一株内生真菌及其生物转化甘草酸为甘草次苷的方法技术

技术编号:10312132 阅读:281 留言:0更新日期:2014-08-13 14:56
本发明专利技术涉及一株内生真菌及其生物转化甘草酸为甘草次苷的方法,该菌命名为DX-SES3,鉴定为Microsphaeropsisarundinis,并已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCCM2014177。该菌能在甘草酸的诱导下产生β-葡萄糖醛酸苷酶,进而催化甘草酸生产GAMG;所产生的GAMG富聚在菌体的表面,75%的乙醇冲洗菌体,减压浓缩喷雾干燥后获得GAMG粗制品,HPLC检测纯度为89.4%。本发明专利技术采用生物转化方法,不仅甘草酸的转化率高,绿色环保无污染,而且GAMG富聚于菌体表面,产物分离纯化简单易行。

【技术实现步骤摘要】

    本专利技术涉及生物转化
及产物分离工艺,主要涉及一株能将甘草酸单一、定向的转化为甘草次苷(GAMG)的东乡野生稻内生真菌及GAMG分离纯化制备方法。 技术背景    甘草酸(GL)是甘草中的主要活性成分之一,是甘草中含量最高的三萜类化合物,结构如图1所示,是由五环三萜皂苷通过糖苷键连接两个葡萄糖醛酸构成的。现代药理学研究表明,甘草酸具有抗炎症、抗病毒、抗过敏、抗肿瘤等药理作用,还是一种高甜度、低热量的新型甜味剂,具有一定的应用价值。     甘草酸经β-葡萄糖醛酸苷酶水解去除其末端的一个葡萄糖醛酸基就生成GAMG(如图1),是甘草酸的一个重要的衍生物。甘草次苷又叫单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG),其应用价值远大于甘草酸。首先,在食品中应用方面,GAMC的甜度约为蔗糖甜度的941倍,是甘草酸甜度的5倍多,GAMG不仅有较强的持续性甜味,是一种高甜度、低热量的新型甜味剂,而且可有效减少因高热量甜味剂的摄入引发的肥胖、糖尿病、高血脂症、龋齿等疾病;其次,在药物方面的应用,GAMG和甘草酸具有相类本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株转化甘草酸为GAMG的内生真菌菌株,其特征在于:命名为DX‑SES3,分类为小球壳孢属菌Microsphaeropsi sarundinis,已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏时间为2014年5月3日,保藏号为CCTCC M 2014177。

【技术特征摘要】
1.一株转化甘草酸为GAMG的内生真菌菌株,其特征在于:命名为DX-SES3,分类为小球壳孢属菌Microsphaeropsi sarundinis,已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏时间为2014年5月3日,保藏号为CCTCC M 2014177。
2.一种内生真菌生物转化甘草酸为GAMG的方法,包括如下步骤:
1)内生真菌的活化及种子液的制备;
2)GAMG生物转化:将步骤1)的种子液按质量分数20-40%的接种量加入到转化培养基中,进行GAMG的生物转化;
3)GAMG的分离制备:生物转化后的GAMG富聚于内生真菌菌球的表面,布氏漏斗抽滤或六层纱布过滤,收集菌体,用体积比为20%~100%的乙醇溶液冲洗菌体3-5次,收集乙醇溶液,后减压浓缩,再喷雾干燥,获得纯度较大的GAMG成品,并用HPLC、LC-MS进行检测。
3.如权利要求2所述的内生真菌生物转化甘草酸为GAMG的方法,其特征在于所述的内生真菌DX-SES3(Microsphaeropsis arundinis)在PDA培养基中,28±1℃培养7 d,菌落的直径为28~30 mm质地绒状,中部凸起,同心轮纹状,菌落灰色,边缘色浅,无渗出液;菌落反面中央为黑褐色,其外围为棕褐色,再外围为淡黄色,培养时间菌落颜色变深为深灰色至褐色,但菌落不不变大;在CA培养基中,28±1℃培养6 d菌落直径为37~39 mm,菌落起初白色后逐渐变成灰白色且,中央凸起且现絮状,同心轮纹状,边缘整齐,背面白色,在光学显微镜下,菌丝有隔,可见蛹虫状的孢子囊结构。
4.如权利要求2所述的内生真菌生物转化甘草酸为GAMG的方法,其特征在于所述的内生真菌DX-SES3(Microsphaeropsis arundinis)菌株基因登录号为KC871028。
5.如权利要求2所述的内生真菌生物转化甘草酸为GAMG的方法,其特征在于所述的种子液培养制备为:将内生真菌DX-SES3(Microsphaeropsis arundinis...

【专利技术属性】
技术研发人员:张志斌高波良朱笃李平颜日明汪涯
申请(专利权)人:江西师范大学
类型:发明
国别省市:江西;36

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