本发明专利技术公开了一种人胸腺瘤细胞系及其用途，属于肿瘤生物学领域，人胸腺瘤细胞系,命名为Thy0517，在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为CGMCC No.9328。本发明专利技术的一种人胸腺瘤细胞系Thy0517主要优势在于：与原发肿瘤组织有着相似的蛋白表达，同时也具有染色体异常核型，具有体外成瘤能力的肿瘤细胞特性。可在体外连续传代培养而保持胸腺瘤肿瘤细胞特性不变，适合作为研发胸腺瘤相关药物的细胞材料。本发明专利技术的细胞系表达EGFR阳性，EGFR阳性表达可促进肿瘤细胞的增殖、血管生成、粘附、侵袭和转移，此细胞系可以用来作为一个研究以EGFR作为靶标的靶向药物研究的有力的工具细胞。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及，属于肿瘤生物学领域，尤其是涉及一 种人胸腺瘤细胞系Thy0517及其用途。
技术介绍
胸腺是免疫系统的中枢器官，是T细胞发育、分化和成熟的场所，其功能是将部分 淋巴细胞分化成T淋巴细胞。胸腺和人体其他器官一样，可发生良性或恶性肿瘤。胸腺瘤 是前纵膈最常见的肿瘤，占成人前纵膈肿瘤的30%，是起源于胸腺上皮或显示向胸腺上皮 细胞分化的肿瘤（不论非肿瘤性淋巴细胞是否存在）。胸腺瘤在中国发病率较高，好发于 55-56岁年龄组。虽然胸腺瘤患者死亡率低，但胸腺瘤患者第二种癌的发生率增加。在临床 特征上，胸腺瘤常伴有重症肌无力、纯红再障、系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病。胸腺瘤 患者中约有1/4患者伴发重症肌无力。胸腺瘤的形成引起胸腺微环境的改变，有可能是胸 腺瘤合并重症肌无力的原因，胸腺瘤伴重症肌无力病情通常比单纯重症肌无力严重，需要 依赖免疫抑制剂治疗。胸腺瘤病因尚不清楚，有研究报道EB病毒在胸腺瘤发病中起着一定 作用。 为了研究肿瘤的生物学特性，评价体外模型的适应性，肿瘤细胞系已经成为一种 重要的研究工具。近几十年来，大量的人肿瘤细胞系被分离并用于长期培养，这些细胞系为 肿瘤的分子水平研究提供了重要的模型。但由于胸腺瘤组织的特殊性、有效可用的胸腺瘤 标本的缺乏以及建立连续性细胞培养的技术困难，致使科研人员长久以来一直无法获取胸 腺瘤细胞系，极大地限制了胸腺瘤细胞学水平的研究。 由于缺乏胸腺瘤体外研究模型，尤其是缺乏胸腺瘤细胞系，所以导致胸腺瘤的体 外功能检测只能受限于有限的短期原代培养。针对这些有限的短期原代培养物，研究人员 分析了胸腺瘤的微卫星不稳定状态。一些学者从分子机理水平开展了一项针对胸腺瘤的靶 向治疗策略的评价，免疫组织化学显示表皮生长因子受体（EGFR)在胸腺瘤中表达增高，在 一些病人中EGFR靶向治疗是有效的。也有学者将EGFR抑制剂用于胸腺瘤的治疗，而且还 有学者发现环氧合酶-2 (C0X-2)或KIT基因可能会成为胸腺瘤二线化疗的靶点。这些初步 研究表明，部分靶向药物对胸腺瘤治疗有效，但是由于缺乏体外胸腺瘤细胞系的功能检测， 很多新的靶向治疗能用于其他肿瘤，但在胸腺瘤中还未进行。因此，为了更好地在体外对胸 腺瘤的分子信号传导通路进行研究，需要建立可长期反复使用的胸腺瘤细胞系。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种能够在体外长期传代培养的、性质稳定的一种人胸腺瘤 细胞系。 本专利技术的第二个目的是提供一种人胸腺瘤细胞系制备胸腺瘤诊断试剂的用途。 本专利技术的第三个目的是提供一种人胸腺瘤细胞系制备胸腺瘤动物模型的用途。 本专利技术的第四个目的是提供一种人胸腺瘤细胞系作为药物靶点用于开发抑制胸 腺瘤药物的用途。 本专利技术的第五个目的是提供一种人胸腺瘤细胞系用于胸腺瘤的体外研究的用途。 本专利技术的技术方案概述如下： 一种人胸腺瘤细胞系，命名为Thy0517,在中国微生物菌种保藏管理委员会普通 微生物中心的保藏号为CGMCC No. 9328。 一种人胸腺瘤细胞系Thy0517制备胸腺瘤诊断试剂的用途。 一种人胸腺瘤细胞系Thy0517制备胸腺瘤动物模型的用途。 一种人胸腺瘤细胞系Thy0517作为药物靶点用于开发抑制胸腺瘤药物的用途。 一种人胸腺瘤细胞系Thy0517用于胸腺瘤的体外研究的用途。 本专利技术的一种人胸腺瘤细胞系Thy0517主要优势在于： (1)本专利技术细胞系与原发肿瘤组织有着相似的蛋白表达，同时也具有染色体异常 核型，具有体外成瘤能力的肿瘤细胞特性。 (2)本专利技术的细胞系可在体外连续传代培养而保持胸腺瘤肿瘤细胞特性不变，适 合作为研发胸腺瘤相关药物的细胞材料。 (3)本专利技术的细胞系EGFR表达阳性，EGFR阳性表达可促进肿瘤细胞的增殖、血管 生成、粘附、侵袭和转移，此细胞系可以用来作为一个研究以EGFR作为靶标的靶向药物研 究的有力的工具细胞。 本专利技术的一种人胸腺瘤细胞系，命名为Thy0517,已于2014年6月25日保藏在中 国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC)，其保藏编号为CGMCC No. 9328,建 议的分类名为：胸腺瘤细胞系。并已存活。保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号， 中国科学院微生物研究所，邮政编码100101。 【附图说明】 图1为本专利技术一种人胸腺瘤细胞系Thy0517 (CGMCC No. 9328)倒置光学显微镜下 生长的细胞图像（200倍）。 图2为本专利技术一种人胸腺瘤细胞系Thy0517 (CGMCC No. 9328)的细胞生长曲线。 图3为本专利技术一种人胸腺瘤细胞系Thy0517 (CGMCC No. 9328)的染色体的一种影 像图。 图4为本专利技术一种人胸腺瘤细胞系Thy0517 (CGMCC No. 9328)种植在BALB/C免疫 缺陷裸鼠腋部皮下移植瘤组织的形态图（HE染色，200倍）。 【具体实施方式】 以下通过附图和具体实施例详细说明本专利技术技术方案，以下实施例仅用以说明本 专利技术的技术方案而并不以此限定本专利技术的实施范围。 实施例1人胸腺瘤细胞系的建立 本专利技术人胸腺瘤细胞系Thy0517是一株中国北方人AB型胸腺瘤的细胞系，来源于 一位50岁男性胸腺瘤合并重症肌无力患者的胸腺瘤组织。患者在接受手术前未接受任何 化疗、放疗等治疗。人胸腺瘤细胞系Thy0517,是从病理类型为AB型胸腺瘤的胸腺瘤病人胸 腺瘤组织切除物中培养所得。 具体步骤为： (1)组织块机械分离：将手术切除的胸腺瘤组织以无菌剪刀和手术刀迅速分离到 0. 5立方厘米大小，用含100U/ml青霉素、100ug/ml链霉素的PBS缓冲液浸泡低温移至生物 安全柜,再用含l〇〇U/ml青霉素、100ug/ml链霉素的PBS缓冲液反复清洗组织，再浸泡于含 10(^/1111青霉素、1001^/1111链霉素、10%胎牛血清的高糖01^1培养基中，用无菌剪刀轻柔分 离，尽量去除包膜和结缔组织，得到胸腺瘤实质组织； (2)组织块接种：使用无菌剪刀把步骤（1)所得的组织剪成1立方毫米的组织块， 用含100U/ml青霉素、100ug/ml链霉素的PBS缓冲液清洗组织块。让组织块沉淀，去除上清 液，在含l〇〇U/ml青霉素、100ug/ml链霉素、10%胎牛血清的高糖DMEM培养基中悬浮组织 块，用无菌眼科镊子轻柔夹取肿瘤组织，送入25平方厘米细胞培养瓶中，用弯头吸管将组 织块在瓶底上均匀摊开，每小块间隔5mm左右，共铺入20块，铺完组织块后，置37°C，5% C02 培养箱中培养24小时至组织块贴附，再缓慢向培养瓶中加5ml含100U/ml青霉素、lOOug/ ml链霉素、10%胎牛血清的高糖DMEM培养基继续培养，得到组织块游出细胞，继续培养，直 至细胞融合度达80%以上； (3)对步骤（2)所得的游出细胞进行纯化，去除成纤维细胞等杂质细胞，纯化后 的胸腺瘤细胞在含l〇〇U/ml青霉素、100ug/ml链霉素、10%胎牛血清的高糖01^1培养基 中培养，培养温度为37°C，气体环境为5% C02,95%空气，湿度为饱和本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种人胸腺瘤细胞系,其特征在于，命名为Thy0517，在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为CGMCC No.9328。
【技术特征摘要】
1. 一种人胸腺瘤细胞系，其特征在于，命名为Thy0517,在中国微生物菌种保藏管理委 员会普通微生物中心的保藏号为CGMCC No. 9328。2. 权利要求1所述的一种人胸腺瘤细胞系制备胸腺瘤诊断试剂的用途。3...
【专利技术属性】
技术研发人员：张鹏，王元国，
申请(专利权)人：张鹏，
类型：发明
国别省市：天津;12
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