人工构建的杂种泛素结合结构域多肽及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种人工构建的杂种泛素结合结构域多肽及其应用。本发明专利技术所提供的杂种泛素结合结构域多肽，由至少两个泛素结合结构域串联而成；且在组成所述杂种泛素结合结构域多肽的所有泛素结合结构域中，至少有两个泛素结合结构域是不同的。另外，所述杂种泛素结合结构域多肽还可含有标签蛋白。实验证明，本发明专利技术提供的杂种泛素结合结构域多肽能够高效、无偏性的结合泛素分子及其携带的不同的泛素链，可以提高大规模泛素化蛋白质的富集效率，用于开发高效的泛素化蛋白质分离介质和生化试剂，也可为体内蛋白质泛素化的调节提供技术手段。本发明专利技术对于推动人类疾病样本泛素化蛋白质组学研究和健康医学的发展具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
人工构建的杂种泛素结合结构域多肽及其应用
本专利技术属于生物
，涉及一种人工构建的杂种泛素结合结构域多肽及其应用，特别涉及一种人工构建的杂种泛素结合结构域多肽及其在蛋白质泛素化修饰研究中的应用。
技术介绍
泛素本身是含有76个氨基酸的小蛋白，因其在真核细胞内广泛存在而得名。泛素-蛋白酶体系统(Ubiquitin Proteasome Systerm, UPS)是已知的所有真核生物体内保守性好、选择性高、也是最为重要的细胞内蛋白质特异性降解途径。蛋白质泛素化作为细胞的中心调节信号已经参与了包括蛋白质降解、蛋白质聚类、DNA修复和细胞凋亡等几乎细胞正常生命活动的所有过程，并与许多疾病过程密切相关，因此蛋白质泛素化研究是生命科学研究的热点。 与泛素分子的保守性相似，蛋白质的泛素化也是一个高度保守的可逆过程。在细胞内，泛素经由泛素活化酶El，泛素铰链酶E2和泛素连接酶E3的接连式酶促反应，通过其C末端的甘氨酸的羧基将其共价铰链到被修饰的蛋白质底物的赖氨酸的氨基。与之对应的是，泛素单体也可从被修饰的蛋白质底物或自由的泛素链上解离下来，这个过程需要脱泛素化酶(本文档来自技高网...

【技术保护点】
杂种泛素结合结构域多肽1，由至少两个泛素结合结构域串联而成；且在组成所述杂种泛素结合结构域多肽1的所有泛素结合结构域中，至少有两个泛素结合结构域是不同的。

【技术特征摘要】
1.杂种泛素结合结构域多肽1，由至少两个泛素结合结构域串联而成；且在组成所述杂种泛素结合结构域多肽I的所有泛素结合结构域中，至少有两个泛素结合结构域是不同的。2.根据权利要求1所述的杂种泛素结合结构域多肽I，其特征在于:所述杂种泛素结合结构域多肽I为如下(a)或(b): (a)由至少两个互不相同的泛素结合结构域串联而成； (b)由至少两个相同的或彼此不同的杂种泛素结合结构域单元串联而成；所述杂种泛素结合结构域单元由至少两个互不相同的泛素结合结构域串联而成。3.根据权利要求1或2所述的杂种泛素结合结构域多肽I，其特征在于:所述泛素结合结构域选自如下:UBA结构域、ΠΜ结构域、PAZ结构域、MIU结构域、CUE结构域、GAT结构域、UBZ结构域、UBC结构域、UEV结构域、UBM结构域、NZF结构域、ZnF-UBP结构域、ZnF_A20结构域、GLUE结构域、JabI/MPN结构域和PFU结构域；或 所述杂种泛素结合结构域多肽I为如下(a)或(b)或(c)或(d): (a)由如下两个泛素结合结构域的氨基酸序列串联组成:来自于酵母的DSK2p蛋白的UBA结构域，以及来自于人类的RABGEF1蛋白的ZnF_A20结构域； (b)由η个相同 的杂种泛素结合结构域单元串联而成；所述杂种泛素结合结构域单元由如下两个泛素结合结构域串联而成:来自于酵母的DSK2p蛋白的UBA结构域，以及来自于人类的RABGEF1蛋白的ZnF-A20结构域； η为大于等于2的整数； (c)由如下两个泛素结合结构域的氨基酸序列串联组成:来自于酵母的DSK2p蛋白的UBA结构域，以及来自于人类的UBQLN2蛋白UBA结构域； (d)由η个相同的杂种泛素结合结构域单元串联而成；所述杂种泛素结合结构域单元由如下两个泛素结合结构域串联而成:来自于酵母的DSK2p蛋白的UBA结构域，以及来自于人类的UBQLN2蛋白UBA结构域； η为大于等于2的整数。4.根据权利要求3所述的杂种泛素结合结构域多肽I，其特征在于:所述来自于酵母的DSK2p蛋白的UBA结构域的氨基酸序列如序列表中序列I的第237-281位所示；和/或 所述来自于人类的RABGEF1蛋白的ZnF-A20结构域的氨基酸序列如序列表中序列I的第290-354位所示；和/或 所述来自于人类的UBQLN2蛋白UBA结构域的氨基酸序列如序列表中序列2的第301-350位所示。5.杂种泛素结合结构域多肽2，为在权利要求1-4中任一所述的杂种泛素结合结构域多肽I上连接标签蛋白后得到的多肽； 所述标签蛋白为能够进行亲和纯化的标签蛋白； 所述标签蛋白具体选自如下:谷胱甘肽-S-转移酶标签、His标签、Flag标签、HA标签、Myc标签、麦芽糖结合蛋...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐平，高媛，李衍常，赵明治，王京伟，常蕾，武军驻，贺福初，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11