一种Rink酰胺树脂的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种Rink酰胺树脂的制备方法，其包括以下步骤：采用聚苯乙烯微球种子溶胀带双键的Fmoc-酰胺单体、苯乙烯与二乙烯基苯，以过氧化苯甲酰为引发剂，聚乙烯醇为稳定剂，十二烷基硫酸钠为乳化剂，制备得到Rink酰胺树脂微球。采用上述方案，本发明专利技术基于“种子法”一步制备，得到均一、单分散Rink酰胺树脂，方法简单，转化率高，载量可控，成本低廉，同时使用Fmoc-NH2少，生产成本低。具有很高的市场应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及固相合成树脂，尤其涉及的是，一种Rink酰胺树脂的制备方法。
技术介绍
Rink Amide Resin，即Rink酰胺树脂，是一种固相合成树脂，广泛用于固相肽的合成中；该树脂详情可参考http://www.rinkamideresin.com/；其连接到氨甲基树脂或者甲基二苯甲基胺树脂后可以得到Rink Amide AM树脂、Rink Amide MBHA树脂。Rink(音译为林克)酰胺树脂应用广泛，下面给出两个应用的例子。例如，中国专利200510025924.8公开了一种固相多肽合成特利加压素的制备方法，包括如下步骤：以Rink Amide树脂(包括Rink Amide MBHA树脂、Rink Amide AM树脂)为起始原料，以Fmoc保护的氨基酸为单体，以TBTU或HBTU/HOBt为缩合剂，依次逐个接上氨基酸，最后一个肽链采用Boc-Gly-OH；然后加入切肽试剂进行切肽，加入乙醚沉淀，获得还原型粗品，加入碱性物质，在pH为7.5-10.0的条件下通空气氧化，获得氧化型粗品，最后采用C18(或C8)柱进行分离纯化，获得目标产物。该专利技术的方法，生产成本低，工艺简单，环境污染低，收率高，便于工业化实施。又如，中国专利200910189087.0公开了一种制备伐普肽的方法，包括以下步骤：1、由Fmoc-Trp(Boc)-OH和Rink Amide树脂出发，得到Fmoc-Trp(Boc)-RinkAmide树脂；2、将Fmoc-Trp(Boc)-Rink Amide树脂采用固相合成法按肽序偶联得到线性伐普肽-Rink Amide树脂；3、采用固相氧化伐普肽-Rink Amide树脂；4、裂解伐普肽-Rink Amide树脂，纯化、冻干得到伐普肽。该专利技术采用了在固相中碘氧化线性伐普肽树脂，避免了传统的液相氧化带来操作上的麻烦，并提高10％-20％的氧化收率。本专利技术工艺具有反应操作简单、原料投入少、成本低、收率较高等特点，反应的总产出率可达68％，粗肽纯度85％，具有可观的经济实用价值。由此可见，Rink酰胺树脂具有广泛的应用价值。但是，这些专利方法，仅仅是利用Rink酰胺树脂，不涉及Rink酰胺树脂的合成方法。Rink酰胺树脂的合成方法是Hans Rink在1987年tetrahedron Letters上报道的多步后修饰法，此方法路线长，每步转化率低，从而导致树脂上功能团类型多、载量低；同时，此方法大量使用Fmoc-NH2(芴甲氧羰酰胺)作为原料，生产成本高。因此，现有技术需要改进。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种新的Rink酰胺树脂的制备方法。本专利技术的技术方案如下：一种Rink酰胺树脂的制备方法，其包括以下步骤：采用聚苯乙烯微球种子溶胀带双键的Fmoc-酰胺单体、苯乙烯与二乙烯基苯，以过氧化苯甲酰为引发剂，聚乙烯醇为稳定剂，十二烷基硫酸钠为乳化剂，制备得到Rink酰胺树脂微球。优选的，制备得到Rink酰胺树脂微球之后，对所述微球进行清洗，然后烘干。优选的，带双键的Fmoc-酰胺单体为(2,4-二甲氧基苯基)-(4’(4’乙烯基苄氧基)苯基)-(芴基氧羰酰氨基)甲烷。优选的，2,4-二甲氧基-4’(4’乙烯基苄氧基)二苯甲醇加入芴基氧羰酰胺，再加入苯磺酸，置于60℃－65℃油浴中反应，得到(2,4-二甲氧基苯基)-(4’(4’乙烯基苄氧基)苯基)-(芴基氧羰酰氨基)甲烷。优选的，2,4-二甲氧基-4’(4’乙烯基苄氧基)二苯甲酮加入甲醇溶解，缓慢加入硼氢化钠后，反应得到2,4-二甲氧基-4’(4’乙烯基苄氧基)二苯甲醇。优选的，2,4-二甲氧基-4’-羟基二苯甲酮与对乙烯基苄氯混和后加入碳酸钾与四氢呋喃，在50℃下反应得到2,4-二甲氧基-4’(4’乙烯基苄氧基)二苯甲酮。优选的，对羟基苯甲酸与间苯二甲醚混和后加入三氯化铝与三氯氧磷，反应后将产物倒入冰水中，搅拌至放热结束；再用氢氧化钠溶液调pH值至6.0，加入乙酸乙酯萃取，然后对乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥，50℃减压旋转蒸发至残留液体，停止旋蒸，静置，得到2,4-二甲氧基-4’-羟基二苯甲酮。优选的，所述聚苯乙烯微球种子为粒径均一的25μm聚苯乙烯微球。优选的，所述制备方法包括以下步骤：配制聚苯乙烯高分子微球反应体系的水相溶液，其中含聚乙烯醇10g/L、含十二烷基硫酸钠2.5g/L；取部分所述水相溶液，将单分散的25μm粒径均一的聚苯乙烯微球悬浮分散于水相溶液中，其中含聚苯乙烯微球2.5g/L，得到聚苯乙烯种子微球悬浮分散溶液；将过氧化苯甲酰溶于含有苯乙烯单体，(2,4-二甲氧基苯基)-(4’(4’乙烯基苄氧基)苯基)-(芴基氧羰酰氨基)甲烷，以及二乙烯基苯的混和液中，得到油性溶液，其中，过氧化苯甲酰的质量百分比为0.9％至1.1％；另取部分所述水相溶液，将所述油性溶液加入到水相溶液中，得到油水两相分层的混合体系，超声混匀制成乳浊液，其中，分散的油性小液滴直径小于1μm；将聚苯乙烯种子微球悬浮分散溶液加入到所述乳浊液，置于20℃至45℃油浴，在机械搅拌作用下溶胀15至30小时后，升温到66℃至82℃并保持机械搅拌进行聚合反应20至32小时，用十二烷基硫酸钠水溶液重力沉降分级，去除小粒径的聚苯乙烯微球，得到粒径均一的Rink酰胺树脂微球。优选的，过氧化苯甲酰与所述混和液的质量百分比为0.98％至0.99％:1；油水两相分层的混合体系中，油水两相的体积比为1:(1.8至4.2)；所述油浴的温度是30℃；所述机械搅拌转速为150rpm，在机械搅拌作用下溶胀时间为18小时，升温到75℃并保持机械搅拌进行聚合反应24小时，得到的产物用2.5g/L的十二烷基硫酸钠水溶液500mL重力沉降分级3次，去除微小粒径的少量聚苯乙烯微球，得到粒径均一的Rink酰胺树脂微球。采用上述方案，本专利技术方法简单，转化率高，载量可控，成本低廉，同时使用Fmoc-NH2少，生产成本低。具有很高的市场应用价值。附图说明图1为本专利技术的一个实施例的反应示意图；图2为本专利技术的一个实施例的单体制备反应示意图；图3为本专利技术的一个实施例的Rink酰胺树脂制备反应示意图；图4为本专利技术的一个实施例制得的Rink酰胺树脂显微镜照片。具体实施方式为了便于理解本专利技术，下面结合附图和具体实施例，对本专利技术进行更详细的说明。需要说明的是，当元件被表述“固定于”另一个本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种Rink酰胺树脂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：采用聚苯乙烯微球种子溶胀带双键的Fmoc‑酰胺单体、苯乙烯与二乙烯基苯，以过氧化苯甲酰为引发剂，聚乙烯醇为稳定剂，十二烷基硫酸钠为乳化剂，制备得到Rink酰胺树脂微球。

【技术特征摘要】
1.一种Rink酰胺树脂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
采用聚苯乙烯微球种子溶胀带双键的Fmoc-酰胺单体、苯乙烯与二乙烯
基苯，以过氧化苯甲酰为引发剂，聚乙烯醇为稳定剂，十二烷基硫酸钠为
乳化剂，制备得到Rink酰胺树脂微球。
2.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，制备得到Rink酰
胺树脂微球之后，对所述微球进行清洗，然后烘干。
3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，带双键的Fmoc-酰
胺单体为(2,4-二甲氧基苯基)-(4’(4’乙烯基苄氧基)苯基)-(芴基氧
羰酰氨基)甲烷。
4.根据权利要求3所述制备方法，其特征在于，2,4-二甲氧基-4’(4’
乙烯基苄氧基)二苯甲醇加入芴基氧羰酰胺，再加入苯磺酸，置于60℃－
65℃油浴中反应，得到(2,4-二甲氧基苯基)-(4’(4’乙烯基苄氧基)苯基)
-(芴基氧羰酰氨基)甲烷。
5.根据权利要求4所述制备方法，其特征在于，2,4-二甲氧基-4’(4’
乙烯基苄氧基)二苯甲酮加入甲醇溶解，缓慢加入硼氢化钠后，反应得到
2,4-二甲氧基-4’(4’乙烯基苄氧基)二苯甲醇。
6.根据权利要求5所述制备方法，其特征在于，2,4-二甲氧基-4’-
羟基二苯甲酮与对乙烯基苄氯混和后加入碳酸钾与四氢呋喃，在50℃下反
应得到2,4-二甲氧基-4’(4’乙烯基苄氧基)二苯甲酮。
7.根据权利要求6所述制备方法，其特征在于，对羟基苯甲酸与间
苯二甲醚混和后加入三氯化铝与三氯氧磷，反应后将产物倒入冰水中，搅

\t拌至放热结束；再用氢氧化钠溶液调pH值至6.0，加入乙酸乙酯萃取，然
后对乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥，50℃减压旋转蒸发至残留液体，停止
旋蒸，静置，得到2,4-二甲氧基-4’-羟基二苯甲酮。
8.根据权利要求7所述制备方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：任连兵，王勇，陈继伟，黎秋萍，刘宏红，
申请(专利权)人：深圳微球科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44