一种小分子多肽ZY4及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种小分子多肽ZY4在制备治疗痤疮、抗感染、抗肿瘤药物及化妆品中的应用。它包含17个氨基酸残基，分子量为2374.0 Da，等电点为10.74，其氨基酸序列如SEQ ID:1所示。本发明专利技术中的多肽ZY4为人工合成，具有分子量小、人工合成方便的优点，本发明专利技术的多肽ZY4通过实验证明抑菌效果明显，对痤疮具有显著的治疗效果；该多肽还能抑制肿瘤细胞的生长，对肿瘤细胞具有杀伤作用；小分子多肽ZY4能够在制备抗感染、抗肿瘤和治疗痤疮药物及化妆品中应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医学
，具体涉及小分子多肽ZY4在制备治疗痤疮、抗感 染抗肿瘤药物及化妆品中的应用。
技术介绍
痤疮是一种毛囊性皮脂腺的慢性炎症，是青少年时期常见的炎性皮肤病，好发生 于面颊、额部、颊部和鼻唇沟，其次是胸部、背部和肩部，其发病主要与性激素水平、皮脂腺 大量分泌、痤疮丙酸杆菌增殖、毛囊皮脂腺导管的角化异常及炎症等因素相关。青春期的皮 肤表面脂质成分有所改变，雄性激素增多，造成皮脂毛囊导管角化过度，毛囊壁上脱落的上 皮细胞与皮脂混合，栓塞在毛囊口内，形成粉刺，再受丙酸菌等作用，加上细菌感染，引起炎 症，产生脓疮，患后异常痛苦。 肿瘤是机体在各种致癌因素作用下，局部组织的某一个细胞在基因水平上失去对 其生长的正常调控，导致其克隆性异常增生而形成的新生物。根据肿瘤对人体危害的大小 及其生长特性而分为良性肿瘤和恶性肿瘤两类。恶性肿瘤生长迅速，生长时常向周围组织 浸润，表面几无包膜，常有全身转移。目前，恶性肿瘤的发病率有逐年升高的趋势，在各种疾 病的死亡原因中也占前几位，因而是重点防治的一种疾病。 抗菌肽是生物体内经诱导产生的一种具有生物活性的小分子多肽，分子量在 1000~7000左右，由10~60个氨基酸残基组成。抗菌肽是当生物受到微生物侵入后机 体迅速产生的高效、光谱的抗菌肽类分子，来参与机体的免疫反应。抗菌肽作为机体有效 的防御分子是广泛存在的，目前已从微生物、植物、昆虫、节肢动物、两栖动物、哺乳动物甚 至人体内鉴定出上千种抗菌肽。抗菌肽抗菌机理复杂，但大多数理论都认为其机制涉及到 抗菌肽的阳离子性和疏水性与带负电荷的微生物胞膜的作用，抗菌肽和细菌的细胞膜接触 后，引起膜通透性改变，或在细菌细胞膜上形成跨膜的孔洞，最后导致细菌内容物外泄而 死亡。因此，抗菌肽在杀灭细菌的速度上要远远高于传统的抗生素，且不像抗生素在低浓 度下抑制细菌的生长，抗菌肽对细菌的作用几乎都是致死性的。研宄表明：抗菌肽与传统 抗生素相比，不易诱导耐药菌株的产生；抗菌谱光，对细菌、真菌、病毒、原虫及癌细胞均有 作用。已经在家禽体内发现了 3个家族的抗菌肽，包括cathelicidin，liver-expressed antimicrobial peptide (LEAP)，and β-defensin。这些抗菌肽对于家禽抵抗细菌性、病 毒性疾病具有至关重要的作用，相关这些基因的突变或者缺失对于家禽抗微生物感染的 能力将有显著的影响；这些抗菌肽除了具有光谱抗菌活性，同时还有高效的抗真菌、抗病 毒、抗原虫和（或）抗肿瘤活性，如Bat5和Mc7能杀灭钩端螺旋体，对白色念珠菌、隐球 菌和胞膜病毒和寄生虫都有较好的杀灭作用；一些抗菌肽对疱瘆病毒、流感病毒、艾滋病 病毒有囊膜病毒有明显的杀伤力；此外，有些抗菌肽同时还具有多种其他的调控功能，如 Cathelicidin还具有促进伤口愈合、组织损伤修复、化学趋化作用、促血管生成和抗寄生虫 等功能，在调节动物机体免疫上有着重要生物学活性。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的缺点，提供一种小分子多肽ZY4 ; 本专利技术的另一个目的在于提供一种小分子多肽ZY4在制备治疗痤疮、抗感染、抗 肿瘤药物及化妆品中的应用。 本专利技术的目的通过以下技术方案来实现：小分子多肽ZY4,它包含17个氨基酸残 基，分子量为2374. ODa，等电点为10. 74,其氨基酸序列如SEQ ID: 1所示，为缬氨酸-半胱氨 酸-赖氨酸-精氨酸-色氨酸-赖氨酸-赖氨酸-色氨酸-赖氨酸-精氨酸-赖氨酸-色 氨酸-赖氨酸-赖氨酸-色氨酸-半胱氨酸-缴氨酰胺（ValCysLysArgTrpLysLysTrpLys ArgLysTrpLysLysTrpCysVal-NH2)，所述基因序列中两个半胱氨酸形成一个分子内二硫键， C-末端的Val酰胺化。 本专利技术的小分子多肽ZY4在制备治疗痤疮、抗感染、抗肿瘤药物及化妆品中的应 用。 本专利技术的有益效果是：本专利技术中的多肽ZY4为人工合成，具有分子量小、人工合成 方便的优点，本专利技术的多肽ZY4通过实验证明抑菌效果明显，对痤疮具有显著的治疗效果； 该多肽还能抑制肿瘤细胞的生长，对肿瘤细胞具有杀伤作用；小分子多肽ZY4能够在制备 抗感染、抗肿瘤和治疗痤疮药物及化妆品中应用。【附图说明】 图1为小分子多肽ZY4对小鼠耳痤疮模型的治疗作用示意图。 图2为小分子多肽ZY4对小鼠耳痤疮模型炎症的治疗作用示意图。 图3为小分子多肽ZY4抗肺癌细胞A549活性的示意图。 图4为小分子多肽ZY4抗乳腺癌细胞MDA-435活性的示意图。 图5为小分子多肽ZY4抗黑色素瘤细胞A357活性的示意图。 图6为小分子多肽ZY4抗肝癌细胞HepG2活性的示意图。 图7为小分子多肽ZY4抗胃癌细胞SGC7901活性的示意图。【具体实施方式】 下面结合附图和实施例对本专利技术做进一步的描述，本专利技术的保护范围不局限于以 下所述： 实施例1 :小分子多肽ZY4的制备 1.称取树脂0.2g放置于干燥洁净的反应管中，加入适量的N，N-二甲基酰胺 (DMF)，活化30min。称取第一氨基酸残基lmmol，4-二甲氨基吡啶（DMAP) 150mg加入到反应 管中，DMF做为溶剂反应3h，反应完毕后用DMF洗3-6次，加入适当的吡啶和乙酸酐，体积比 为1: 1，反应30min，反应完毕后DMF洗3-6次。然后用哌啶洗脱氨基酸的保护基团Fmoc，洗 脱两次，每次15min，再用DMF洗4次，甲醇洗2次； 2.称第二个氨基酸3mmol，HBTU 3_〇1于反应管中，加入DIEA 0· 5ml，反应40min， 用DMF洗3-6次，加入哌啶溶液两次洗脱氨基酸的保护基团Fmoc，每次lOmin，再用DMF洗 4次，甲醇洗2次； 3.重复第二个步骤直到最后一个氨基酸残基； 4.最后一个氨基酸反应完毕后，用三氟乙酸切割2h，反应抽滤，得到多肽的三氟 乙酸溶液，用乙醚沉淀，离心，再用乙醚洗3-5遍，得到白色固体，经过HPLC脱盐冻干得到多 肽样本。 实施例2 :小分子多肽ZY4抗菌实验 1.分别制备大肠杆菌、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、溶血性葡萄 球菌、表皮葡萄球菌、科氏葡萄球菌菌液，37°C恒温培养18h，备用； 2.配制浓度为0· 8~20 μ g/ml小分子多肽ZY4溶液，将直径为5~7mm的圆形定 性滤片消毒烘干后浸入上述不同浓度的小分子多肽ZY4溶液中； 3.制备高柱肉汤琼脂培养基，灭菌，备用； 4.溶化高柱肉汤琼脂培养基，冷却至50°C，分别加入大肠杆菌、白色念珠菌、金黄 色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、溶血性葡萄球菌、表皮葡萄球菌、科氏葡萄球菌菌液lml，轻摇 均匀，倒入无菌平皿，轻晃使培养基均匀平铺在平皿上； 5.用消毒过的镊子将滤片整齐、有序的放入冷却的平皿内，盖上陶瓦盖，并做标 记，置于37°C恒温培养箱内培养24h ; 6.用卡尺测量抑菌圈大小，并比较不同浓度小分子多肽ZY4对不同细菌的作用强 度，结果如表1、表2。 表 1 : 如表1所不：小分子多肽ZY4对大肠杆菌、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽 孢杆菌的最低抑菌浓度分别为 12. 15 μ g/ml、2. 12 μ g/ml本文档来自技高网...

【技术保护点】
小分子多肽ZY4，其特征在于，它包含17个氨基酸残基，分子量为2374.0 Da，等电点为10.74，其氨基酸序列如SEQ ID:1所示，为缬氨酸‑半胱氨酸‑赖氨酸‑精氨酸‑色氨酸‑赖氨酸‑赖氨酸‑色氨酸‑赖氨酸‑精氨酸‑赖氨酸‑色氨酸‑赖氨酸‑赖氨酸‑色氨酸‑半胱氨酸‑缬氨酰胺，所述基因序列中两个半胱氨酸形成一个分子内二硫键。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：赖仞，容明强，杜彦军，
申请(专利权)人：四川合泰新光生物科技有限公司，中国科学院昆明动物研究所，
类型：发明
国别省市：四川;51