人体脐带血干细胞提取物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种人体脐带血干细胞提取物，按照下述步骤制取：取人体脐带血，加入细胞培养基，放入培养箱中，恒温恒湿持续传代培养；弃去培养基，分离得到人体脐带血干细胞原溶液；采用冻融法使细胞破碎至人体脐带血干细胞完全破碎，过滤，得到人体脐带血干细胞提取物原溶液。本发明专利技术提供的人体脐带血干细胞提取物含有多种生命活性物质，可活化皮肤细胞，激活人体自身的“自愈功能”，减少消除皱纹，延缓细胞衰老，淡化色斑暗疮，美白肌肤；各成分分子量小，仅为300道尔顿，能直接自主迅速渗透到皮肤深层，易被细胞吸收；提取人体同源细胞，对任何皮肤都无副作用，安全性高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种干细胞提取物，尤其涉及一种人体厮带血干细胞提取物及其制备 方法和应用，还涉及一种活性成分包含人体厮带血干细胞提取物的抗皱巧斑美白护肤品。
技术介绍
护肤在现代已经成为一口学问，人们受皮肤问题困扰不再盲目地去商店买各种化 妆品来试，而是由皮肤科医生开出处方，提供针对性的护肤建议。随着人们对健康的追求日 益高涨和皮肤医学的高速发展，带有更高安全性和有效性的医学护肤品已经成为不可阻挡 的一股潮流。伴随更多的女性开始注重护肤品的质量和安全性，需要专业人员对皮肤及其 附属器的结构和生理作用研究和认识更深入，对化妆品的研究更专业化，性能更具有针对 性、可靠性和竞争力。 干细胞研究是当前生命科学研究中的一个热点，干细胞的应用为人类提供了一个 全新的未来，为人类疾病的治疗打开了一个新的世界，使得人类不仅可W更好地研究自身 发育进化的过程，也可W利用干细胞为人类疾病的研究及药物安全性评价提供新的方向。 人们已经不仅仅是利用传统意义上的造血干细胞用于移植治疗，而是将会产生多种形式的 干细胞治疗广品，包括W干细胞为最终治疗用广品，W干细胞与生物材料结合的治疗广品， 或W干细胞分化为某一细胞类型的治疗产品等，如神经干细胞用于治疗神经萎缩性疾病， 骨髓间充质干细胞用于治疗必肌损伤等。干细胞的产业化已经不再是一个理想，而是在不 久的将来一定会拥有重大社会效益和经济效益的全球性产业，同时也预示着生物技术产业 的一个商机。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种人体厮带血干细胞提取 物，将其应用于护肤品中，能有效修复皮肤，刺激细胞修复能力，帮助肌肤恢复天然修复功 能；精准对抗多种岁月痕迹，显著延缓皮肤衰老速度；再现肌肤青春美态。 本法的第一个方面是提供一种人体厮带血干细胞提取物，按照下述步骤制取： 步骤1，取人体厮带血，加入细胞培养基，放入培养箱中，恒温恒湿持续传代培养； 步骤2,弃去培养基，分离得到人体厮带血干细胞原溶液； 步骤3,采用冻融法使细胞破碎至人体厮带血干细胞完全破碎，过滤，得到人体厮 带血干细胞提取物原溶液。 优选地，还包括步骤4 ;将步骤3得到的人体厮带血干细胞提取物原溶液分装冻 干，得到人体厮带血干细胞提取物冻干粉。 优选地，步骤3中冻融具体为；将人体厮带血干细胞原溶液冻结，然后在不高于 8°C的温度下解冻，如此冻融，反复操作至细胞完全破碎。 优选地，步骤1中所述细胞培养基为含有胎牛血清的DMEM/F12培养基。 其中，步骤1中培养温度为36-38°C，湿度为90-98%。 优选地，步骤1中培养温度为37°C，湿度为95%。 优选地，步骤3中过滤采用孔径为0. 22ym的过滤膜。 本专利技术的第二个方面是提供一种人体厮带血干细胞提取物的制备方法，包括W下 步骤： 1)取人体厮带血，加入细胞培养基，放入培养箱中，恒温恒湿持续传代培养； 2)弃去培养基，分离得到人体厮带血干细胞原溶液； 3)采用冻融法使细胞破碎至人体厮带血干细胞完全破碎，过滤，得到人体厮带血 干细胞提取物原溶液。 优选地，还包括4);将3)得到的人体厮带血干细胞提取物原溶液分装冻干，得到 人体厮带血干细胞提取物冻干粉。 优选地，3)中冻融具体为；将人体厮带血干细胞原溶液冻结，然后在不高于8°C的 温度下解冻，如此冻融，反复操作至人体厮带血干细胞完全破碎。 优选地，1)中所述细胞培养基为含有胎牛血清的DMEM/F12培养基。 优选地，3)中过滤采用孔径为0. 22ym的过滤膜。 其中，1)中培养温度为36-38°C，湿度为90-98%。 优选地，1)中培养温度为37。湿度为95%。 本专利技术的第H个方面是提供本专利技术第一个方面所述的人体厮带血干细胞提取物 在化妆品中的应用。 优选地，所述人体厮带血干细胞提取物为冻干粉。 本专利技术的第四个方面是提供一种抗皱巧斑美白护肤品，所述抗皱巧斑美白护肤品 的活性成分包括且优选组成为本专利技术第一个方面所述的人体厮带血干细胞提取物。 优选地，所述人体厮带血干细胞提取物为冻干粉。 优选地，所述抗皱巧斑美白护肤品还包括溶媒，所述溶媒与所述人体厮带血干细 胞提取物分开存储。 其中，所述溶媒可W为水。 本专利技术相对于现有技术具有如下有益效果： (1)本专利技术提供的人体厮带血干细胞提取物含有多种生命活性物质，可活化皮肤 细胞，激活人体自身的"自愈功能"，对衰老的细胞进行补充与调控，激活细胞功能，增加细 胞数量，提高细胞活性，改善细胞质量，提高细胞膜物质运输功能和物质交换能力，防止和 延缓细胞病变，恢复细胞的正常生理功能，促进真皮层细胞分泌合成胶原纤维、多糖、糖蛋 白等功能分子，增强细胞新陈代谢，肌纤维排列整齐紧密，从而减少消除皱纹，延缓细胞衰 老，淡化色斑暗疮，美白肌肤。 (2)本专利技术提供的人体厮带血干细胞提取物的各成分分子量小，仅为300道尔顿， 能直接自主迅速渗透到皮肤深层，易被细胞吸收（正常情况下，人体皮肤细胞只能吸收分 子量小于等于8000道尔顿的物质，而目前市场上销售的护肤品中所含天成分如透明质酸， SOD等，其分子量都在几万至几十万W上，因而无法被皮肤吸收）。 (3)本专利技术提供的人体厮带血干细胞提取物提取人体同源细胞，对任何皮肤都无 副作用，安全性高。【具体实施方式】 下面结合具体的实施方式对本专利技术作进一步的说明，W更好地理解本专利技术。一、人 体厮带血干细胞提取物冻干粉的制备[003引 （1)从医院妇产科获得人体厮带血，加入含有10% (V/V)胎牛血清的DMEM/F12培 养基（pH7. 0)，放入培养箱中，恒温恒湿持续传代培养，培养温度为37°C，湿度为95%。 (2)弃去培养基，分离得到人体厮带血干细胞原溶液。 (3)将人体厮带血干细胞原溶液冻结，然后在不高于8°C的温度下解冻，如此冻 融，反复操作至细胞完全破碎，采用孔径为0. 22ym的过滤膜过滤，除去杂质，得到得到人 体厮带血干细胞提取物原溶液。 (4)将人体厮带血干细胞提取物原溶液，按1ml/支分装冻干（冻干温度 为-20~-35°C，真空度为50~200Pa，冻干时间为24~36小时），即制得人体厮带血干细 胞提取物冻干粉。 二、蛋白质电泳分析人体厮带血干细胞提取物冻干粉 配制12%Tricine-SDS-PAGE聚丙帰醜胺凝胶。然后取按标示量配制好的人体厮 带血干细胞提取物冻干粉水溶液20y1加入2X上样缓冲液，8(TC加热40min。加入处理好 的样品，每孔20y1，8mA电流稳流进行电泳约化，结果显示，人体厮带血干细胞提取物冻干 粉的分子量《 8000道尔顿。 H、体外抗衰老实验取人皮肤成纤维母细胞（皿F细胞），用含10 % (V/V)FBS的DMEM/F12培养基配制 皿F细胞悬液，得到4X104cell/ml细胞悬液，分别注入3块96孔培养板内，每孔100yL， 每处理组别设复孔4孔，置于含5 % (V/V)C02、37°C的恒温培养箱内培养2地。当前第1页1 2 本文档来自技高网...

【技术保护点】
人体脐带血干细胞提取物，按照下述步骤制取：步骤1，取人体脐带血，加入细胞培养基，放入培养箱中，恒温恒湿持续传代培养；步骤2，弃去培养基，分离得到人体脐带血干细胞原溶液；步骤3，采用冻融法使细胞破碎至人体脐带血干细胞完全破碎，过滤，得到人体脐带血干细胞提取物原溶液。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：宋阳，
申请(专利权)人：宋阳，
类型：发明
国别省市：河南;41