食品中潜在过敏原的筛选方法技术

食品中潜在过敏原的筛选方法，是将食品蛋白与体外模拟消化液混合后，以SDS‑PAGE电泳分析不同消化时间条件下的消化产物；选取耐酶解条带进行胶内酶解，所得肽段采用液相色谱‑质谱联用鉴定分析，并结合蛋白质数据库和过敏原数据库，确定致敏蛋白质种类及其过敏性。本发明专利技术的方法无需预先纯化目标蛋白质，操作简单，结果显著，且可信度高，重复性强。该方法不仅能够检测食物的过敏原，还能够评估耐酶解蛋白质的过敏性。方法简便易行，可以同时检测多个样品，易于实现高通量筛选，符合食品检测领域准确高效的需求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及食品中过敏原评估检测方法，属检验检疫领域。
技术介绍
食品过敏指的是人体免疫系统对食品中的某种物质产生了免疫反应，包括抗体的释放，而这些抗体又引起人体内某些化学物质释放，例如组胺会引起皮肤发痒、流鼻涕、咳嗽、呼吸困难，甚至导致死亡(张瑞灏等，中国检验检疫，2009，3:22)。除牛奶、蛋类以及坚果等常见的陆地食物过敏原外，鱼类等水产品过敏原同样占据了非常大的比重。在发达国家，对鱼类过敏的人群约占总人群的0.1～0.3％(ZhangW.,etc,FoodChemistry2015,174:547.)。在我国，水产品和鸡蛋、牛奶等都是引起食物过敏的主要原因，在对在校大学生食物过敏的流行病学研究表明，鱼类是最主要的致敏食物之一，占过敏患者总数的18.2％。(吕相征等，中国食品卫生杂志2005,17:119)。然而现有技术中明确鉴定的过敏原数量非常有限。以鱼类过敏原的鉴定为例，目前已发现并鉴定的鱼类过敏原只有如小清蛋白、鱼卵蛋白、胶原蛋白以及肌钙蛋白等数种机体表达极为丰富的组织蛋白，除此以外，可能还存在大量的表达丰度低，但活性非常强烈的鱼类过敏原，这极本文档来自技高网...

【技术保护点】
食品中潜在过敏原的筛选方法，是将食品蛋白与体外模拟消化液混合后，以SDS‑PAGE电泳分析不同消化时间条件下的消化产物；选取耐酶解条带进行胶内酶解，所得肽段采用液相色谱‑质谱联用鉴定分析，并结合蛋白质数据库和过敏原数据库，确定致敏蛋白质种类及其过敏性。

【技术特征摘要】
1.食品中潜在过敏原的筛选方法，是将食品蛋白与体外模拟消化液混合后，
以SDS-PAGE电泳分析不同消化时间条件下的消化产物；选取耐酶解条带进行
胶内酶解，所得肽段采用液相色谱-质谱联用鉴定分析，并结合蛋白质数据库和
过敏原数据库，确定致敏蛋白质种类及其过敏性。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的体外模拟消化液是体
外模拟胃液或体外模拟肠液。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的体外模拟消化液中的
酶与食品蛋白的质量比是1:40～60。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的致敏蛋白质种类及其
过敏性的判断标准包括：待测蛋白质的氨基酸序列采用生物信息学的方法与已
知过敏原进行比对：如果待测蛋白质至少6个连续的氨基酸与已知过敏原氨基
酸序列相同；或长度至少为80个氨基酸的序列与过敏原蛋白质的相似性在35％
以上，该判定该待测蛋白质具有潜在过敏性。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的食品蛋白是采用等电
点沉淀法、缓冲盐提取法或有机溶剂提取法从食物样品中提取，并经冷冻干燥处
理的混合蛋白样品。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的食品蛋白是鱼源性食
品蛋白。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述的体外模拟消化液是含
有胃蛋白酶...

【专利技术属性】
技术研发人员：祁艳霞，高庆历，于洋，赵前程，李智博，宋杨，
申请(专利权)人：大连海洋大学，祁艳霞，
类型：发明
国别省市：辽宁;21