一种刺桐组织培养的快速繁殖方法技术

本发明专利技术研究了一种刺桐组织培养的快速繁殖方法，包括茎段的消毒、腋芽的诱导、丛生芽的增殖、生根诱导、炼苗移栽等步骤。本发明专利技术可以控制条件，不受季节限制，全年连续生产，生长繁殖率高，并且保持原有的优良性状不变，可以实现刺桐优良无性系或单株迅速推广。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术研究了，包括茎段的消毒、腋芽的诱导、丛生芽的增殖、生根诱导、炼苗移栽等步骤。本专利技术可以控制条件，不受季节限制，全年连续生产，生长繁殖率高，并且保持原有的优良性状不变，可以实现刺桐优良无性系或单株迅速推广。【专利说明】
本专利技术涉及刺桐的组织培养，属于生物
。
技术介绍
刺桐，variegata Linn.,又称海桐、山芙蓉、空桐树、木本象牙红,豆科，落叶乔木，高约20m，干皮灰色，具圆锥形皮刺；三出复叶互生，小叶菱形或菱状卵形；总状花序，花萼佛焰状暗红色，花蝶形，鲜红色，花期3月；荚果呈念珠状，种子红色。此花原产印度及马来西亚等地，性强健，萌发力强，生长快，开花时新梢可长达1.5米，花序长达50厘米，喜温暖湿润、光照充足的环境，耐旱也耐湿，对土壤要求不严，喜肥沃排水良好的砂壤土，不甚耐寒，见于树旁或近海溪边。树皮含生物碱下箴刺桐碱、刺桐灵、甜菜碱、胆碱，树皮或根皮入药，称海桐皮，祛风湿，舒筋通络，治风湿麻木，腰腿筋骨疼痛，跌打损伤，对横纹肌有松弛作用，对中枢神经有镇静作用。目前常用的繁殖方法为扦插，扦插成活率偏低。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是刺桐组织培养的方法，本专利技术可以控制条件，不受季节限制，全年连续生产，生长繁殖率高，并且保持原有的优良性状不变，可以实现优良无性系或单株迅速推广。 为解决上述技术问题，本专利技术采用下列技术方案:切取3cm的刺桐带芽茎段放入500ml磨口广口瓶中，包上纱布，流水冲洗30min，在超净工作台上先用50%的Bleach水溶液消毒4min,之后迅速用无菌水洗漆3次，再用0.2%的升汞溶液灭菌12min，最后用无菌水洗涤5次，消毒处理过的刺桐带芽茎段接种到l/2Miller+0.lmg/L2，4，5-D+0.lmg/LIAA+l_2mg/L 谷胱甘肽 +15_20mg/L 夹竹桃霉素的培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖25g/L，琼脂9g/L，培养温度26°C，光照强度20001x，光照时间llh/d，pH5.8，培养基采用121°C、1.1kp进行高压灭菌15min，诱导出来的腋芽接入Miller+0.5mg/LZT+0.lmg/LNAA+IAA0.lmg/L培养基中进行丛生芽的增殖，培养出来的丛生芽接入培养基为l/2Miller+lmg/LIBA+0.5mg/LIAA进行生根诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂8g/L,培养温度28°C，光照强度70001x，光照时间15h/d，pH5.8，培养基采用121°C、1.1kp进行高压灭菌15min，培养条件均采用人工光照，封闭式，试管苗长至4cm，根数为3，揭开封口膜，在培养室内放置7d，然后取出单苗洗净根上附带的培养基，把根浸入800-1000倍的多菌灵溶液消毒3min，栽植于草炭:珍珠岩=1:1的基质里，栽植后1d内用塑料薄膜保湿，以1/4MS营养液进行叶面喷洒。 采用本专利技术制备的刺桐成活率高，操作简单无污染，利于大规模种植。 下面将结合【具体实施方式】对本专利技术作进一步阐述，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施方式。 【具体实施方式】 实施例1切取3cm的刺桐带芽茎段放入500ml磨口广口瓶中，包上纱布，流水冲洗30min，在超净工作台上先用50%的Bleach水溶液消毒4min,之后迅速用无菌水洗漆3次，再用0.2%的升汞溶液灭菌12min，最后用无菌水洗涤5次，消毒处理过的刺桐带芽茎段接种到 l/2Miller+0.lmg/L2，4，5-D+0.lmg/LIAA+lmg/L 谷胱甘肽+15mg/L 夹竹桃霉素的培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖25g/L，琼脂9g/L，培养温度26°C，光照强度20001x，光照时间llh/d，pH5.8，培养基采用121°C、1.1kp进行高压灭菌15min，诱导出来的腋芽接入Miller+0.5mg/LZT+0.lmg/LNAA+IAA0.lmg/L培养基中进行丛生芽的增殖，培养出来的丛生芽接入培养基为l/2Miller+lmg/LIBA+0.5mg/LIAA进行生根诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂8g/L,培养温度28°C，光照强度70001x，光照时间15h/d，pH5.8，培养基采用121 °C、1.1kp进行高压灭菌15min，培养条件均采用人工光照，封闭式，试管苗长至4cm，根数为3，揭开封口膜，在培养室内放置7d，然后取出单苗洗净根上附带的培养基，把根浸入800倍的多菌灵溶液消毒3min，栽植于草炭:珍珠岩=1:1的基质里，栽植后1d内用塑料薄膜保湿，以1/4MS营养液进行叶面喷洒，成活率88%。 实施例2切取3cm的刺桐带芽茎段放入500ml磨口广口瓶中，包上纱布，流水冲洗30min，在超净工作台上先用50%的Bleach水溶液消毒4min,之后迅速用无菌水洗漆3次，再用0.2%的升汞溶液灭菌12min，最后用无菌水洗涤5次，消毒处理过的刺桐带芽茎段接种到 l/2Miller+0.lmg/L2,4, 5-D+0.lmg/LIAA+2mg/L 谷胱甘肽+20mg/L 夹竹桃霉素的培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖25g/L，琼脂9g/L，培养温度26°C，光照强度20001x，光照时间llh/d，pH5.8，培养基采用121°C、1.1kp进行高压灭菌15min，诱导出来的腋芽接入Miller+0.5mg/LZT+0.lmg/LNAA+IAA0.lmg/L培养基中进行丛生芽的增殖，培养出来的丛生芽接入培养基为l/2Miller+lmg/LIBA+0.5mg/LIAA进行生根诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂8g/L，培养温度28°C，光照强度70001x，光照时间15h/d，pH5.8，培养基采用121°C、1.1kp进行高压灭菌15min，培养条件均采用人工光照，封闭式，试管苗长至4cm，根数为3，揭开封口膜，在培养室内放置7d，然后取出单苗洗净根上附带的培养基，把根浸入1000倍的多菌灵溶液消毒3min，栽植于草炭:珍珠岩=1:1的基质里，栽植后1d内用塑料薄膜保湿，以1/4MS营养液进行叶面喷洒，成活率92%。 实施例3切取3cm的刺桐带芽茎段放入500ml磨口广口瓶中，包上纱布，流水冲洗30min，在超净工作台上先用50%的Bleach水溶液消毒4min,之后迅速用无菌水洗漆3次，再用0.2%的升汞溶液灭菌12min，最后用无菌水洗涤5次，消毒处理过的刺桐带芽茎段接种到 l/2Miller+0.lmg/L2,4, 5-D+0.lmg/LIAA+2mg/L 谷胱甘肽+20mg/L 夹竹桃霉素的培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖25g/L，琼脂9g/L，培养温度26°C，光照强度20001x，光照时间llh/d，pH5.8，培养基采用121°C、1.1kp进行高压灭菌15min，诱导出来的腋芽接入Miller+0.5mg/LZT+0.lmg/LNAA+IAA0.lmg/L培养基中进行丛生芽的增殖，培养出来的丛生芽接入培养基为l/2Miller+lmg/LIBA+0.5mg/LIAA进行生根诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂8g/L,培养温度28°C，光照强度70001x，光照时间15h本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种刺桐组织培养的快速繁殖方法，包括茎段的消毒、腋芽的诱导、丛生芽的增殖、生根诱导、炼苗移栽，其主要步骤如下：（1）取刺桐的带芽茎段，进行消毒处理；（2）将步骤（1）消毒处理过的刺桐带芽茎段接种到1/2Miller+0.1mg/L2，4，5‑D+0.1mg/LIAA+1‑2mg/L谷胱甘肽的培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖25g/L，琼脂9g/L，培养温度26℃，光照强度2000lx，光照时间11h/d，pH5.8，培养基采用121℃、1.1kp进行高压灭菌15min；（3）取步骤（2）诱导出来的腋芽接入Miller+0.5mg/LZT+0.1mg/LNAA+IAA0.1mg/L培养基中进行丛生芽的增殖，培养条件同上；（4）将步骤（3）培养出来的丛生芽接入培养基为1/2Miller+1mg/LIBA+0.5mg/LIAA进行生根诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂8g/L，培养温度28℃，光照强度7000lx，光照时间15h/d，pH5.8，培养基采用121℃、1.1kp进行高压灭菌15min；（5）将步骤（4）生根后的无菌苗进行野外炼苗移栽。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘东锋，杨成东，
申请(专利权)人：南京帝道农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32