一种从肠衣中提取肝素钠的方法技术

本发明专利技术公开了一种从肠衣中提取肝素钠的方法：技术方案是，先将猪小肠的肠衣洗净，用搅碎机绞碎，混合均匀，投入反应锅中，采用盐解加酶解，以及二次酶解法，控制溶液的盐度，PH，温度等重要条件，从酶解液中运用新型树脂吸附法，运用正向反相吸附法，只吸附溶液中分子量适用段的肝素钠，采用分步洗脱法，洗脱树脂，得到不同分子量分步的肝素钠。得到符合药用安全的原料药，增加了肝素钠来源的途径，创造了巨大的社会经济效益。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了：技术方案是，先将猪小肠的肠衣洗净，用搅碎机绞碎，混合均匀，投入反应锅中，采用盐解加酶解，以及二次酶解法，控制溶液的盐度，PH，温度等重要条件，从酶解液中运用新型树脂吸附法，运用正向反相吸附法，只吸附溶液中分子量适用段的肝素钠，采用分步洗脱法，洗脱树脂，得到不同分子量分步的肝素钠。得到符合药用安全的原料药，增加了肝素钠来源的途径，创造了巨大的社会经济效益。【专利说明】
本专利技术涉及生物
，具体的说涉及从猪肠衣中在加工提取肝素钠的新工 -H- O
技术介绍
肝素钠是一种抗凝血类原料药，是一种高度硫酸化的黏多糖硫酸酯钠盐，最早是由Mclean等人在狗的肝脏组织里分离出的一种天然产物，经过活性研宄发现，此天然产物具有凝血作用。后来肝素具有的最优的作用抗凝血性被科学家Brinkhous等人进一步确认和证实了。随着科学技术的进步和发展，越来越多的科学家对肝素钠表现出了极大的兴趣，也推动肝素钠的研宄，Charles等人最早作为抗凝血剂应用到临床上的研宄，在此之后肝素钠作为商业产品大量应用，肝素钠在抗凝血方面表现出的优越性在全世界产生了广泛的影响，受到了各个国家的广泛重视。
技术实现思路
本专利技术提供一种从肠衣中提取肝素钠的新工艺，丰富了肝素钠的制备来源，创造了巨大的社会经济效益。 本专利技术是通过以下技术方案实现的:一、新树脂的处理方法(I )、将树脂置于较大的容器内，用清水且最好用纯水漂洗干净，抽干，用80~90%工业酒精(或无水乙醇)浸泡24小时左右，洗去树脂中的有机杂质，抽干。(酒精可回收)(2)、用40-50°C热水反复清洗至无酒精味，抽干。 (3 )、用2倍于树脂量的4%HC1溶液浸泡2~3小时，并不断地翻动，用纯水洗至近中性。 (4)、用2倍于树脂量的4%(lmol/L)NaOH溶液浸泡2小时，用纯水洗至近中性，抽干。 (5)、最后再用2倍于树脂量的4%HC1溶液浸泡3~4小时，并不断搅拌，用纯水洗至近中性，用23%(4mol/L)NaCl溶液浸泡2小时，用水洗净盐水，抽干，备用。 二、肠衣提取肝素钠(I)将肠衣投入反应锅中，按肠衣重的5%加入胰蛋白酶，用3mol/L的NaOH溶液调pH为8~9之间，同时搅拌升温达40°C时左右，维持2.5h后，升温达60°C时，按肠衣重的2%加入NaCl固体，然后升温到90°C，调pH为6~7之间，保持1min后直接加热到沸腾，然后趁热用200目尼龙筛子过滤。 三、吸附待滤液冷却至60°C左右时，用3mol/L的NaOH溶液调pH8?9之间，然后加入已处理好的树脂，加量为滤液量的5%，搅拌吸附6h后，静置lh，用200目尼龙筛子过滤。整个吸附过程的pH保持8?9。 四、脱附在树脂中加入等体积自来水漂洗数次，再用3mol/LNaCl溶液搅拌洗脱树脂2h，NaCl溶液的用量与树脂量相等；脱附后以200目尼龙筛子过滤，收集滤液。重复脱附两次，合并几次滤液。 五、沉淀在滤液中加入等体积乙醇，搅拌lOmin，然后静置12h以上。 六、脱水干燥收集下层沉淀物，乙醇脱水3次。将沉淀置于60°C烘箱中烘干得肝素钠粗品。 【具体实施方式】 下面结合实施例对本专利技术作进一步的说明。 实施例1:一、新树脂的处理方法(I )、将20KG树脂置于较大的容器内，用清水且最好用纯水漂洗干净，抽干，用90%工业酒精(或无水乙醇)浸泡24小时，洗去树脂中的有机杂质，抽干。(酒精可回收)(2)、用50°C热水反复清洗至无酒精味，抽干。 (3 )、用40L的4%HC1溶液浸泡3小时，并不断地翻动，用纯水洗至中性。 (4)、用40L的4%(lmol/L)NaOH溶液浸泡2小时，用纯水洗至中性，抽干。 (5)、最后再用40L的4%HC1溶液浸泡4小时，并不断搅拌，用纯水洗至中性，用23%(4mol/L)NaCl溶液浸泡2小时，用水洗净盐水，抽干，备用。 二、肠衣提取肝素钠(I)将50KG肠衣投入反应锅中，加水50KG，加2.5KG胰蛋白酶，用3mol/L的NaOH溶液调pH为9，同时搅拌升温达40°C时，维持2.5h后，升温达60°C时，加入NaCl固体1KG，然后升温到90°C，调pH为7之间，保持1min后直接加热到沸腾，然后趁热用200目尼龙筛子过滤。 三、吸附待滤液冷却至60°C时，用3mol/L的NaOH溶液调pH9之间，然后加入已处理好的树脂25KG，搅拌吸附6h后，静置lh，用200目尼龙筛子过滤。整个吸附过程的pH保持9。 四、脱附在树脂中加入50L自来水漂洗数次，再用3mol/LNaCl溶液搅拌洗脱树脂2h，NaCl溶液的用量为25L;脱附后以200目尼龙筛子过滤，收集滤液。重复脱附两次，合并几次滤液。 五、沉淀在滤液中加入50L乙醇，搅拌lOmin，然后静置12h以上。 六、脱水干燥收集下层沉淀物，乙醇脱水3次。将沉淀置于60°C烘箱中烘干得肝素钠粗品。 以上所述，仅是本专利技术的较佳实施案例而已，并非是对本专利技术作其他形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述解释的
技术实现思路
加以变更或改型为同等变化的等效实施例，但凡是未脱离本专利技术技术方案内容，依据本专利技术的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改，等同变化与改型，仍属于本专利技术技术方案的保护范围。【权利要求】1.，其特征在于，采用盐解加酶解，以及二次酶解法酶解绞碎后的肠衣，用新型树脂采用正向反相两种吸附方法，吸附肝素钠，结合分级洗脱树脂法，得到不同分子量片段的肝素钠。2.根据权利要求1所述的，其特征包括如下步骤: 一、新树脂的处理方法 (I )、将树脂置于较大的容器内，用清水且最好用纯水漂洗干净，抽干，用80~90%工业酒精(或无水乙醇)浸泡24小时左右，洗去树脂中的有机杂质，抽干；(酒精可回收) (2)、用40-50°C热水反复清洗至无酒精味，抽干； (3)、用2倍于树脂量的4%HC1溶液浸泡2~3小时，并不断地翻动，用纯水洗至近中性； (4)、用2倍于树脂量的4%(ImoVL)NaOH溶液浸泡2小时，用纯水洗至近中性，抽干； (5)、最后再用2倍于树脂量的4%HC1溶液浸泡3~4小时，并不断搅拌，用纯水洗至近中性，用23%(4mol/L)NaCl溶液浸泡2小时，用水洗净盐水，抽干，备用； 二、肠衣提取肝素钠 (I)将肠衣投入反应锅中，按肠衣重的5%加入胰蛋白酶，用3mol/L的NaOH溶液调pH为8~9之间，同时搅拌升温达40°C时左右，维持2.5h后，升温达60°C时，按肠衣重的2%加ANaCl固体，然后升温到90°C，调pH为6~7之间，保持1min后直接加热到沸腾，然后趁热用200目尼龙筛子过滤； 三、吸附 待滤液冷却至60°C左右时，用3mol/L的NaOH溶液调pH8?9之间，然后加入已处理好的树脂，加量为滤液量的5%，搅拌吸附6h后，静置lh，用200目尼龙筛子过滤； 整个吸附过程的PH保持8?9 ; 四、脱附 在树脂中加入等体积自来水漂洗数次，再用3mol/LNaCl溶液搅拌洗脱树脂2h，NaCl溶液的用量与树脂量相等；脱附后以200目尼龙筛子过滤，收集滤液； 重复脱附两次，合并几次滤本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从肠衣中提取肝素钠的方法，其特征在于，采用盐解加酶解，以及二次酶解法酶解绞碎后的肠衣，用新型树脂采用正向反相两种吸附方法，吸附肝素钠，结合分级洗脱树脂法，得到不同分子量片段的肝素钠。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘乃山，刘汝荣，迟培升，
申请(专利权)人：青岛九龙生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37