过敏原提取物制造技术

本发明专利技术披露了用于生产天然的、脱色的以及聚合的过敏原提取物的多种方法。本发明专利技术进一步披露了经由这些方法所生产的多种提取物，以及用于诊断和治疗过敏症的包括这些提取物的多种药物和疫苗组合物。

【技术实现步骤摘要】
过敏原提取物 本申请是2011年02月11日递交的申请号为201180015844. 8,专利技术名称为生产 过敏原提取物的方法的分案申请。
本专利技术涉及一种用于生产纯化的过敏原提取物的方法以及用于诊断和治疗过敏 症的多种药物组合物和疫苗。
技术介绍
过敏是免疫系统的一种获得性超敏失调并且由暴露于被称为过敏原的无害环境 物质所引发。I型超敏反应是过敏反应的特征并且会引起过量的IgE抗体产生,这些IgE 抗体反过来会使嗜碱细胞和肥大细胞活化，从而引起炎性反应。这些效应可能是全身性的， 如血管舒张、粘液分泌、神经刺激以及平滑肌收缩，从而引起一种过敏反应（anaphylaxis reaction)，或者可能局限于身体的某一特定区域，例如呼吸系统。 食物过敏是一个日益显现的主要公共健康问题，影响了约6%的学龄期儿童和约 4%的成人，并且可能会造成严重的后果，包括致命的过敏反应（anaphylactic reaction) (1)。因此，过敏可能会显著影响生活品质的诸多社会心理方面，超出了患者的过敏性症状的 直接临床效果(2)和家庭的诸多日常活动。目前，针对这一类过敏的护理标准包括了严格避 免诸多攻击性过敏原以及用肾上腺素进行治疗。 花生过敏是一种因花生中的膳食物质引起免疫系统过度反应，而出现的I型超敏 性（由IgE介导的）免疫反应。美国的哮喘和过敏基金会估计，在美国，花生过敏是最常见 的与食物相关的死亡原因，且据估计，它影响着0.4%-0.6%的人口。树坚果（如美洲山核 桃、开心果、松子以及核桃）也是常见的坚果过敏原。 至今已从花生（落花生（Arachis hypogea))鉴别出^ 种过敏原（Ara h 1 到Ara h 11)并且这些过敏原中有许多已被测序并且克隆。基于国际免疫学会联合会 (International Union of Immunological Societies，IUIS)命名法，这些过敏原包括： Ara h 1，一个64kDa的Cupin蛋白（豌豆球蛋白型，7S球蛋白）；Ara h 2, 一个17kDa的蓝 豆蛋白（2S白蛋白）；Ara h 3, 一个60kDa的Cupin蛋白（豆球蛋白型，11S球蛋白，大豆球 蛋白）；Ara h 4, 一个37kDa的Cupin蛋白（豆球蛋白型，11S，大豆球蛋白）；Ara h 5, 一个 15kDa的肌动蛋白抑制蛋白（Profilin) ;Ara h 6, 一个15kDa的蓝豆蛋白（2S白蛋白）；Ara h 7, 一个15kDa的蓝豆蛋白（2S白蛋白）；Ara h 8, 一个17kDa的病程相关蛋白PR-10;Ara h 9, 一个9. 8kDa的非特异性脂质转运蛋白I ;Ara h 10, 一个16kDa的油体蛋白；以及Ara h 11，一个14kDa油体蛋白。 对猫过敏是极为常见的，见于高达25%的患有过敏的人。对猫过敏比对狗的皮屑 过敏更为常见，这可能涉及猫的毛发和皮屑作为过敏原的潜在性，以及一般不给猫洗澡的 事实。产生大量猫过敏原，特别是雄性未被阉割过的猫，因为这个过敏原部分受到激素控 制。皮屑常通过空气传播，有粘性，并且见于公共场所，甚至在没有猫时也有。这是因为皮 屑被携带在有猫的人的衣服上，然后在公共场所中脱落。因此，猫过敏原是房屋粉尘的一种 组分，甚至在从未有猫生活过的家中。猫皮屑颗粒的大小是极小的，并且会被深深地吸入肺 中。因此，猫皮屑是过敏性哮喘的一种常见病因，并且对猫过敏的猫主人更倾向于发展诸多 哮喘症状&9)。 主要的猫和狗的过敏原可以在毛发/皮屑提取物和唾液中见到，并且因此被认为 是上皮过敏原。已在猫中鉴别出八种不同的过敏原，并且这些过敏原中有许多已被测序并 且克隆。基于IUIS网站 1，这些过敏原包括：Fel d 1，一个HkDa和4kDa的子宫珠蛋白； Fel d 2, 一个69kDa的白蛋白；Fel d 3, 一个IlkDa的胱抑素；Fel d 4, 一个22kDa的脂 质运载蛋白；Fel d 5, 一个400kDa的免疫球蛋白A ;Fel d 6, 一个800kDa-1000kDa的免 疫球蛋白M;Fel d 7, 一个17, 5kDa的冯埃布纳腺（von Ebner gland)蛋白；Fel d 8, 一个 24kDa的Latherin样蛋白。主要的猫过敏原Fel d 1已通过蛋白和免疫化学技术来广泛地 进行了表征，并且最近被表达为一种重组过敏原。Fel d 1代表一种约36kDa的二聚体，它 是由两个17kd的亚基组成（1Q)。 草过敏是最常见并且普遍的过敏形式之一，它在某些季节影响着具有该过敏病史 的人。它在晚春和初夏的几个月内在空气中存在，此可能引起过敏性鼻炎、过敏性结膜炎以 及哮喘。因坐在草地上或修剪草坪而使皮肤与草直接接触可能会引起皮肤瘙痒、荨麻疹以 及特异性皮炎。最有代表性的物种之一是梯牧草（Phleum pratense)，被选为草组的主导品 种。已鉴别出这个物种梯牧草的九种不同的过敏原。基于过敏原网站1，这些过敏原包括： Phl p 1，一个27kDa 的 β-扩展蛋白；Phl p 2, 一个 10kDa-12kDa 的草组 II/III ;Phl p 4， 一个 55kDa 的蛋白；32kDa 的 Phl p 5 ;llkDa 的 Phl p 6 ;Phl p 7, 一个 6kDa 的I丐结合蛋 白；Phl p 11，一个20kDa的Ole e 1相关蛋白；Phl p 12, 一个HkDa的肌动蛋白抑制蛋 白；以及Phl p 13, 一个55kDa的聚半乳糖醒酸酶。 芦華属（Phragmites)是一种属于草组的属。已描述了若干物种，包括芦華 (P. australis)或普通芦苇（P. communis)。据报导，普通芦苇的花粉在不同地区是致敏的。 授粉发生在夏秋之间，取决于纬度和海拔。 已在芦華属中鉴别出具有IgE结合能力的五种不同的蛋白。基于Allergome网 站 1，这些过敏原包括：30kDa的扩展蛋白；60kDa的属于第4草组的蛋白；35kDa的核糖核酸 酶；HkDa的肌动蛋白抑制蛋白（profilun);以及最后的聚半乳糖醒酸酶。 豚草（豚草属（Ambrosia))是主要生长在中欧的野草。一株植物仅存活一季，但 该植物会产生高达上千个花粉粒。日出之后的暧度、湿度以及微风会有助于释放这些花粉 粒。直到现在，三个不同的物种已与过敏症状有关（豚草（Amborsia artemisiifolia)(短 豚草）、多年生豚草（A. psilostachya)(西方豚草）、以及三裂叶豚草（A. trifida)(巨豚 草））。已在短豚草中鉴别出十种不同的过敏原，并且这些过敏原中有许多已被测序并且 克隆。在豚草的情况下，根据过敏原的国际命名法，这些过敏原被称为Amb a 1到Amb a 10。基于IUIS网站1，这些过敏原包括：Amb a 1，一个38kDa的果胶裂解酶；Amb a 2, 一 个38kDa的果胶裂解酶；Amb a 3, 一个IlkDa的质体蓝素（plastocyanine) ;Amb a 4, 一个本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种脱色的聚合过敏原提取物，所述脱色的聚合过敏原提取物选自花生、花粉(包括豚草和梯牧草)和猫的上皮，并且通过IgE ELISA抑制法或竞争法检测，所述脱色的聚合过敏原提取物相对于天然提取物能够使IgE结合能力降低至少60％。

【技术特征摘要】
2010.02.12 ES P2010301991. 一种脱色的聚合过敏原提取物，所述脱色的聚合过敏原提取物选自花生、花粉（包 括豚草和梯牧草）和猫的上皮，并且通过IgE ELISA抑制法或竞争法检测，所述脱色的聚合 过敏原提取物相对于天然提取物能够使IgE结合能力降低至少60%。2. 根据权利要求1所述的脱色的聚合过敏原提取物，其中，所述IgEELISA抑制法或竞 争法使用来自过敏个体的血清池进行。3. 根据权利要求1或2所述的脱色的聚合过敏原提取物，所述脱色的聚合过敏原能够 使IgE结合能力降低至少95%。4. 根据权利要求3所述的脱色的聚合过敏原提取物，所述脱色的聚合过敏原提取物选 自花生。5. 根据权利要求4所述的脱色的聚合过敏原提取物，所述脱色的聚合过敏原提取物进 一步具有以下物理化学特性和生物学特性： a) 溶于水； b) 不存在分子量低于lOOkDa的未聚合过敏原/蛋白； c) 不存在分子量低于lOOkDa的IgE识别条带； d) 不存在分子量低于lOOkDa的聚合分子； e) 相对于所述天然提取物，游离氨基减少了 75% ; g)在小鼠中不存在异常毒性。6. 根据权利要求1或2所述的脱色的聚合过敏原提取物，所述脱色的聚合过敏原提取 物选自豚草，并且所述脱色的聚合过敏原能够使IgE结合能力降低至少79%。7. 根据权利要求6所述的脱色的聚合过敏原提取物，所述脱色的聚合过敏原提取物进 一步具有以下物理化学特性和生物学特性： a) 溶于水； b) 不存在分子量低于lOOkDa的未聚合过敏原/蛋白； c) 不存在分子量低于lOOkDa的IgE识别条带； d) 不存在分子量低于lOOkDa的聚合分子； e) 相对于所述天然提取物，游离氨基减少了 ...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·卡奈斯·桑切斯，
申请(专利权)人：过敏症研究实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：西班牙;ES