几种中药提取物在HIV潜伏再激活治疗中的应用制造技术

几种中药提取物在HIV潜伏再激活治疗中的应用，属于医药领域。包括以下步骤：中药植物材料粉碎的步骤；将中药植物粉料用提取剂过夜浸泡；提取剂为乙醇或乙醚和水的混合物；乙醇或乙醚和水所占体积比例为60％-100％乙醇或乙醚和40％-0％水；药物低速渗漉提取；将提取物浓缩，除去提取溶剂；中药植物材料为鸢尾科的射干、瑞香科的黄芫花、了哥王、芫花、铁海棠和大戟科的山乌桕、泽漆中的一种或几种；具有在制备抗HIV潜伏治疗药物上的应用的用途。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药领域，涉及几种中药活性成分的提取物及其制备方法，以及在制备抗HIV潜伏治疗药物上的应用。
技术介绍
艾滋病(acquiredimmunodeficiencysyndrome，AIDS)是由人免疫缺陷病毒(humanimmunodeficiencyvirus，HIV)引起的一种逐步摧毁人体免疫系统、严重威胁人类健康和生存的重大传染性疾病。自1981年在美国首次发现以来，在世界范围内迅速蔓延，2014年统计数据显示，全球现有HIV/AIDS病人共3690万人，2014年新发感染200万人，抗艾滋病相关治疗150万人，艾滋病相关死亡120万人，[http://www.unaids.org/en/resources/campaigns/HowAIDSchangedeverything/factsheet]。目前药物治疗可以控制病情发展，提高患者生存质量，但并不能从根本上治愈艾滋病。目前最常用的艾滋病治疗方法是高效抗逆转录病毒疗法(highlyactiveantiretroviraltherapy，HAART)，该法能有效地抑制病毒的复制，能将血浆病毒载量降至不可检测的水平，延缓发病进程，改善、提高患者的生活质量和存活时间。但在停止HAART治疗后，病毒会大量复制，病毒载量将会迅速反弹，无法彻底清除体内的HIV病毒。此现象主要是由于病毒潜伏于细胞的病毒库内所造成[JilekBL,ZarrM,SampahML,etal.AquantitativebasisforantiretroviraltherapyforHIV-1infection.NatureMed.2012.18(3):446-51.]。HIV-1感染机体后，宿主的免疫系统能够识别感染的细胞和病毒，将其大量杀死，但是有一部分病毒以原病毒的形式存在于静息记忆CD4+T等细胞中，这部分细胞不表达病毒蛋白，也不会被病毒所破坏，同时也不被宿主免疫系统识别，能够存活下来。在体内环境变化或外界刺激的条件下，潜伏的病毒又能够再次活化。潜伏的细胞库成为清除HIV-1的主要障碍[ChunTW,FauciAS.HIVreservoirs:pathogenesisandobstaclestoviraleradicationandcure.AIDS.2012,26(10):1261-8]。HIV-1潜伏感染存在着整合前和整合后两种形式的潜伏[HakreS,ChavezL,ShirakawaK,etal.HIVlatency:experimentalsystemsandmolecularmodels.FEMSMicrobiolRev.2012,36:706-716]。整合前潜伏源自病毒复制周期在原病毒整合到宿主基因组之前被部分或完全阻断，可能由于在代谢不活跃细胞中，dNTP不充足导致反转录不完全所致。这些未整合的病毒在胞质中存在数天，形成整合前复合体(preintegrationcomplex，PIC)，不过随着时间的进展最终衰变，它对病毒持续感染的作用是有限的。整合后潜伏则发生自原病毒虽成功整合到宿主基因组中，但不能活跃表达其基因组，使其以转录无能状态呈现。目前发现潜伏的分子机制与HIV-1原病毒整合的位点与方向、HIV-1LTR启动子处宿主细胞转录因子的种类与数量、HIV-1原病毒整合位置的染色质组成与LTR启动子的表观调控等方面有关[AbbasW,HerbeinG.MolecularunderstandingofHIV-1latency.AdvancesinVirology.2012,574967.]。整合后潜伏是形成潜伏病毒库的主要原因。潜伏的病毒库在体内外环境发生变化时，如停止HAART治疗或机体抵抗力低下时，体内的抗原、细胞因子、有丝分裂原或佛波酯等激活潜伏病毒，体内可再次检测到病毒。最近，一种称为“shockandkill”的旨在根除HIV感染的治疗理念受到国际间的广泛关注，成为了艾滋病治疗中的一个热点问题。这种方法通过“shock”治疗阶段药物激活潜伏的HIV前病毒。随后利用“kill”阶段药物清除激活的HIV，从而达到清除HIV的目的[DeeksSG.HIV:Shockandkill.Nature,2012,487(7408):439-440；ArchinNM1,LibertyAL,KashubaAD,etal.AdministrationofvorinostatdisruptsHIV-1latencyinpatientsonantiretroviraltherapy.Nature.2012,487(7408):482-485；Halper-StrombergA,LuCL,KleinF,etal.BroadlyneutralizingantibodiesandviralinducersdecreasereboundfromHIV-1latentreservoirsinhumanizedmice，Cell,2014,158(5):989-99]。近年的研究显示，组蛋白去乙酰化酶(histonedeacetylase，HDAC)抑制剂、BRD蛋白(Bromodomain，BRD)抑制剂、蛋白激酶C(proteinkinaseC，PKC)激活剂和正转录延伸因子b(positivetranscriptionelongationfactorb，P-TEFb)激活剂及细胞因子等均可激活潜伏病毒的复制，它们与HIV转录阶段不同步骤的细胞因子或调节基因相互作用，激活了HIV的转录过程。这些药物包括丙戊酸、伏立诺他(vorionstat)、JQ1、Prostratin、HMBA等[ArchinNM,EspesethA,ParkerD,etal.ExpressionoflatentHIVinducedbythepotentHDACinhibitorsuberoylanilidehydroxamicacid.AIDSResHumRetroviruses.2009,25(2):207-212.；WightmanF,EllenbergP,ChurchillM,etal.HDACinhibitorsinHIV.ImmunolCellBiol.2012.90(1):47-54.；吴润东,刘光明,庞伟.潜伏感染激活剂研究进展.中国药理学通报.2014,30(1):1-6.]。但这些试剂或药物多是临床上治疗其他疾病的药物，如丙戊酸用来治疗癫痫和癌症，JQ1是非激素类男性避孕药，这些药物作用特异性差，对机体有毒副作用，有些药物仍处于临床实验阶段，本文档来自技高网...

【技术保护点】
中药活性成分提取方法，包括以下步骤：(1)中药植物材料粉碎的步骤；(2)将中药植物粉料用提取剂过夜浸泡；提取剂为乙醇或乙醚和水的混合物；乙醇或乙醚和水所占体积比例为60％‑100％乙醇或乙醚和40％‑0％水；(3)将步骤(2)药物低速渗漉提取；(4)将提取物浓缩，包括提取后的溶液通过旋转蒸发或冷冻干燥除去提取溶剂；所述的中药植物材料为鸢尾科的射干、瑞香科的黄芫花、了哥王、芫花、铁海棠和大戟科的山乌桕、泽漆中的一种或几种；上述中药植物材料选自植物的根、茎、叶和/或枝或全部。

【技术特征摘要】
1.中药活性成分提取方法，包括以下步骤：(1)中药植物材料粉碎的步骤；(2)将中药植
物粉料用提取剂过夜浸泡；提取剂为乙醇或乙醚和水的混合物；乙醇或乙醚和水所占体积
比例为60％-100％乙醇或乙醚和40％-0％水；(3)将步骤(2)药物低速渗漉提取；(4)
将提取物浓缩，包括提取后的溶液通过旋转蒸发或冷冻干燥除去提取溶剂；
所述的中药植物材料为鸢尾科的射干、瑞香科的黄芫花、了哥王、芫花、铁海棠和大戟科
的山乌桕、泽漆中的一种或几种；上述中药植物材料选自植物的根、茎、叶和/或枝或全
部。
2.按照权利要求1的提取方法制备得到的中药活性成分的用途：(a)用于制备干预HIV病毒
潜伏的药物；(b)用于制备与抗HIV病毒药物联合使用治疗艾滋病的药物；(c)用于制备治
疗艾滋病的药物。
3.按照权利要求2的用途，其特征在于，所述的干预HIV病毒潜伏包括：诱导HIV病毒潜
伏感染细胞中HIV前病毒表达、和/或激活潜伏的HIV病毒。
4.一种包含权利要求1的方法提取的中药活性成分的药物组合物。
5.按照权利要求4的药物组合物，其特征在于，包括权利要求1的方法提取的中药活性成
分中的...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾毅，王小利，杨怡姝，李莉莉，康学军，贾俐莉，李泽琳，
申请(专利权)人：北京工业大学，
类型：发明
国别省市：北京;11