【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种检测氯霉素的蛋白制备方法。
技术介绍
氯霉素广泛应用于动物各种传染病治疗，特别是用于奶牛乳腺炎的治疗，从而易使奶制品里有氯霉素残留。由于氯霉素的苯环上含有硝基，对人体具有毒副作用，能抑制造血机能，因此我国农业部已经禁止使用氯霉素，无论内销还是出口，氯霉素残留检测都是必检项目。 氯霉素类抗生素可作用于细菌核糖核蛋白体的50S亚基，而阻挠蛋白质的合成，属抑菌性广谱抗生素。细菌细胞的70S核糖体是合成蛋白质的主要细胞成分，它包括50S和30S两个亚基。氯霉素通过可逆地与氯霉素50S亚基结合,阻断转肽酰酶的作用，干扰带有氨基酸的胺基酰-tRNA终端与50S亚基结合，从而使新肽链的形成受阻，抑制蛋白质合成。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种检测氯霉素的蛋白制备方法，其是受体配体结合，而且配体容易批量获得，具有更高的灵敏度及更低的生产成本。为了达到上述目的，本专利技术的技术方案是： 一种检测氯霉素的蛋白制备方法，包括如下步骤：首先在缓冲液中加入蔗糖调制成5—25%直线型蔗糖密度梯度液，接着在蔗糖密度梯度液中加入大肠杆菌核糖体后通过超速离心机离心分离获得50S核糖体亚基，最后用磷酸盐缓冲液稀释50S核糖体亚基至2mg/ml后制备成蛋白。 所述缓冲液由以下重量比的原材料配置而成： 醋酸镁 0.2；三（羟甲基）氨基甲烷 10；氯化铵 60。 所述5—25%直线型...
【技术保护点】
一种检测氯霉素的蛋白制备方法，其特征在于包括如下步骤：首先在缓冲液中加入蔗糖调制成5—25%直线型蔗糖密度梯度液，接着在蔗糖密度梯度液中加入大肠杆菌核糖体后通过超速离心机离心分离获得50S核糖体亚基，最后用磷酸盐缓冲液稀释50S核糖体亚基至2mg/ml后制备成蛋白。
【技术特征摘要】
1.一种检测氯霉素的蛋白制备方法，其特征在于包括如下步骤：首先在缓冲液中加入蔗糖调制成5—25%直线型蔗糖密度梯度液，接着在蔗糖密度梯度液中加入大肠杆菌核糖体后通过超速离心机离心分离获得50S核糖体亚基，最后用磷酸盐缓冲液稀释50S核糖体亚基至2mg/ml后制备成蛋白。
2.根据权利要求1所述的一种检测氯霉素的蛋白制备方法，其特征在于：所述缓冲液由以下重量比的原材料配置而成：
醋酸镁 0.2；
三（羟甲基）氨基甲烷 1...
【专利技术属性】
技术研发人员：施戈韬，
申请(专利权)人：绍兴康知生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33
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