本发明专利技术涉及白桦脂酸及其药学上可接受的盐在制备抗真菌生物被膜药物中的应用。本发明专利技术提供了一种有效的抗白念珠菌生物被膜的方法，本发明专利技术所用化合物白桦脂酸在较低的浓度下具有抑制白念珠菌生物被膜生长，或抑制已成熟的生物被膜的作用，其最低有效浓度仅为2.0μmol/L。本发明专利技术不仅为白桦脂酸提供了一种新的用途，也为临床上抑制真菌生物被膜的形成或破坏成熟的真菌生物被膜提供了有效的药物。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药化学
，具体地说，是白桦脂酸在制备抗真菌生物被膜药 物中的应用。
技术介绍
生物被膜是一个微生物聚集群体，是微生物不可逆的与无活力生物或活组织表面 接触，由自身产生的细胞外基质包裹着活细菌细胞形成的微生态结构。生物被膜可形成于 自然环境中，也可形成于人类宿主体内，它具有保护微生物细胞，抵抗各种理化刺激，调节 基因表达等作用。在日常生活和工业生产中，细菌生物被膜普遍存在，绝大多数细菌为了 生产，聚集形成生物被膜，从而可以生长在各种物体表面的保护膜中。早在1991年有研宄 表明，细菌生物被膜具有三维结构，细菌含量不到1/3,而绝大部分是细菌分泌的粘性物质。 生长在细菌生物被膜上的细菌在其生物学特性上，与浮游菌有明显的不同。浮游菌易获得 营养和氧气，也易于排出代谢物，故繁殖快；而被膜细菌由于胞外多糖基质的屏障难以获得 营养供给而代谢缓慢。微生物产生生物被膜是一种重要的耐药机制，在植入性器材，比如各 种人工假体、血管内插管等常常发生真菌生物被膜感染，微生物形成生物被膜之后，耐药性 可发生极为显著的变化，据文献报道，白色念珠菌形成生物被膜之后，对唑类抗真菌药物的 MIC大大增加，是游离细胞的128倍以上。如何防治和克服生物被膜耐药问题，已成为临床 医学亟需客服的难题。 白桦脂酸（Betulinicacid，BA)是一种五环三猫类化合物，在自然界中广泛存在， 在白桦树皮中含量尤为丰富，1995年Pisha发现体内外实验中白桦脂酸都能诱导黑色素瘤 细胞的凋亡。此外，研宄表明该类化合物具有显著的抗肿瘤和抗HIV活性。白桦脂酸结构 如下所示。 中国期刊《华中科技大学学报（医学版）》，2010年10月第39卷第5期刊登的论 文《白桦脂酸抑制鼻咽癌细胞CNE-1生长及其机制探讨》，公开了白桦脂酸对鼻咽癌细胞的 抑制作用，MTT结果显示：小剂量的白桦脂酸即对鼻咽癌CNE-1细胞有抑制生长作用。中国 期刊《中国药学杂志》，2012年5月第47卷第9期刊登的论文《白桦脂酸抑制食管鳞状细胞 癌增殖及相关机制的实验研宄》，研宄抗肿瘤药物白桦脂酸对人食管鳞癌细胞的抑制作用 及抗肿瘤作用机制，结果显示：白桦脂酸能抑制人食管鳞癌KYSE170细胞的生长，这一作用 可能是通过诱导细胞凋亡、阻滞细胞停留在S期来实现的。中国期刊《吉林大学学报》，2009 年5月第40卷第3期刊登的论文《白桦脂酸体外抗肿瘤的活性和机制》，公开了白桦脂酸对 肿瘤细胞（人宫颈癌细胞HeLa，人乳腺癌细胞MCF-7,ZR)的生长具有抑制作用，细胞生长 抑制率随剂量的增加而增加。黑龙江中医药大学2012年6月博士学位论文《白桦脂酸诱导 人宫颈癌HeLa细胞凋亡及机制的研宄》公开了白桦脂酸有明显的抑制宫颈癌HeLa细胞生 长的作用，并诱导HeLa细胞凋亡，其作用机制可能与诱导caspase-3、CytoC蛋白的过度表 达，开放线粒体凋亡通路有关。 但是，关于白桦脂酸的抗真菌生物被膜作用，目前还未见报道。
技术实现思路
本专利技术的主要目的是提供白桦脂酸的新的药理用途。 本专利技术的再一的目的是，提供一种抗真菌生物被膜的药物组合物。 为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案是： 白桦脂酸及其药学上可接受的盐在制备抗真菌生物被膜药物中的应用。 所述的盐为盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、醋酸盐等；所述的真菌为白念珠菌。 所述的白桦脂酸结构如下所示： 白桦脂酸在制备抑制白念珠菌生物被膜形成的药物中的应用。白桦脂酸在制备消除白念珠菌生物被膜的药物中的应用。 所述的药物为膏药、乳剂、喷雾剂或膜剂。 为实现上述第二个目的，本专利技术采取的技术方案是： 一种抗真菌被膜的药物组合物，包括有效量的白桦脂酸和药学上可接受的辅料或 载体。 所述的真菌为白念珠菌。 所述的药物为膏药、乳剂、喷雾剂或膜剂。所述的药物用于抑制真菌生物被膜的生 长增殖，或用于抑制已形成的真菌生物被膜。 本专利技术优点在于： 本专利技术提供了一种有效的抗白念珠菌生物被膜的方法，本专利技术所用化合物白桦脂 酸在较低的浓度下具有抑制白念珠菌生物被膜生长，或抑制已成熟的生物被膜的作用，其 最低有效浓度仅为2.0ymol/ml。本专利技术不仅为白桦脂酸提供了一种新的用途，也为临床上 抑制真菌生物被膜的形成或破坏成熟的真菌生物被膜提供了有效的药物。【具体实施方式】 下面结合【具体实施方式】对本专利技术作详细说明，但是应理解所述实施例仅是范例， 不对本专利技术构成任何限制。应该理解的是，在不偏离本专利技术的精神和范围下可以对本专利技术 技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改或替换均落入本专利技术的保护范围。 实施例1白桦脂酸对白念珠菌生物被膜的作用 1、药物 白桦脂酸：购自上海一研生物科技有限公司；氟康唑：购自Sigma公司；两性霉素 B:购自Sigma公司；XTT购自Sigma公司；二甲亚砜（DMSO)购自Sigma公司；PBS溶液购自 Sigma公司 白桦脂酸用DMSO溶解，使用前经0. 22ym的过滤器过滤除菌，-20°C避光保存； 两性霉素B与氟康唑分别溶解于DMSO溶液中。XTT用灭菌的PBS缓冲溶液配成.5mg/ml 的饱和溶液，经0. 22ym的过滤器过滤除菌；menadione用100%丙酮配成10M溶液，XTT、 menadione于-80°C保存。实验前先将药液取出并于保温箱中梯度融化。 2、实验用菌株 白念珠菌SC5315,购自ATCC。实验菌株于沙堡葡萄糖琼脂培养基（SDA)划板活化， 于30°C培养48h后，挑取单克隆再次划板活化，取第二次所得单克隆置于SDA平板，用上述 方法培养后于4°C保存备用。 3、培养液的配置RPMI1640 液体培养液：RPMI1640(GibcoBRL) 10g、NaHC032. 0g、吗啡丙磺酸 (MOPS，Sigma) 34. 5g，加三蒸水900ml溶解，NaOH调pH至7.0,三蒸水定容至1000ml， 0. 22ym微孔滤膜过滤除菌，分装后于4°C保存备用。 沙堡葡萄糖琼脂固体培养基（SDA):蛋白胨10g，葡萄糖40g，琼脂18g，加三蒸水 900ml溶解，加入2mg/ml氯霉素水溶液50ml，调整pH至7. 0,以三蒸水定容至1000ml，高压 灭菌（121°C，15min)后子4°C保存备用。当前第1页1 2 本文档来自技高网...
【技术保护点】
白桦脂酸及其药学上可接受的盐在制备抗真菌生物被膜药物中的应用。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：曹晓宏，
申请(专利权)人：曹晓宏，
类型：发明
国别省市：江西;36
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