬草素的内生真菌 进行鉴定，确定其种属为角担菌XCS-6,整个分离、筛选、鉴定及制备缬草素的具体操作过程 如下所示。 1.产缬草素的内生真菌的分离、筛选 缬草外植体：缬草采自贵州省贵阳市山区，经中南林业科技大学蒋丽娟教授鉴定 为败酱科缬草属植物缬草。 外植体消毒：将新鲜的缬草根用自来水冲洗lOmin，用无菌水清洗3次。外植体的 消毒采用75%酒精浸泡60s、无菌水清洗50s，用质量浓度为0. 1 %升汞浸泡180s，无菌水清 洗50s备用。 外植体表面无菌检测：将消毒的外植体接入PDA固体培养基中，30°C培养48h，检 测外植体表面消毒是否彻底。 内生真菌的分离纯化：挑选出表面无任何菌落生长的外植体，接种到PDA固体培 养基中27°C培养；为了抑制细菌和放线菌生长，在倒平板前向培养基中加入lmg/L卡那霉 素和lmg/L青霉素；待外植体周围长当前第1页1 2 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一株角担菌菌株，其特征在于，所述角担菌(Ceratobasidium sp.AG‑A)菌株命名为角担菌XCS‑6，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.9817，保藏日期为2014年10月22日。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：黎继烈，胡铁，谭云，方勤敏，王卫，贾媛，李振梅，谷政伟，张梦君，
申请(专利权)人：中南林业科技大学，
类型：发明
国别省市：湖南;43
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