【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种应用于大规模悬浮培养的表达目的蛋白CHO细胞株的筛选方法。
技术介绍
从上世纪60年代开始，人们就开始了利用哺乳动物细胞培养技术生产各种大分 子生物制品。并且，伴随着永久性细胞株的大量开发和应用，以及在实际需要和商业利益需 求下，以哺乳动物细胞为工具的药用蛋白研宄与生产开始快速的发展起来，如病毒疫苗、抗 体、干扰素、激素、免疫调节剂、和生长因子等的研宄与生产。 常用于外源蛋白表达的哺乳动物细胞有CHO、NS0、杂交瘤等细胞，其中，CHO细 胞来源于中国仓鼠的卵巢，常用于生物学和医学研宄，中国仓鼠卵巢（Chinese hamster ovary，CH0)细胞是外源真核基因的最佳表达系统，是生物制药中最常用的哺乳动物细胞。 1984年Genentech公司利用r-CHO细胞表达的组织型纤溶酶原激活剂t-PA，成为 第一个运用哺乳动物细胞培养技术大规模生产的生物技术药物。当今，CHO细胞已经是工 业上生产重组蛋白最常用的细胞系。在已经上市和正在进行临床研宄的基因工程药物中， 约60-70%为哺乳动物细胞表达产品，而CHO细胞表达产品占其中...
【技术保护点】
一种应用于大规模悬浮培养的表达目的蛋白CHO细胞株的筛选方法，其特征在于该方法的具体步骤为：a. 使用传统筛选方法获得若干个候选细胞株，简要步骤如下：采用的细胞株为CHO细胞，在无血清悬浮培养进行目的蛋白的表达，根据实际需要，筛选出Qp值符合要求的细胞株作为种子进行保存；b. 对步骤a所得到的细胞株进行连续式培养筛选，具体步骤如下：b‑1. 取步骤a所筛选出的细胞株进行复苏操作后，分别接种于无血清培养基中，接种的密度为1～5X105cells/ml，得到细胞悬浮液，进行后续的互不干扰的平行培养过程；b‑2. 将步骤b‑1所得各细胞悬液进行摇瓶培养，摇床速度50～150rpm...
【技术特征摘要】
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