本发明涉及肿瘤免疫治疗技术与基因工程改造技术领域，提供了一种表达乙酰肝素酶的嵌合抗原受体修饰的免疫细胞的制备方法，包括如下步骤：目标序列选取，构建含嵌合抗原受体的pCDH载体，将乙酰肝素酶HPSE的DNA表达序列克隆进含嵌合抗原受体的p...

本发明公开了一种表达TGF‑β抗体的慢病毒载体、CAR‑T细胞的构建方法及应用，涉及肿瘤免疫治疗技术领域，基于肿瘤免疫抑制微环境中的免疫抑制分子和抑制性细胞是治疗实体瘤的最大障碍的问题而提出的。本发明包括一种携带TGF‑β抗体的实体瘤特...

本发明公开了敲减人IL‑15的siRNA、CD19 CAR表达载体、CD19 CAR‑T细胞及应用，涉及肿瘤免疫治疗技术领域，基于没有方法控制CD19 CAR‑T细胞自身激活增殖释放的IL‑15的问题而提出的。本发明包括一种敲减人IL‑...

本发明提供了一种表达CXCL10和CCL21趋化因子靶向嵌合抗原受体T淋巴细胞的构建方法，包括如下步骤：序列选取；构建含嵌合抗原受体的pCDH载体；将CXCL10及CCL21的DNA表达序列克隆进含嵌合抗原受体的pCDH载体中；慢病毒的...

本发明公开了一种表达CD40抗体的慢病毒载体、CAR‑T细胞的构建方法及应用，涉及肿瘤免疫治疗技术领域，基于巨噬细胞会促进肿瘤恶化的问题而提出的。本发明包括一种携带CD40抗体的实体瘤特异性抗原靶点的CAR基因的慢病毒表达载体、表达CD...

本发明公开了一种敲减人TRAC/TRBC基因的siRNA、慢病毒载体、CAR‑T细胞构建方法及应用，涉及肿瘤免疫治疗技术领域，基于依赖TCR识别某种抗原的T细胞会大量增殖并可能引起炎症等不良反应，这些CAR‑T细胞不能专一的进行肿瘤细胞...

本发明公开了一种用于检测支原体的荧光定量PCR引物、检测方法及应用，涉及病原体检测领域，基于现有技术无法快速、定量诊断细胞培养液中支原体的污染的问题而提出的，本发明包括用于检测支原体的荧光定量PCR引物、试剂盒及检测方法，本发明的有益效...

本发明提供一种冻存细胞复苏的方法，包括以下步骤：(1)清洗液的准备：准备第一离心管，加入DMEM无血清培养基和胎牛血清(FBS)，混匀后，放入水浴锅中预热；(2)冻存细胞的融化：从液氮中迅速取出细胞冻存管，迅速转移至水浴锅中使完全融化；...

本发明提供了一种γδT细胞的培养方法，包括如下步骤：(1)从外周血中获得单个核细胞，用额外添加有抗体的无血清培养基重悬后，调整单个核细胞密度，培养箱培养；(2)第4天和第8天，分别补加不添加抗体的无血清培养基；第12天，扩增培养结束；(...

本发明涉及肿瘤细胞治疗技术研发过程的基因工程载体构建与鉴定领域，提供了一种针对第四代嵌合抗原受体CAR载体PCR鉴定的方法，对第四代嵌合抗原受体CAR质粒阳性菌落进行PCR鉴定时，使用两对引物单独进行扩增测序并鉴定。本发明的优点在于：对...

本发明涉及生物技术领域，提供了一种NK细胞的无血清培养方法，包括如下步骤：(1)从外周血分离单个核细胞，重悬于无血清培养基中，调整单个核细胞浓度，培养箱中静置培养过夜；(2)第2天，从培养液中吸出悬浮细胞，接种于细胞培养瓶，补加无血清培...

本发明公开了一种冷冻外周血单个核细胞的复苏方法，包括以下步骤：向无血清培养基中加入胎牛血清，混匀后置入37℃水浴中预热，得到清洗液；在1分钟内将冻存管从液氮中取出并转入37℃水浴中，快速晃动冻存管，当冻存管中的单个核细胞冻存液为冰水混合...