本发明专利技术公开了一种量子点-有机染料复合物关/开型镉离子比率荧光探针及其制备方法，选用CdTeQDs作为主要的荧光源，引入FITC作为辅助（或参比）发色团，以氢键结合的方式形成CdTe-FITC复合物的双发射探针，克服了传统单荧光探针的荧光信号难以准确获得的难题。采用了荧光“关/开”模型，可有效地减少除被分析物之外的因素对荧光增强反应的干扰，荧光增强反应具有特异性，从而提高了被分析物探测的灵敏性与选择性。本发明专利技术制备方法简单，成本低，制备产物可对生物样品和复杂体系中的Cd2+进行准确、灵敏、简便、快速的探测，对于发展其它类型的高质量荧光探针具有重要的参考价值，为生物检测、化学分析等领域的研究提供了新的发展方向。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及分析检测领域，具体涉及一种关/开型镉离子比率荧光探针的制备方法。
技术介绍
含有重金属离子的废弃物严重污染了生物赖以生存的环境，对人类健康造成了巨大的威胁，尤其是镉离子(Cd2+)在很多工业过程中被大量使用，导致在土壤、水域、食品等领域高浓度含镉废弃物的出现，这一污染问题已经引起了人们的广泛关注。另外，Cd2+也可被积存在肾、肝、肺等脏器官中，对人们的健康造成了一系列急、慢性的危害。因此，开发一种简易、快速、廉价、高效的Cd2+评估技术十分必要。近年来，诱导耦合等离子质谱、微粒诱导 X-射线发射、原子吸收光谱、电子超顺磁共振、同步加速辐射型X-射线光谱等仪器分析技术已经被普遍用于重金属离子的探测，但这些技术十分耗时，测试费用高，且需要对样品进行复杂的前处理。荧光光谱测定法具有灵敏度高、方法简单、价格低廉等优点，在测定金属离子方面展现出重要的应用价值。近二十年来，基于人工合成有机染料的荧光探针已经被设计并用于Cd2+探测，但此类探针体系存在复杂的合成与修饰，量子产率低，水溶性和光稳定性差等问题，限制了它们的实际应用。在荧光探针的设计上，采用量子点(QDs)，也被称为胶体半导体纳米晶，可以解决以上问题，因为QDs具有许多独特的性能，如荧光质量高，激发光谱宽， 发射光谱尺寸可调，量子产率高以及光化学稳定性好等，使QDs荧光探针产生出显著的靶向信号用于各种物质的定性和定量分析。在先前报道中，QDs荧光探针普遍采用一种荧光淬灭模型，即除被分析物外，其它因素也可引起最终的荧光淬灭，从而限制了被分析物探测的灵敏性和选择性。相比之下，荧光开启模型是更可取的，其中的荧光“关/开”转换可以有效地减少假阳性电荷，可更容易经受住多重复合条件，如多个探测器同时用于相应的被分析物，且表现特异性的荧光反应。 然而，获得真实样品精确荧光强度是相当困难的，因为试剂浓度下荧光存在波动和自身背景荧光的干扰。为了克服这一缺陷，有必要引入第二个发色团以形成双发射的荧光体系，其中的比率荧光信号不受探针浓度大小的影响。相比单强度基荧光探针，双强度基(比率荧光)探针具有明显的优越性，它可消除溶剂及背景荧光的干扰；相比传统有机染料，QDs发光性能更优越；相比基于荧光淬灭模型的探针，基于荧光“关/开”模型的探针可信度更高。截至目前，有关Cd2+荧光探针的制备方法已有中国专利报道(公开号CN101817838A ；CN101555296和CN101004422)，但现有的 Cd2+荧光探针均采用有机染料作为唯一发色团，探测依据为单一荧光强度反应，严重制约了它们在真实样品中的分析能力。因此，获得一种高效的Cd2+探针体系，已经成为一项重要的研究课题。采用QDs，比率荧光法，荧光“关/开”模型等策略，有助于解决探测中灵敏度低， 选择性差等问题，这也是亟待解决的关键技术问题。迄今为止，尚未见基于量子点-有机染料复合物的Cd2+突光探针,基于量子点的双发射比率荧光Cd2+探针，基于量子点的荧光“关/开”模型Cd2+探针的相关报道。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是，提供一种操作简单、成本较低、产物可用于真实样品中镉离子高灵敏性和选择性探测的。为了解决上述问题，本专利技术提供了一种量子点-有机染料复合物关/开型镉离子比率突光探针，其特征在于，由量子点QDs与有机染料复合物组成,所述有机染料复合物是指CdTe-FITC复合物，镉离子诱导CdTe-FITC复合物关/开型荧光反应。一种量子点_有机染料复合物关/开型镉离子比率荧光探针的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤(1)在N2气氛，磁力搅拌及碱性水溶液中，氯化镉、碲氢化纳、巯基乙酸三者反应回流 Γ5小时，制备出巯基乙酸稳定的碲化镉量子点CdTe QDs ；(2)将步骤(I)获得的CdTeQDs分散在磷酸缓冲液中，调节pH为6 7，在室温与缓慢搅拌下，逐滴加入异硫氰酸荧光素FITC水溶液，形成CdTe-FITC复合物；(3)以硫化钠作为淬灭剂，逐滴添加S2_于步骤(2)复合物中，以淬灭复合物中CdTe最大荧光发射峰，即为“关”状态，而不影响FITC最大荧光发射峰；(4)以氯化镉作为增强剂，逐滴添加Cd2+于步骤(3)复合物中，以增强复合物中CdTe最大荧光发射峰，即为“开”状态，而不影响FITC最大荧光发射峰；(5)拟合添加的Cd2+浓度与步骤(4)复合物中最大荧光发射峰强度比JFITy/cdTe之间呈线性关系，构建出基于该复合物的关/开型Cd2+比率荧光探针。作为一个优选方案，步骤(I)所述CdTe QDs的最大荧光发射峰波长为55(T600nm。作为又一优选方案，步骤(I)所述CdTe QDs的最大突光发射峰波长为595nm。作为又一优选方案，步骤(2)所述FITC的最大荧光发射峰波长为520nm，CdTe QDs 与FITC的浓度比为I: I 1:5。作为又一优选方案，步骤(3)所述S2-浓度区间为(Γ40 μ M0作为又一个优选方案，步骤(4)所述Cd2+浓度区间为(Γ30 μ M0按上述方案，所述的线性关系应用于湖水、河水、牛血清白蛋白(BSA)等真实样品中Cd2+的比率荧光探测。本专利技术的优点在于1.选用CdTe QDs作为主要的荧光源，引入FITC作为辅助(或参比)发色团，以氢键结合的方式形成CdTe-FITC复合物的双发射(比率荧光)探针，克服了传统单荧光探针的荧光信号难以准确获得的难题。2. QDs发光性能优异，避免了有机染料荧光较弱，易光漂白，激发波长受限等问题。3.本专利技术采用了荧光“关/开”模型，可有效地减少除被分析物之外的因素对荧光增强反应的干扰，荧光增强反应具有特异性，从而提高了被分析物探测的灵敏性与选择性。4.本专利技术制备方法简单，成本低，制备产物可对生物样品和复杂体系中的Cd2+进行准确、灵敏、简便、快速的探测，对于发展其它类型的高质量荧光探针具有重要的参考价值，为生物检测、化学分析等领域的研究提供了新的发展方向。附图说明图I为CdTe-FITC复合物关/开型镉离子比率荧光探针的制备过程示意图。图2为TGA稳定的CdTe QDs荧光发射光谱，其中S2—浓度区间为(Γ20 μ M，QDs的浓度和激发波长分别为20 ηΜ和470 nm。图3为S2_修饰CdTe-FITC复合物荧光发射光谱，其中Cd2+浓度区间为O. f 15 μ M，QDs与FITC浓度，激发波长分别为10 ηΜ、20 ηΜ和470 nm。具体实施例方式下面结合具体实施例，进一步阐述本专利技术。下述实施例中所使用的实验方法如无 特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。实施例I CdTe-FITC复合物关/开型镉离子比率荧光探针的制备过程如图I所示，详细的制备步骤如下首先采用磷酸缓冲液(PBS，pH = 6. 5)配置40 ηΜ的CdTe QDs (最大荧光发射峰波长』为595nm)溶液，称取一定量FITC (』=520nm)溶于超纯水中，浓度调节为80 ηΜ。然后在室温和缓慢磁力搅拌下，将FITC逐滴加入QDs溶液中，以形成FITC-QDs复合物，其中的QDs与FITC浓度分别调节为30 η本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种量子点？有机染料复合物关/开型镉离子比率荧光探针，其特征在于，由量子点QDS与有机染料复合物组成，所述有机染料复合物是指CdTe？FITC复合物，镉离子诱导CdTe？FITC复合物关/开型荧光反应。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：安学勤，桂日军，黄文学，龚俊，
申请(专利权)人：华东理工大学，
类型：发明
国别省市：
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