一种基于ⅡB型限制性内切酶酶切的简化基因组建库方法技术

技术编号:11391826 阅读:162 留言:0更新日期:2015-05-02 03:50
本发明专利技术涉及分子生物学技术领域,公开了一种基于ⅡB型限制性内切酶酶切的简化基因组建库方法,包含下述步骤:(1)以BsaXI酶对基因组DNA进行酶切;(2)对酶切产物连接接头一和接头二;(3)纯化连接产物;(4)对纯化后的产物进行PCR扩增;(5)纯化PCR产物,得到测序文库;其中步骤(2)中的两个接头分别由序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的两个核苷酸片段、序列如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:2所示的两个核苷酸片段杂交合成。本发明专利技术所提供的建库方法简便快捷,建库成本低,且建得文库的准确性高,可以更有效地进行高通量测序。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种基于ⅡB型限制性内切酶酶切的简化基因组建库方法,其特征在于,包含下述步骤:(1)利用ⅡB型限制性内切酶对基因组DNA进行酶切,得到酶切产物;(2)对酶切产物连接接头一和接头二,得到连接产物;(3)对连接产物进行纯化,得到纯化后的连接产物;(4)将纯化后的连接产物进行PCR扩增,得到PCR产物;(5)对PCR产物进行纯化,得到测序文库;其中,步骤(1)中所述的ⅡB型限制性内切酶为BsaXI酶;步骤(2)中所述的接头一由序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的两个核苷酸片段杂交合成、所述的接头二由序列如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:2所示的两个核苷酸片段杂交合成。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:孙子奎高文学丁方美王锋唐嘉婕
申请(专利权)人:上海派森诺生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:上海;31

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