硫氧还蛋白-1的应用制造技术

本发明专利技术公开了硫氧还蛋白-1的新用途，即在制备抵抗吗啡成瘾药物中的应用，实验结果显示硫氧还蛋白-1高表达具有抵抗吗啡成瘾作用，同时也为毒品成瘾的治疗提供新的治疗靶点，为药物成瘾的预防和治疗提供新的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药
，确切地说是硫氧还蛋白作为潜在的新的药物能够起到抵抗吗啡成瘾的作用。
技术介绍
毒品成瘾一直是一个世界性的难题，至今仍未从根本上找到毒品成瘾的有效治疗途径，因此，毒品使用仍然是一个世界性的问题。成瘾行为是一种对能导致成瘾药物的依赖，其核心行为特征是强迫性用药和强迫性觅药行为，这与成瘾药物使用后所产生的欣快感有关。而吗啡(morphine, Mor)是临床上经常使用的镇药物，属于阿片类受体激动剂，长期服用无论从身体还是心理上都会产生严重的依赖性。阿片类毒品的作用是由于药物阻断了多巴胺被重新摄取回细胞的通路，从而产生相对多的多巴胺，使人产生兴奋感。而苯丙胺类毒品例如甲基苯丙胺，它可以促进多巴胺神经元末端DA的释放，引起滥用者对苯丙胺类兴奋剂产生精神依赖目前，与吗啡药物成瘾的分子机理截然不同。吗啡戒毒药物主要有包括:阿片受体激动剂，如美沙酮，订本诺菲等；非阿片受体激动剂，如可乐定；阿片受体拮抗剂，如纳洛酮等。但这些药物作用成本高、副作用大，并且作用效果反复，不能够从根本上解决吗啡成瘾问题。所以寻找新的吗啡成瘾的戒断药物具有极其重要的意义。硫氧还蛋白-1 (th1redoxin-1, Trx-1)是一种普遍存在于原核生物和真核生物中的小分子蛋白质，它与硫氧还蛋白还原酶、NADPH组成了细胞内主要的氧化还原系统，其活性位点序列为-Cys-Gly-Pro-Cys-，硫氧还蛋白通过活性位点的两个Cys之间的二硫键和巯基的相互转变来实现其氧化还原功能。根据表达部位的不同，硫氧还蛋白分为3类:硫氧还蛋白-1，硫氧还蛋白-2，硫氧还蛋白-3。硫氧还蛋白-1是细胞内一种有效的抗氧化剂，能保护细胞、减轻氧化应激所致的损伤。维持机体内氧化还原平衡的重要的标志性蛋白(Matsuo Y, Yodoi J.Extracellular th1redoxin: A therapeutic tool to combatinflammat1n .Cytokine Growth Factor Rev, 2013, 24(4):345-353)。硫氧还蛋白-1是生物体所必须的基因，如果选择性地敲除小鼠的硫氧还蛋白-1基因，小鼠则早期胚胎致死，不能存活(Matsui M., Oshima M., Oshima H., Takaku K., Maruyama T., YodoiJ., and Taketo Μ.M.Early embryonic lethality caused by targeted disrupt1nof the mouse th1redoxin gene.Dev.B1l.1996, 178: 179-185)。硫氧还蛋白-1 转基因小鼠表现出对氧化应激耐受增加，与野生型动物相比，寿命延长(Mitsui A, HamuroJ, Nakamura H, et al.0verexpress1n of human th1redoxin in transgenic micecontrols oxidative stress and life span.Ant1xidants and Redox Signalling,2002, 4(4): 693-696 ； Perez VI, Cortez LA, Lew CM, et al.Th1redoxin Ioverexpress1n extends mainly the earlier part of life span in mice .Journals of Gerontology Series A B1logical Sciences and Medical Sciences，2011，66(12): 1286-1299)，而硫氧还蛋白-1是否可以作为吗啡成瘾的戒断方法尚未见报导。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供硫氧还蛋白-1在制备抵抗吗啡成瘾中的新用途，即为吗啡成瘾的预防和治疗发现潜在的靶点，并以此为基点应用于吗啡成瘾治疗。本专利技术所使用的硫氧还蛋白-1高表达转基因小鼠在抵抗吗啡成瘾中也是第一次应用。本专利技术所述应用硫氧还蛋白-1高表达小鼠对吗啡所致的条件性位置偏好有抵抗作用，因此，硫氧还蛋白-1高表达具有抵抗吗啡成瘾作用，同时也为毒品成瘾的治疗提供新的治疗靶点。本专利技术同时也发现硫氧还蛋白-1高表达转基因小鼠可以抵抗吗啡所致体重的降低。本专利技术提供了硫氧还蛋白-1的一种新用途，即硫氧还蛋白-1在抵抗吗啡成瘾中的应用。结果表明:利用黑白箱实验装置对各组小鼠进行条件性位置偏爱训练，发现野生型吗啡组小鼠对产生了对位置偏爱性，也就是说对吗啡产生了成瘾性；而硫氧还蛋白-1高表达转基因小鼠能够拮抗吗啡所引起的位置偏爱行为。因此，硫氧还蛋白-1的高表达可用于阿片类毒品成瘾的预防及治疗。由于硫氧还蛋白-1在预防及治疗吗啡成瘾中的应用是专利技术人的首次发现，因此，无论是硫氧还蛋白-1单独使用还是活性成分制成的药剂，均在本专利的保护范围之内。与目前药物成瘾研宄相比，本专利技术具有以下优点:(I)疗效显著；(2)安全性高，无成瘾性；(3)更加明确的靶向性。本专利技术通过下列实施方式证明了硫氧还蛋白的高表达表能用于阿片类毒品药物成瘾的作用，但不仅限于这些实施例子。【附图说明】图1是本专利技术硫氧还蛋白-1高表达转基因小鼠抵抗吗啡所引起的位置偏爱行为的实验分析结果； 图2是本专利技术硫氧还蛋白-1高表达转基因小鼠抵抗吗啡所引起的体重变化的实验分析结果。【具体实施方式】下面描述本专利技术的【具体实施方式】，所用方法如无特别说明均为常规方法。1、实验动物:SPF级C57BL/6小鼠，雄性，6-7周龄，体重22_25g，由重庆医科大学实验动物中心提供；硫氧还蛋白高-1表达转基因小鼠，雄性，6-7周龄，体重22-25g，广州赛业生物科技有限公司；小鼠单笼隔离饲养，饲喂专用饲料，自由饮食和饮水。2.药品:盐酸吗啡注射液(东北制药集团公司沈阳第一制药厂)。实施例1:硫氧还蛋白转基因高表达小鼠拮抗吗啡所引起的位置偏爱行为 位置偏爱实验装置是由两个大小完全相同的盒子组成(每个盒子大小为15 X 15 X 30cm)，中间有一个可关闭的洞口。两个盒子分别为白色、光滑地板和黑色、颗粒粗糙地板。小鼠分成4组(每组9只):对照组(saline)、吗啡组(Mor)、硫氧还蛋白-1高表达转基因组(TG)和硫氧还蛋白-1高表达转基因加吗啡组(Mor+TG)。首先将四组小鼠放入位置偏爱实验装置，在两盒子间自由活动，适应2天，第3天，记录15 min小鼠在黑盒子中的时间，记录小鼠体重。第5，7，9，11天，每组小鼠腹腔注射生理盐水，放入黑盒子中15 min;第4，6，8，10天Mor组和Mor+TG组腹腔注射吗啡(20 mg/kg), saline组和TG组腹腔注射生理盐水后，放入白盒子中15 min ;第12天，打开洞口，使小鼠自由运动，记录15 min内小鼠在白盒子中的时间，并记录小鼠体重； 图1结果显示，Mor组小鼠经吗啡注射后，会对白盒子产生偏爱行为(知< 0.05，与saline组小鼠对比)；而Mor+TG组小鼠对白盒子产生偏爱行为降低(*/?< 0.05，与Mor组小鼠对比)；图2结果显不，Mo本文档来自技高网...

【技术保护点】
硫氧还蛋白‑1在制备抵抗吗啡成瘾药物中的应用。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：白洁，李翔，周小爽，
申请(专利权)人：昆明理工大学，
类型：发明
国别省市：云南;53