【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种应用基因芯片分析牙周膜干细胞向成骨细胞分化的方法,其特征在于:包括如下具体操作步骤:(1)培养牙周膜干细胞:在无菌条件下取出因正畸及阻生而拔除的磨牙中的牙周膜,接着将牙周膜剪碎,并采用I型胶原酶及dispase酶于37℃下消化1h,之后离心后重悬,用100μm钢网过滤重悬液,获得单细胞悬液;(2)牙周膜干细胞的分选:对步骤(1)中获得的单细胞悬液,利用胰酶消化收集其中对数生长期的牙周膜细胞,并依据抗体说明书采用STRO‑1‑PE标记细胞,经FACS流式细胞仪分选收集STRO‑1阳性细胞,所收集到的STRO‑1阳性细胞即为所需的牙周膜干细胞;(3)成骨细胞定向诱导分化:克隆培养步骤(2)所得的牙周膜干细胞,待其生长至80%的汇集度时,其中的胰酶也被消化后,即得种子液;之后将种子液接种在6孔板或者是24孔板中,24小时后改用诱导液培养,且诱导液中的矿化液包括:10%的胎牛血清、10‑6mol/L地塞米松、50mg/Lα‑抗坏血酸以及10mmol/Lβ‑甘油磷酸钠的α‑MEM;(4)成骨细胞的鉴定:取步骤(3)矿化诱导后的细胞,采用RT‑PCR和免疫组化方法测其骨钙素OC和I型胶原的转录 ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:吕红兵,郑碧琼,雷丽珊,张明,
申请(专利权)人:福建医科大学附属口腔医院,
类型:发明
国别省市:福建;35
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。