本发明专利技术公开阿魏极性分离部位在制备抗肿瘤药物中的应用，阿魏的极性分离部位为用极性溶剂提取阿魏所得到的部位。阿魏的极性分离部位具有良好的抗肝癌、胃癌和/或结肠腺癌作用，特别是其中的乙酸乙酯部位和正丁醇部位。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物药物领域，具体涉及阿魏极性分离部位在制备抗肿瘤药物中的应用。
技术介绍
阿魏，别名：臭阿魏、细叶阿魏，伞形科、阿魏属植物，是新疆一种独特的药材。高50-100厘米，全株披白色绒毛，根肥大，圆柱形或纺锤形，有时分杈，表皮紫黑色，有臭气，开黄色小花。圆茎阿魏与它相比，植株要高一倍，茎直立。功能主治：消积，杀虫，治癥瘕痞块，虫积，肉积，心腹冷痛，疟疾，痢疾。
技术实现思路
本专利技术的目的利用阿魏通过极性分离得到的有效部位进行抗肿瘤药物的研制。阿魏极性分离部位在制备抗肿瘤药物中的应用，所述极性分离部位为用极性溶剂分离提取阿魏所得到的部位。进一步，所述极性溶剂为乙醇或石油醚。乙醇提取得的部位进一步用乙酸乙酯、正丁醇或甲醇极性溶剂分离。进一步，所述极性分离部位为先用乙醇提取阿魏，得到的提取液再用乙酸乙酯、正丁醇或甲醇萃取得到的部位。进一步，所述极性分离部位为先用乙醇提取阿魏，得到的提取液再用乙酸乙酯或正丁醇萃取得到的部位。进一步，所述极性分离部位为先用乙醇提取阿魏，得到的提取液再用乙酸乙酯萃取得到的部位。进一步，所述肿瘤为肝癌、胃癌和/或结肠腺癌。阿魏极性分离部位，通过阿魏用极性溶剂提取，提取液干燥，得到所述阿魏极性分离部位，所述极性溶剂为乙醇或石油醚。进一步，用乙醇提取得到提取液先用乙酸乙酯、正丁醇或甲醇萃取，所得萃取液再经干燥得到所述阿魏极性分离部位。进一步，提取液与硅藻土拌和后，再用乙酸乙酯、正丁醇或甲醇萃取。阿魏极性分离部位的制备方法，阿魏先用乙醇提取，所得提取液与硅藻土拌和均匀后，再用乙酸乙酯、正丁醇或甲醇萃取，所得萃取液干燥，即得阿魏极性分离部位。附图说明图1为新疆阿魏不同极性分离部位对结肠癌Caco-2的凋亡作用流式图，其中，A：正常对照组，B～E分别为石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、甲醇部位；图2为新疆阿魏不同极性部位对胃癌MFC的凋亡作用流式图，其中，A：正常对照组，B～E分别为石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、甲醇部位；图3为新疆阿魏不同极性分离部位对肝癌HepG2的凋亡作用流式图，其中，A：正常对照组，B～E分别为石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、甲醇部位；图4为阿魏乙酸乙酯部位对HCT116荷瘤裸鼠的生长曲线图。具体实施例方式以下结合实施例对本专利技术做进一步详细说明。一、新疆阿魏极性分离部位的制备药材：新疆阿魏药材试剂：正丁醇(分析级，西安化学试剂厂，批号20081008)，乙醇(分析级，95％，天津市富宇精细化工有限公司，批号20121009)，乙酸乙酯(天津市致远化学试剂有限公司)，石油醚(馏程：30-60℃，天津市富宇精细化工有限公司，20120103)，无水甲醇(天津市富宇精细化工有限公司，20111227)，硅藻土(青岛海洋，20081118)。新疆阿魏(400g)，用2000mL石油醚超声提取40min，控温在40℃以下，过滤，提取液浓缩，60℃干燥至无气泡产生，即得石油醚部位。将新疆阿魏经石油醚提取过滤后的残渣用乙醇超声提取40min(料液比为1：5，g/ml)，控温在40℃以下，过滤，提取液减压浓缩，浓缩液用硅藻土拌和均匀后(以硅藻土将浓缩液吸干，成粗粉状即可)，依次用乙酸乙酯、正丁醇、无水甲醇超声萃取5min，滤过，滤液浓缩干燥，分别得乙酸乙酯部位、正丁醇部位、甲醇部位。上述乙醇提取液浓缩后，如采用传统的水相-有机相进行萃取，乙醇提取物与水接触后会产生乳白色油状物，为避免该问题以及保证成分的稳定，本专利技术优先将浓缩液与硅藻土进行干粉拌样。二、新疆阿魏极性分离部位对肿瘤细胞的抑制作用在初期的抗肿瘤药物筛选和研究中，药物体外肿瘤细胞抑制研究扮演着非常重要的角色。在体外肿瘤细胞抑制方法筛选抗肿瘤药物时，检测的有效指标常针对细胞的生存能力和生存状态两个方面，前者的是指对肿瘤细胞的直接增殖抑制作用的测定，常用的检测方法的有MTT法与SRB法。而后者是指对肿瘤细胞促使凋亡的作用的测定，常用的有流式细胞术、ELISA法等。本研究将通过SRB与流式细胞术的检测分析新疆阿魏极性分离部位干预下，人肝癌细胞HepG2、小鼠胃癌细胞MFC、人结肠腺癌细胞Caco-2的增殖抑制和凋亡作用情况。2.1 实验仪器与材料2.1.1 实验仪器超净工作台(中国上海智诚ZHJH-C1112B)，酶标仪(美国Thermo公司)，二氧化碳培养箱(美国Thermo公司)，流式细胞仪(美国MILLPORE公司，GUAVAEASYCYTE 8HT)，10mL移液管，5mL移液管，100mm细胞培养皿，6孔板，96孔细胞培养板(美国COSTAR公司)，移液器(德国eppendorf公司)。2.1.2 实验材料药材：上述阿魏各极性分离部位。细胞株：人肝癌细胞HepG2、小鼠胃癌细胞MFC、人结肠腺癌细胞Caco-2(购自上海中科院细胞研究所，试验使用在5-10代之间)。试剂：DMEM高糖、RPMI1640培养液(美国Gibco公司，批号1346370、1237839)，胎牛血清(美国Hyclone公司批号F120121)，青链霉素混合液(美国Hyclone公司，批号J120051)，0.25％胰蛋白酶-EDTA消化液(北京Solarbio公司,批号120913)，DMSO(美国Sigma公司，批号67685TT)，PBS(美国Hyclone公司，批号NYCO830)，SRB(美国Sigma公司，批号20223FAV)，三氯乙酸(分析级，天津市百世化工有限公司，批号20100102)，冰乙酸(分析级，天津市百世化工有限公司，批号20121103)。2.2 实验方法2.2.1 SRB法测定新疆阿魏不同极性分离部位对结3种肿瘤细胞的增殖抑制作用2.2.1.1 分组与给药取处于对数生长期的HepG2细胞、MFC细胞、Caco-2细胞制成细胞悬液，计数调整其浓度为1×105cells·mL-1。于96孔板上每孔加入上述细胞悬液100μL，四周边缘孔用无菌PBS填充，培养24h后加药处理。以正常培养基加相应浓度的助溶剂DMSO(浓度小于0.2％)为正常对照组，上述新疆阿魏的极性分离得到的石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和甲醇部位4组为药物组，分别用DMSO助溶后用培养基分别稀释成250mg·L-1、125mg·L-1、62.5mg·本文档来自技高网...
【技术保护点】
阿魏极性分离部位在制备抗肿瘤药物中的应用，所述极性分离部位为用极性溶剂分离提取阿魏所得到的部位。
【技术特征摘要】
1.阿魏极性分离部位在制备抗肿瘤药物中的应用，所述极性分离部位为用极性溶剂分离提取阿魏所得到的部位。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述极性溶剂为乙醇或石油醚。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述极性分离部位为先用乙醇提取阿魏，得到的提取液再用乙酸乙酯、正丁醇或甲醇萃取得到的部位。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述极性分离部位为先用乙醇提取阿魏，得到的提取液再用乙酸乙酯或正丁醇萃取得到的部位。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述极性分离部位为先用乙醇提取阿魏，得到的提取液再用乙酸乙酯萃取得到的部位。
6.根据权利要求1所述的应...
【专利技术属性】
技术研发人员：张海英，姜林，李伟，王先敏，卢军，张洪平，周龙龙，陈良，刘晶，李茜，
申请(专利权)人：新疆医科大学附属中医医院，
类型：发明
国别省市：新疆;65
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