一种罗丹明-量子点生物荧光探针及其制备方法技术

技术编号:10242573 阅读:140 留言:0更新日期:2014-07-23 15:32
本发明专利技术公开了一种罗丹明-量子点新型生物荧光探针及其制备方法。是由罗丹明水溶液和量子点水溶液组成;罗丹明水溶液摩尔浓度在5.5×10-6-7.5×10-5mol/L;所述的量子点水溶液的摩尔浓度在5.0×10-6-6.0×10-6mol/L;且罗丹明水溶液和量子点水溶液的体积比在(1-1.5):1之间。罗丹明水溶液选用罗丹明B或罗丹明6G。量子点水溶液选用CdTe量子点或CdSe量子点。在合适条件下,本发明专利技术罗丹明-量子点新型生物荧光探针的能量转移效率可以达到41.36%。并且本发明专利技术反应介质为去离子水,不使用有机溶剂,反应条件温和,后期处理简单,并且大大降低了运行成本。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种罗丹明-量子点新型生物荧光探针及其制备方法。是由罗丹明水溶液和量子点水溶液组成;罗丹明水溶液摩尔浓度在5.5×10-6-7.5×10-5mol/L;所述的量子点水溶液的摩尔浓度在5.0×10-6-6.0×10-6mol/L;且罗丹明水溶液和量子点水溶液的体积比在(1-1.5):1之间。罗丹明水溶液选用罗丹明B或罗丹明6G。量子点水溶液选用CdTe量子点或CdSe量子点。在合适条件下,本专利技术罗丹明-量子点新型生物荧光探针的能量转移效率可以达到41.36%。并且本专利技术反应介质为去离子水,不使用有机溶剂,反应条件温和,后期处理简单,并且大大降低了运行成本。【专利说明】一种罗丹明—量子点生物荧光探针及其制备方法
本专利技术属于生物荧光探针
,具体涉及一种罗丹明-量子点新型生物荧光探针及其制备方法。
技术介绍
荧光探针是在一定体系内,当一种物质或体系中某一物质性质发生变化时,荧光信号能发生相应改变的分子。荧光光谱由于其检测方便、灵敏度高等优点而展现出优越的性能。目前,人们研究较多的是单光子荧光探针。该类探针的激发波长在350_560nm,处于紫外-可见光区,光损伤和光漂白较大;并且样品在这个区域内存在光吸收和光散射,背景光会产生干扰,而且会影响检测深度。建立在双光子荧光显微探测技术基础上的新型双光子生物荧光探针在离子检测、分子识别、大分子标记及生物成像等领域具有不可比拟的优点,可有效避免单光子荧光探针的缺点。新型双光子生物荧光探针的激发波长在700_900nm范围内,避开了生命体系所不能承受的紫外光损伤以及细胞组织自发荧光的干扰;由于荧光激发只发生在聚焦点,消除了不必要的光漂白和光毒化,可实现在不伤害或杀死细胞下对金属离子进行长时间的观察;而且,双光子激发产生的荧光强度与入射光强度成二次方关系,这使得荧光发射集中在更小的空间区域,有效的提高了空间分辨率,解决了生物组织中深层物质的成像问题,因此双光子技术为生物成像提供了一个崭新的平台。而基于荧光共振能量转移特性的有机染料-量子点新型生物荧光探针还相对较少,开发能量转移效率较高的双光子荧光探针也显得尤为重要。
技术实现思路
本专利技术目的在于克服现有技术存在的缺点,提供一种罗丹明-量子点新型生物荧光探针及其制备方法,有利于解决单一荧光探针的缺点,能够在红外光下激发,荧光共振能量转移效率高,充分体现有机染料和量子点的双重性质。一种罗丹明-量子点新型生物荧光探针,由罗丹明水溶液和量子点水溶液组成;所述的罗丹明水溶液摩尔浓度在5.5X 10_6-7.5X 10_5mOl/L ;所述的量子点水溶液的摩尔浓度在5.0X 10_6-6.0X 10_6mol/L ;且罗丹明水溶液和量子点水溶液的体积比在(1-1.5):1 之间。按上述方案,所述的罗丹明水溶液选用罗丹明B或罗丹明6G。按上述方案,所述的量子点水溶液选用CdTe量子点或CdSe量子点。上述罗丹明-量子点新型生物荧光探针的制备方法,包括如下步骤:I)将罗丹明粉末溶于去离子水中,制得摩尔浓度为5.5X10_6-7.5X10_5mol/L的罗丹明溶液; 2)将固体量子点溶于去离子水中,制得摩尔浓度为5.0Χ10-6-6.0Xl(T6mol/L量子点溶液;3)将罗丹明溶液和量子点溶液按体积比(1-1.5):1充分混合,在20-27°C条件下超声波振荡10-15min,得到罗丹明-量子点生物荧光探针。按上述方案,所述的罗丹明水溶液选用罗丹明B或罗丹明6G。按上述方案,所述的量子点水溶液选用CdTe量子点或CdSe量子点。本专利技术的有益效果如下:1.本专利技术生物荧光探针的制备方法简单,将有机染料罗丹明容易的引入量子点。2.本专利技术所述的罗丹明-量子点新型生物荧光探针是双光子荧光探针,在激发波长为800nm、罗丹明浓度7.5X 10_5mol/L、激发光功率500mW条件下,所构成的罗丹明-量子点新型生物荧光探针的能量转移效率可以达到41.36%。 3.本专利技术反应介质为去离子水,不使用有机溶剂,反应条件温和,后期处理简单,并且大大降低了运行成本。【专利附图】【附图说明】图1为本专利技术生物荧光探针构建示意图。图2为罗丹明的吸 收谱和CdTe量子点的发射谱。图3为实施例1、3、5和对比例的荧光光谱。图4为800nm双光子激发下,实施例1_6所制备的罗丹明-量子点光敏剂和对比例的荧光衰减曲线。图5为摩尔浓度5.0X 10_6mol/L的CdTe量子点溶液及实施例7制备罗丹明-量子点新型生物探针的荧光光谱。【具体实施方式】下面结合【具体实施方式】对本专利技术进行详细描述,所述的实施例有助于本专利技术的理解和实施,并非构成对本专利技术的限制。本专利技术罗丹明-量子点新型生物荧光探针,是由罗丹明水溶液和量子点水溶液组成的体系;其中罗丹明水溶液摩尔浓度在5.5X 10_6-7.5X 10_5mol/L ;量子点水溶液的摩尔浓度在5.0X 10_6-6.0X 10_6mol/L ;且罗丹明水溶液和量子点水溶液的体积比在(1-1.5):I之间。本专利技术罗丹明-量子点新型生物荧光探针具有荧光共振能量转移的性质,并且具有有机染料和量子点的双重性质,对于荧光探针在生命科学领域的实际应用具有一定的意义。其构建示意图如图1所示。其制备过程如下:I)将罗丹明粉末溶于去离子水中,制得摩尔浓度为5.5Χ10-6-7.5Xl(T5mol/L的罗丹明溶液;2)将固体量子点溶于去离子水中,制得摩尔浓度为5.0Χ10-6-6.0Xl(T6mol/L量子点溶液;3)将罗丹明溶液和量子点溶液按体积比(1-1.5):1充分混合,在20-27°C条件下超声波振荡10-15min,得到罗丹明-量子点生物荧光探针。优选地,罗丹明水溶液选用罗丹明B或罗丹明6G。优选地,量子点水溶液选用CdTe量子点或CdSe量子点。以下实施例中,对本专利技术所述罗丹明-量子点新型生物荧光探针的制备和表征作出详细说明。实施例中所述罗丹明粉末是由上海三爱思试剂有限公司提供。下述实施例中所述CdTe量子点,是由中国专利(专利号:CN1693208A)所提供的方法制得。检测过程中,实施例中罗丹明B溶液用紫外-可见分光光度计(HITACHI U-3310,日本)观测其吸收光谱;CdTe量子点溶液用荧光光谱仪(Jasco FP-6500,日本)观测其发射光谱;双光子激发光源用波长为800nm的飞秒激光器(Mira900,Coherent, 76MHz,130fs)激发;荧光寿命用时间相关的单光子计数器测量。罗丹明B溶液的制备:取罗丹明固体粉末13.54mg溶于IOmL去离子水中,可得罗丹明原液,其浓度为2.8211X10_3mol/L,用去离子水将罗丹明原液进行稀释,得到罗丹明的浓度为 5.5Xl(T6mol/L 、l.5 X l(T5mol/L、2.8211 X l(T5mol/L、4.5Xl(T5mol/L、6.0 X 10 5mol/L 和 7.5 X 10 5mol/L。CdTe量子点溶液的制备:取固体CdTe6.77X10_3mg溶于IOmL去离子水中,可得CdTe量子点溶液,其浓度为2.8211X10_5mOl/L。取20uL CdTe量子点,以去离子水为溶剂,将QDs进行5倍本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种罗丹明‑量子点新型生物荧光探针,其特征在于由罗丹明水溶液和量子点水溶液组成;其中,所述的罗丹明水溶液摩尔浓度在5.5×10‑6‑7.5×10‑5mol/L;所述的量子点水溶液的摩尔浓度在5.0×10‑6‑6.0×10‑6mol/L;且罗丹明水溶液和量子点水溶液的体积比在(1‑1.5):1之间。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:李芳何志聪
申请(专利权)人:武汉工程大学
类型:发明
国别省市:湖北;42

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