本发明专利技术公开了一种去除肝素钠中有机残留的方法，该产品主要经过酶解，除蛋白、沉淀干燥等工序制得。该方法主要解决目前该类产品生产工艺流程复杂、碱酸或盐用量较大、制备周期长、收率低等问题；该方法仅需一步酶解即可把硫酸软骨素中的软骨提取出来，不需要碱解或用盐浸泡，制备后的产品色泽洁白、质地疏松、收率可高达43％及以上，且纯度较高，符合国内外口服标准，生产工序简单，周期较短，反应时间仅需3-8小时，碱用量比稀碱酶解法节约80％以上，同时减少了下游提纯的难度，减轻对环境的污染，有利于环保。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了，该产品主要经过酶解，除蛋白、沉淀干燥等工序制得。该方法主要解决目前该类产品生产工艺流程复杂、碱酸或盐用量较大、制备周期长、收率低等问题；该方法仅需一步酶解即可把硫酸软骨素中的软骨提取出来，不需要碱解或用盐浸泡，制备后的产品色泽洁白、质地疏松、收率可高达43％及以上，且纯度较高，符合国内外口服标准，生产工序简单，周期较短，反应时间仅需3-8小时，碱用量比稀碱酶解法节约80％以上，同时减少了下游提纯的难度，减轻对环境的污染，有利于环保。【专利说明】
本专利技术涉及生化制药领域，具体涉及到。
技术介绍
硫酸软骨素钠，英文名Chondroitin sulfate sodium,是动物软骨中提取的酸性粘多糖，多存在于动物的软骨、喉骨、鼻骨(41%)、牛、马中膈和气管中，其分子结构为β -D-葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基半乳糖通过β I — 3糖苷键形成的重复二糖单位所组成的多糖链。硫酸软骨素钠主要用于治疗风湿和类风湿疾病的药物，还具有抗凝、抗癌、抗血栓、降血脂等作用，可用于治疗头痛、偏头痛、冠心病、心绞痛等症状。在国外，对硫酸软骨素钠药理的研究已经达到分子水平。目前国内提取硫酸软骨素钠的方法主要有三种:盐解法、碱解法和酶解法。主要采用的分离纯化技术有:乙醇沉淀法、离子交换色谱法、纤维素分离法、季铵盐配合法、吸附法、区带电泳分离法等。在以上的集中提取方法中，收率虽然可以达到很高的水平，但生产方法都存在很大问题，如盐解法工艺中存在除酸性蛋白调节PH值1-2在产品量大时耗时很长，硫酸软骨素中的氨基易被解离下来，从而影响了硫酸软骨素的收率。
技术实现思路
本专利技术的目的是，提供一种提高硫酸软骨素收率的制备方法，此方法主要从节能、节约试剂、缩短生产时间、简化生产工艺等角度出发，提供一种提高硫酸软骨素收率的制备方法，该方法利于工业化生产。`由于硫酸软骨素和软骨中的蛋白质是以糖肽共价键结合在一起的，在碱性条件下，以胰蛋白酶为催化剂，糖胺聚糖可以从软骨组织中的胶原蛋白中分离出来。根据这个原理，本工艺直接把胰蛋白酶加入，调节反应的ΡΗ，温度条件，直接生产硫酸软骨素。这样以来，缩短了工艺流程，反应时间只需要4-8小时，用碱量比稀碱酶解法节省80%以上，收率不但没有下降，反而比原来要高3-5个百分点。本专利技术的步骤如下:1、将洁白干净的动物软骨放入反应罐内，加入适量的水浸泡，并加入软骨重量的0.1% -1.6%的胰蛋白酶，调节PH在8.5-9.5之间，控制温度在40-55°C之间，搅拌2_9小时；2、当动物软骨反应完全后，用盐酸调节酶解液使其PH在5.5-7.5之间，加热至65-80°C，保温 10-40 分钟；3、待酶解液冷却后，过滤或离心除渣，过滤后得较清澈的滤液酶解液，加入酶解液重量0.2% -2.0%的氯化钠，使PH在3.5-5.5之间，搅拌20-50分钟，过滤或离心除渣。4、将上步所得酶解液加入其体积2-4倍的浓度为90%的乙醇，使乙醇浓度达到50% -80%，沉淀；5、将上步沉淀物用浓度为95%的乙醇复沉2到3遍，干燥后即得所述的硫酸软骨素成品。本专利技术的优点为:本制备方法通过对目前工艺的改进创新，采用进一步酶解法生产硫酸软骨素，通过正交实验，找到生产工艺的优化生产工艺条件为:水解时间为6小时，水解温度为48°C,胰蛋白酶用量为0.8%软骨重，三种因素中对水解影响程度主要为水解温度，其次为酶用量和水解时间。整个反应过程PH值控制在8.5-9.5之间。此最佳组合可使硫酸软骨素收率达到43%及以上。采用新工艺后，可简化生产流程，大大缩短生产时间，减少碱用量，同时减少下游提纯`的难度，减轻对环境的污染。【权利要求】1.，其特征在于包括以下步骤: (1)将洁白干净的动物软骨放入反应罐内，加入适量的水浸泡，并加入软骨重量的0.1% -1.6%的胰蛋白酶，调节PH在8.5-9.5之间，控制温度在40_55°C之间，搅拌2_9小时； (2)当动物软骨反应完全后，用盐酸调节酶解液使其PH在5.5-7.5之间，加热至65-80°C，保温 10-40 分钟； (3)待酶解液冷却后，过滤或离心除渣，过滤后得较清澈的滤液酶解液，加入酶解液重量0.2% -2.0%的氯化钠，使PH在3.5-5.5之间，搅拌20-50分钟，过滤或离心除渣； (4)将上步所得酶解液加入其体积2-4倍的浓度为90%的乙醇，使乙醇浓度达到50% -80%，沉淀； (5)将上步沉淀物用浓度为95%的乙醇复沉2到3遍，干燥后即得所述的硫酸软骨素成品。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:(3)步中加入的酶解液重0.2% -2.0%的氯化钠盐析，以增强硫酸软骨素的沉淀效果。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:水解温度为48°C。4.根据权利要 求1所述的方法，其特征在于:水解时间为6h，胰酶用量为0.8%倍软骨重。【文档编号】C08B37/10GK103804525SQ201310631226【公开日】2014年5月21日 申请日期:2013年11月26日 优先权日:2013年11月26日 【专利技术者】刘乃山, 陆玉梅, 迟培升, 夏衬来 申请人:青岛九龙生物医药有限公司本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种去除肝素钠中有机残留的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)将洁白干净的动物软骨放入反应罐内，加入适量的水浸泡，并加入软骨重量的0.1％?1.6％的胰蛋白酶，调节PH在8.5?9.5之间，控制温度在40?55℃之间，搅拌2?9小时；(2)当动物软骨反应完全后，用盐酸调节酶解液使其PH在5.5?7.5之间，加热至65?80℃，保温10?40分钟；(3)待酶解液冷却后，过滤或离心除渣，过滤后得较清澈的滤液酶解液，加入酶解液重量0.2％?2.0％的氯化钠，使PH在3.5?5.5之间，搅拌20?50分钟，过滤或离心除渣；(4)将上步所得酶解液加入其体积2?4倍的浓度为90％的乙醇，使乙醇浓度达到50％?80％，沉淀；(5)将上步沉淀物用浓度为95％的乙醇复沉2到3遍，干燥后即得所述的硫酸软骨素成品。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：刘乃山，陆玉梅，迟培升，夏衬来，
申请(专利权)人：青岛九龙生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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