【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】产生用于纳米孔传感器的双层的方法交叉引用本申请要求2012年2月16日提交的美国临时专利申请号61/599,871及2012年2月17日提交的美国临时专利申请号61/600,398的权益,这些临时申请各自通过引用整体并入本文。专利技术背景核酸测序是一个可用于提供核酸样品的序列信息的过程。这样的序列信息在对受试者进行诊断和/或治疗中可能是有帮助的。例如,受试者的核酸序列可用于鉴别、诊断遗传疾病,并且可能开发针对该遗传疾病的治疗。作为另一个例子,对病原体的研究可导致针对接触性传染病的治疗。分子检测(例如,对蛋白质的检测)在对受试者进行诊断和/或治疗中同样可能是有帮助的。有可获得的方法可用于对核酸进行测序和/或对分子进行检测。然而,这样的方法是昂贵的,而且可能无法在一个时间段内精确地提供对诊断和/或治疗受试者而言可能是必要的序列信息。
技术实现思路
纳米孔可用于对包括核酸分子在内的聚合物进行测序,和/或检测诸如蛋白质等分子。聚合物的例子包括脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。本文认识到对改进的核酸分子鉴别、核酸测序及分子检测的方法的需求。本文所描述的是用于形成脂双层(本文中也称为“双层”)并将纳米孔插入靠近传感器的双层中的方法。在一些情况下,聚合物(例如,核酸)穿过纳米孔,而该聚合物的各种亚单位(例如,核酸的腺嘌呤(A)、胞嘧啶(C)、鸟嘌呤(G)、胸腺嘧啶(T)和/或尿嘧啶(U)碱基)可影响流过纳米孔的电流。如本文所述,可通过在跨纳米孔和/或跨膜施加的多个电压下测量电流来鉴别各种亚单位。在一个方面,形成用于纳米孔传感器的膜(例如,脂双层)的方法包括(a)将缓 ...
【技术保护点】
一种形成用于纳米孔传感器的脂双层的方法,其包括:(a)将缓冲溶液引入流动通道中,该流动通道包含其上具有材料层的电极,其中所述缓冲溶液是导电的,并且其中所述材料层包含一种或多种脂质;(b)使所述缓冲溶液与所述材料层接触;(c)测量通过所述电极的电流,以确定所述材料层的至少一部分是否已形成邻近所述电极的脂双层;以及(d)基于(c)的确定,向所述电极施加刺激,以诱导所述材料层的至少一部分形成邻近所述电极的所述脂双层。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.02.16 US 61/599,871;2012.02.17 US 61/600,3981.一种形成用于纳米孔传感器的脂双层的方法,其包括:(a)将导电的缓冲溶液引入至少一个流动通道中,该至少一个流动通道包含电极,该电极具有在其上干燥的脂材料层,其中所述脂材料层包含一种或多种脂质,并且能够形成脂双层;(a1)引导气泡通过所述至少一个流动通道并且使所述气泡与所述脂材料层接触,以使得所述脂材料层变光滑和/或变薄;(a2)使孔蛋白质溶液邻近所述脂材料层流动,以将所述孔蛋白质沉积于所述脂材料层中,并在所述至少一个流动通道中用另一种气泡使所述脂材料层变薄;(b)使所述缓冲溶液与所述脂材料层接触以促进脂双层在所述电极的顶部形成,所述孔蛋白质溶液和所述缓冲溶液被所述另一种气泡隔开;(c)测量通过所述电极的电流,以确定所述脂材料层的至少一部分是否已形成邻近所述电极的所述脂双层;(d)基于(c)的确定,向所述电极施加刺激,以诱导所述脂材料层的至少一部分形成邻近所述电极的所述脂双层;以及(e)通过所述电极施加电刺激,以便于所述孔蛋白质在所述脂双层中的插入。2.如权利要求1所述的方法,其中,在(c)中,向所述电极施加一个或多个电压。3.如权利要求2所述的方法,其中所述电压被选择为断裂或破坏所述电极上的双层。4.如权利要求1所述的方法,其中所述刺激包括以下中的至少一个:在电极表面上流过的液体流、在电极表面上流过的一种或多种不同液体的连续流、在电极表面上流过的一个或多个气泡的流、电脉冲、超声脉冲、压力脉冲或声脉冲。5.如权利要求1所述的方法,其中所述脂材料层包含一个或多个孔蛋白和一种或多种表面活性剂,该表面活性剂的浓度低于该表面活性剂的临界胶束浓度。6.如权利要求1所述的方法,其中所述至少一个流动通道包括多个电极。7.如权利要求6所述的方法,其中所述刺激同时施加于所述多个电极。8.如权利要求1所述的方法,其中所述脂材料层包含至少两种类型的脂质。9.如权利要求1所述的方法,其中所述脂双层和所述孔蛋白质共同表现出约1GΩ或更小的电阻。10.如权利要求1所述的方法,其中当没有孔蛋白插入在所述脂双层中时,所述脂双层表现出大于约1GΩ的电阻。11.如权利要求1所述的方法,其中所述缓冲溶液的压力被选择为使得所述脂材料层在没有所述刺激的情况下形成所述脂双层。12.如权利要求1所述的方法,其还包括,在(a)之前,生成邻近所述电极的所述脂材料层。13.如权利要求12所述的方法,其中所述生成包括:引导包含所述一种或多种脂质的脂质溶液通过所述至少一个流动通道;和将所述脂材料层沉积在所述电极上。14.如权利要求13所述的方法,其中所述脂质溶液包含有机溶剂。15.如权利要求14所述的方法,其中所述有机溶剂包含癸烷。16.如权利要求1所述的方法,其中所述缓冲溶液包含离子溶液。17.如权利要求16所述的方法,其中所述离子溶液包含氯阴离子。18.如权利要求17所述的方法,其中所述离子溶液包含醋酸钠。19.如权利要求1所述的方法,其中所述气泡是蒸汽泡。20.如权利要求1所述的方法,其中所述一种或多种脂质选自由二植酰磷脂酰胆碱(DPhPC)、棕榈酰油酰磷脂酰胆碱(POPC)、二油酰磷脂酰甲酯(DOPME)、...
【专利技术属性】
技术研发人员:兰德尔·戴维斯,R·陈,
申请(专利权)人:吉尼亚科技公司,
类型:发明
国别省市:美国;US
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