一种黄独愈伤快速繁殖方法技术

本发明专利技术提供一种黄独愈伤成苗快速繁殖方法，包括：使用愈伤诱导培养基进行黄独愈伤组织诱导培养，得到愈伤组织；使用MS繁殖培养基对所得的愈伤组织进行愈伤组织分化培养，得到丛生芽；使用MS壮苗培养基中对所得的丛生芽进行丛生芽壮苗培养，得到健壮植株；使用MS生根培养基对所得的健壮植株进行植株生根培养最终得到完整植株，实现黄独幼苗的炼苗和移栽。本发明专利技术提高了愈伤组织分化速度，提高了丛生芽的生长速度，提高了生根率。本发明专利技术所述的快速繁殖方法，得到的单芽增殖系数达到30-50倍，获得的组培苗生根率在95％以上，每株平均带5-8个根，根长为3-5厘米，移栽沙床成活率在98％以上。

【技术实现步骤摘要】
一种黄独愈伤快速繁殖方法
本专利技术涉及植物繁殖
，更具体地说，本专利技术涉及一种黄独愈伤快速繁殖方法。
技术介绍
黄独(Dioscoreaceae)，薯蓣科，薯蓣属植物。一般药用其块茎，主要用于各科甲状腺疾病和多种癌症。生产上主要利用零余子进行无性繁殖，零余子冬季休眠(缪存明)长期无性繁殖致使种性退化，产量.品质连年下降。目前利用愈伤组织成苗可解决黄独种苗紧缺的问题。目前无论是黄独还是其他植物物种都有利用愈伤组织进行快速繁殖。这种传统的愈伤组织快速繁殖作用原理是：将植物组织消毒以后，进行诱导培养得到愈伤组织或是芽体，再对愈伤组织或是芽体增殖，接着进行生根培养，最后炼苗和移栽。繁殖的不同阶段对培养基有不同的要求，所以需要针对性的规定每个繁殖阶段激素的用法和用量。但是，传统的方法在整个繁殖过程都使用同一种培养基，这些培养基无法满足愈伤组织繁殖的各个阶段的特定性需要，所以无法促进愈伤组织更好更快的成长。传统的培养基中一般加入了6-BA、IAA、IBA以及NAA，这些物质加入的量不一样会产生不同的效果，且这些物质对于不同的植物产生的效果也不一样。牛肉浸膏属于动物组织培养基的添加物，其为动物组织培养提供养分。把牛肉浸膏应用于植物组织培养基会不会产生良好的效果，目前相关实验还是比较少，特别是将牛肉浸膏应用于黄独愈伤组织培养，目前还是空白。为了解决这种缺陷，现有技术中公开了一种木鳖子组织培养的快速繁殖方法，其通过在愈伤组织诱导、愈伤组织分化和生根诱导阶段使用不同的培养基和培养条件，以促进愈伤组织的生根率。但是通过这种方法，是针对木鳖子的繁殖方法，由于植物物种之间具有差异性，这种方法并不适用于黄独，且该技术方案没有使用牛肉浸膏。因此专利技术一种新的黄独愈伤成苗快速繁殖方法成为一个亟需解决的问题。
技术实现思路
作为各种广泛且细致的研究和实验的结果，本专利技术的专利技术人已经发现，在黄独愈伤组织成苗繁殖的的不同阶段使用加入不同含量的NAA、KT、6-BA和IAA的培养基时，这些加入的化合物有助于提高愈伤组织分化和繁殖的速度，提高生根率，本专利技术的专利技术人还发现在每个培养基中加入适量的牛肉浸膏，能够促进愈伤组织的生长，使丛生芽生长的更好。基于这种发现，完成了本专利技术。本专利技术的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。本专利技术还有一个目的是在愈伤组织培养、愈伤组织分化获得丛生芽快速繁殖培养、丛生芽壮苗培养和植株生根培养阶段分别使用愈伤诱导培养基、MS繁殖培养基、MS壮苗培养基和MS生根培养基，提高愈伤组织分化速度，提高丛生芽的生长速度，提高生根率。本专利技术还有一个目的是在每个培养基中加入适量牛肉浸膏，促进愈伤组织的生长，使丛生芽生长得更好。本专利技术还有一个目的是通过生物技术对黄独愈伤组织培养快速繁殖，提高黄独种苗的繁殖系数和种苗质量，实现规模化生产，满足生产上的需要。为了实现根据本专利技术的这些目的和其它优点，提供了一种黄独愈伤成苗快速繁殖方法，包括：使用愈伤诱导培养基进行黄独愈伤组织诱导培养，得到愈伤组织；使用MS繁殖培养基对所得的愈伤组织进行愈伤组织分化培养，得到丛生芽；使用MS壮苗培养基中对所得的丛生芽进行丛生芽壮苗培养，得到健壮植株；使用MS生根培养基对所得的健壮植株进行植株生根培养最终得到完整植株，实现黄独幼苗的炼苗和移栽；其中，所述愈伤诱导培养基中含有：4-6g/L的牛肉浸膏、1.0-2.0mg/L的TDZ、0.5-1.0mg/L的NAA、25-30g/L的蔗糖和4.5-5.0g/L的琼脂；MS繁殖培养基中含有：4-6g/L的牛肉浸膏、0.1-0.4mg/L的KT、1.0-2.0mg/L的6-BA、0.2-1.0mg/L的IBA、1-5g/L的GA3、25-30g/L的蔗糖和4.5-5.0g/L的琼脂；MS壮苗培养基中含有：4-6g/L的牛肉浸膏、0.5-1.5mg/L的6-BA、0.1-0.4mg/L的KT、0.2-0.6mg/L的IAA、25-30g/L的蔗糖和4.5-5.0g/L的琼脂；MS生根培养基中含：4-6g/L的牛肉浸膏、1.0-2.0mg/L的NAA、0.5-1.0mg/L的IBA、15-30g/L的蔗糖和4.5-5.0g/L的琼脂。优选的是，所述的黄独愈伤成苗快速繁殖方法中，所述愈伤组织培养的方法为：将无菌试管苗剪切成段接种到愈伤诱导培养基中，在培养温度为23-26℃，光照强度1400-2000lux，光照时间为10-12小时/天的条件下培养24-25天得到愈伤组织。优选的是，所述的黄独愈伤成苗快速繁殖方法中，愈伤组织分化培养方法为：将所得的愈伤组织接种到MS繁殖培养基中，在培养温度为23-26℃，光照强度1400-2000lux，光照时间为10-12小时/天的条件下培养29-30天，至侧芽分化后获得丛生芽。优选的是，所述的黄独愈伤成苗快速繁殖方法中，所述丛生芽壮苗培养方法为：将所得的丛生芽置于MS壮苗培养基中，在培养温度23-26℃，光照强度1400-2000lux，光照时间为10-12小时/天的条件下培养19-20天得到健壮植株。优选的是，所述的黄独愈伤成苗快速繁殖方法中，所述植株生根培养步骤包括：将所得的健壮植株置于MS生根培养基中，在培养温度23-26℃，光照强度1400-2000lux，光照时间为10-12小时/天的条件下培养39-40天得到带根的完整植株。优选的是，所述的黄独愈伤成苗快速繁殖方法中，所述炼苗和移栽包括以下步骤：步骤一、将所得的完整植株，在温度为22-25℃条件下，使用水炼苗2-4天，表面角质形成后取出，得到苗株；步骤二、将所得苗株移栽到通风良好且光照强度为500-2000lux的沙土壤中，在沙土壤中培养30-50天后得到小树；步骤三、将所得小树移栽大田，移栽后一个星期内，每天喷雾3-5次，每次10min；一星期后每天喷雾1-2次，每次10min；移栽时的温度条件为20-28℃，相对湿度75-80％，遮阳率为65-75％，最后得到移栽种苗。优选的是，所述的黄独愈伤成苗快速繁殖方法中，所述各培养基的初始pH均为5-6。本专利技术至少包括以下有益效果：首先，在MS繁殖培养基中添加1.0-2.0mg/L的6-BA和0.1-0.4mg/L的激动素KT促进了丛生芽的快速分化；添加浓度为0.2-1.0mg/L的IBA促进了丛生芽的生长；在MS壮苗培养基中添加浓度为0.5-1.5mg/L的6-BA和0.2-0.6mg/L的IAA促进了丛生芽叶片的快速展开；在MS生根培养基上组合使用浓度为0.5-1.0mg/L的IBA和1.0-2.0mg/L的NAA，促进丛生芽快速生长成为带根的完整植株，这些植株经炼苗后可直接移栽沙床。其次，本专利技术在每个培养基中都加入4-6g/L的牛肉浸膏，能够促进黄独愈伤组织的生长，使丛生芽长的更好。再次，通过生物技术对黄独愈伤组织培养快速繁殖，在短时间内培育出大量可供大田栽培的黄独幼苗，提高了黄独种苗的繁殖系数和种苗质量，实现规模化生产，满足生产上的需要。最后，本专利技术所述的快速繁殖方法，得到的单芽增殖系数达到30-50倍，获得的组培苗生根率在95％以上，每株平均带5-8个根，根长为3-5厘米，移栽沙床成活率在98％以上。本专利技术的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种黄独愈伤成苗快速繁殖方法，其特征在于：使用愈伤诱导培养基进行黄独愈伤组织诱导培养，得到愈伤组织；使用MS繁殖培养基对所得的愈伤组织进行愈伤组织分化培养，得到丛生芽；使用MS壮苗培养基中对所得的丛生芽进行丛生芽壮苗培养，得到健壮植株；使用MS生根培养基对所得的健壮植株进行植株生根培养最终得到完整植株，实现黄独幼苗的炼苗和移栽；其中，所述愈伤诱导培养基中含有：4‑6g/L的牛肉浸膏、1.0‑2.0mg/L的TDZ、0.5‑1.0mg/L的NAA、25‑30g/L的蔗糖和4.5‑5.0g/L的琼脂；MS繁殖培养基中含有：4‑6g/L的牛肉浸膏、0.1‑0.4mg/L的KT、1.0‑2.0mg/L的6‑BA、0.2‑1.0mg/L的IBA、1‑5g/L的GA3、25‑30g/L的蔗糖和4.5‑5.0g/L的琼脂；MS壮苗培养基中含有：4‑6g/L的牛肉浸膏、0.5‑1.5mg/L的6‑BA、0.1‑0.4mg/L的KT、0.2‑0.6mg/L的IAA、25‑30g/L的蔗糖和4.5‑5.0g/L的琼脂；MS生根培养基中含：4‑6g/L的牛肉浸膏、1.0‑2.0mg/L的NAA、0.5‑1.0mg/L的IBA、15‑30g/L的蔗糖和4.5‑5.0g/L的琼脂。...

【技术特征摘要】
1.一种黄独愈伤成苗快速繁殖方法，其特征在于：使用愈伤诱导培养基进行黄独愈伤组织诱导培养，得到愈伤组织；使用MS繁殖培养基对所得的愈伤组织进行愈伤组织分化培养，得到丛生芽；使用MS壮苗培养基中对所得的丛生芽进行丛生芽壮苗培养，得到健壮植株；使用MS生根培养基对所得的健壮植株进行植株生根培养最终得到完整植株，实现黄独幼苗的炼苗和移栽；其中，所述愈伤诱导培养基为：4-6g/L的牛肉浸膏、1.0-2.0mg/L的TDZ、0.5-1.0mg/L的NAA、25-30g/L的蔗糖和4.5-5.0g/L的琼脂；MS繁殖培养基为：MS、4-6g/L的牛肉浸膏、0.1-0.4mg/L的KT、1.0-2.0mg/L的6-BA、0.2-1.0mg/L的IBA、1-5g/L的GA3、25-30g/L的蔗糖和4.5-5.0g/L的琼脂；MS壮苗培养基为：MS、4-6g/L的牛肉浸膏、0.5-1.5mg/L的6-BA、0.1-0.4mg/L的KT、0.2-0.6mg/L的IAA、25-30g/L的蔗糖和4.5-5.0g/L的琼脂；MS生根培养基为：MS、4-6g/L的牛肉浸膏、1.0-2.0mg/L的NAA、0.5-1.0mg/L的IBA、15-30g/L的蔗糖和4.5-5.0g/L的琼脂。2.如权利要求1所述的黄独愈伤成苗快速繁殖方法，其特征在于，所述愈伤组织诱导培养的方法为：将无菌试管苗剪切成段接种到愈伤诱导培养基中，在培养温度为23-26℃，光照强度1400-2000lux，光照时间为10-12小时/天的条件下培养24-25天得到愈伤组织。3.如权利要求1所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：李刚，王晓峰，缪剑华，樊兰兰，韦坤华，
申请(专利权)人：广西壮族自治区药用植物园，
类型：发明
国别省市：广西;45