本发明提供了一种多核苷酸检测方法、试剂盒和应用，涉及生物技术领域。该多核苷酸检测方法，包括：提供至少一组引物对，每个引物对中的一端引物含有第一淬灭基团、核酸外切酶识别位点和发光基团；另一端引物含有第二淬灭基团；使用引物对扩增待测样本获得...