本发明专利技术涉及一种管花肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物萃取分离的评价方法，该方法以毛蕊花糖苷、松果菊苷为参照，分别建立正丁醇‑苯乙醇苷类化合物‑水三元体系的指纹图谱，考察不同萃取条件下，有机相和水相指纹图谱色谱峰峰数和相对峰面积对已知化合物毛蕊花糖苷的影响和分配系数，从而获得萃取分离毛蕊花糖苷的基本参数，评估萃取工艺的可行性。
【技术实现步骤摘要】
一种管花肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物萃取分离的评价方法
本专利技术涉及一种管花肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物萃取分离的新评价方法。
技术介绍
管花肉苁蓉Cistanchetubulosa(Schenk)R.Wight为列当科植物，是中亚地区及新疆特有药用植物，新疆主要分布于南疆的塔克拉玛干沙漠边缘地区。作为药用已有千年历史，记载于《神农本草经》，收载于《中华人民共和国药典》。用于补肾阳、益精血、润肠通便、增强体力和免疫力、延缓衰老等。近年来研究发现管花肉苁蓉中的主要物质苯乙醇苷类(phenylethanoidglycosides，PhGs)化合物在神经保护和延缓神经退行性疾病方面有良好的开发前景，成为研究的热点。其中松果菊苷和毛蕊花糖苷作为主要的化合物，得到了广泛的研究，但因得到高含量的化合物，成本较高，开发受到了限制。项目组前期通过柱色谱技术制备得到高纯度的化合物，但对设备和操作技术要求高，难以实现工业化。液-液萃取技术是一种最常规的分离方法，根据物质对水的亲疏性不同，通过适当的处理将物质从水相中萃取到有机相，最终达到分离的目的。液-液萃取常用于样品中被测物质与基质的分离，在两种不相容液体或相之间通过分配对样品进行分离而达到被测物质纯化和消除干扰物质的目的。在大部分情况下，一种液相是水溶剂，另一种液相是有机溶剂。可通过选择两种不相容的液体控制萃取过程的选择性和分离效率。在水和有机相中，亲水化合物的亲水性越强，憎水性化合物将进入有机相中的程度就越大。溶剂萃取技术是一种比较节能和简单的方法。操作条件比较宽松，该技术与其他分离技术相比较，可以减少耗能、设备操作简单、收率比较高、处理能力比较强，分离结果比较令人满意。萃取的实质就是发生在两相之间的传质过程，它与两液相间的平衡关系有着紧密的联系为了简单、高效地获得管花肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物松果菊苷和毛蕊花糖苷，本专利技术利用松果菊苷和毛蕊花糖苷在不同溶剂中的溶解性不同，采用溶剂萃取法，以三元体系结合指纹图谱评价萃取效果，来优化工艺参数。目前，尚未见有该方面的报道。液-液相平衡数据是进行萃取流程设计和设备计算的重要参数，是评估萃取工艺可行性的基础数据。本文分别建立三元体系正丁醇-苯乙醇苷类化合物-水的指纹图谱，考察不同萃取条件下，计算了正丁醇-毛蕊花糖苷-水的选择性系数和分配系数，并采用三角形相图表示相平衡关系,考察各体系指纹图谱色谱峰的相对峰面积对已知化合物松果菊苷和毛蕊花糖苷的影响和分配系数的影响，评估萃取工艺的可行性；并测定其液液平衡数据，从而获得萃取分离松果菊苷和毛蕊花糖苷所需的基本数据。
技术实现思路
本专利技术目的在于，提供一种管花肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物萃取分离的评价方法，该方法以毛蕊花糖苷、松果菊苷为参照，分别建立正丁醇-苯乙醇苷类化合物-水三元体系的指纹图谱，考察不同萃取条件下，有机相和水相指纹图谱色谱峰峰数和相对峰面积对已知化合物毛蕊花糖苷的影响和分配系数，从而获得萃取分离毛蕊花糖苷的基本参数，评估萃取工艺的可行性。本专利技术所述的一种管花肉苁蓉中毛蕊花糖苷萃取分离的评价方法，该评价方法以毛蕊花糖苷、松果菊苷为参照，利用正丁醇-毛蕊花糖苷-水三元体系，采用高效液相色谱法分别建立水相和有机相的指纹图谱，具体操作按下列步骤进行：a、供试品制备：取管花肉苁蓉浸膏细粉1g，精密称定，置于100ml容量瓶中，加30ml温水溶解，放冷，加水定容至刻度，摇匀，过滤，稀释定容，0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液；b、萃取溶液制备：取管花肉苁蓉浸膏粉5g，精密称定，置于已称重的50ml容量瓶中，精密称定，加入30ml温水溶解，放冷，加水定容至刻度，称重，摇匀后倒入温度50℃恒温夹套烧杯中，精密量取50ml正丁醇于已称重的容量瓶中，精密称定，100r/min磁力搅拌30min，静置2h，分离正丁醇层和水层，分别取正丁醇层和水层各1ml，置于已称重的容量瓶中，精密称定，甲醇稀释定容，0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液；c、对照品溶液的制备：分别取毛蕊花糖苷、松果菊苷对照品各10mg，精密称定，分别加体积浓度为50％甲醇制成每1ml含毛蕊花糖苷、松果菊苷各0.2mg的溶液，0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液作为对照品溶液；d、测定：分别精密吸取步骤c对照品溶液与步骤a供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇为流动相A，以含0.2％甲酸溶液为流动相B，梯度洗脱，流动相A、B的比例变化为：0-10min，A相20％，B相80％；10-40min，A相35％，B相65％；40-60min，A相44％，B相56％；流速1.0ml·min-1，柱温35℃，采用二极管阵列检测器，理论塔板数按毛蕊花糖苷峰计算应不低于5000，记录60分钟内的色谱图，用指纹图谱软件对图谱进行处理，分别测定水相和有机相的指纹图谱，计算共有峰。利用正丁醇-毛蕊花糖苷-水三元体系，采用高效液相色谱法分别建立水相和有机相的指纹图谱，建立了不同萃取物浓度、有机相与水相体积比、搅拌速率、搅拌时间、静置时间、萃取次数、萃取温度等萃取条件的有机相和水相的指纹图谱，记录指纹图谱共有峰个数以及相对峰面积的变化，考察其对已知化合物松果菊苷和毛蕊花糖苷分配系数的影响，从而获得萃取分离目标物质毛蕊花糖苷的基本工艺参数，评估萃取工艺的可行性。附图说明图1为本专利技术有机相色谱图；图2为本专利技术水相色谱图；图3为本专利技术毛蕊花糖苷对照色谱图。具体实施方式实施例一、试验材料：常规材料；二、试验方法：1、供试品溶液的制备：1.1浸膏粉含量测定供试品制备：取管花肉苁蓉浸膏细粉1g，精密称定，置于100ml容量瓶中，加适量温水溶解，放冷，加水定容至刻度，摇匀，过滤，稀释定容(稀释定容具体体积预试后确定)，0.45μm微孔滤膜过滤，平行三份，待测；1.2萃取溶液制备：取管花肉苁蓉浸膏粉5g，精密称定，置于已称重的50ml容量瓶中，精密称定，加入30ml温水溶解，放冷，加水定容至刻度，称重。摇匀后倒入50℃恒温夹套烧杯中，精密量取50ml正丁醇于已称重的容量瓶中，精密称定。100r/min磁力搅拌30min，静置2h(时间待定)，分离正丁醇层和水层，分别取二者各1ml，置于已称重的容量瓶中，精密称定，甲醇稀释定容，0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液；1.3对照品溶液的制备：分别取毛蕊花糖苷、松果菊苷对照品10mg，精密称定，加50％甲醇分别制成每1ml含毛蕊花糖苷、松果菊苷0.2mg的溶液，0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液作为对照品溶液；2、指纹图谱测定方法建立：2.1色谱条件：色谱条件为：色谱柱：Inertsil-ODS-3V(4.6×250mm，5μm)；检测波长：330nm，柱温：30℃，进样量：10μl；A相：甲醇；B相：0.2％甲酸水梯度洗脱，梯度洗脱条件如下：表1三、实验结果：1液液平衡单因素实验：1.1萃取物的浓度：分别按6、8、10、12倍加入浸膏粉，精密称定，置于50ml容量瓶中，30ml温水溶解，加水定容至刻度，称重，将水相混合物倒入恒温夹套烧杯中，加入50ml水饱和的正丁醇，200r/min磁力搅拌30min，温度55℃，水浴中静置分层(记录时间)后再静置2本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种管花肉苁蓉中毛蕊花糖苷萃取分离的评价方法，其特征在于该评价方法以毛蕊花糖苷、松果菊苷为参照，利用正丁醇‑毛蕊花糖苷‑水三元体系，采用高效液相色谱法分别建立水相和有机相的指纹图谱，具体操作按下列步骤进行：a、供试品制备：取管花肉苁蓉浸膏细粉1 g，精密称定，置于100 ml容量瓶中，加30ml温水溶解，放冷，加水定容至刻度，摇匀，过滤，稀释定容，0.45 μm微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液；b、萃取溶液制备：取管花肉苁蓉浸膏粉5 g，精密称定，置于已称重的50 ml容量瓶中，精密称定，加入30ml温水溶解，放冷，加水定容至刻度，称重，摇匀后倒入温度50℃恒温夹套烧杯中，精密量取50 ml正丁醇于已称重的容量瓶中，精密称定，100 r/min磁力搅拌30 min，静置2 h，分离正丁醇层和水层，分别取正丁醇层和水层各1 ml，置于已称重的容量瓶中，精密称定，甲醇稀释定容，0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液；c、对照品溶液的制备：分别取毛蕊花糖苷、松果菊苷对照品各10mg，精密称定，分别加体积浓度为50%甲醇制成每1ml含毛蕊花糖苷、松果菊苷各0.2mg的溶液，0.45 μm微孔滤膜过滤，取续滤液作为对照品溶液；d、测定：分别精密吸取步骤c对照品溶液与步骤a供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇为流动相A，以含0.2%甲酸溶液为流动相B，梯度洗脱，流动相A、B的比例变化为：0‑10min，A相20%，B相80%；10‑40min，A相35%，B相65%；40‑60min，A相44%，B相56%；流速1.0ml·min‑1，柱温35℃，采用二极管阵列检测器，理论塔板数按毛蕊花糖苷峰计算应不低于5000，记录60分钟内的色谱图，用指纹图谱软件对图谱进行处理，分别测定水相和有机相的指纹图谱，计算共有峰。...
【技术特征摘要】
1.一种管花肉苁蓉中毛蕊花糖苷萃取分离的评价方法，其特征在于该评价方法以毛蕊花糖苷、松果菊苷为参照，利用正丁醇-毛蕊花糖苷-水三元体系，采用高效液相色谱法分别建立水相和有机相的指纹图谱，具体操作按下列步骤进行：a、供试品制备：取管花肉苁蓉浸膏细粉1g，精密称定，置于100ml容量瓶中，加30ml温水溶解，放冷，加水定容至刻度，摇匀，过滤，稀释定容，0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液；b、萃取溶液制备：取管花肉苁蓉浸膏粉5g，精密称定，置于已称重的50ml容量瓶中，精密称定，加入30ml温水溶解，放冷，加水定容至刻度，称重，摇匀后倒入温度50℃恒温夹套烧杯中，精密量取50ml正丁醇于已称重的容量瓶中，精密称定，100r/min磁力搅拌30min，静置2h，分离正丁醇层和水层，分别取正丁醇层和水层各1ml，置于已称重的容量瓶中，精密称定，甲醇稀释定容，0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液；c、对照品溶液的制备：分别取毛蕊花糖苷、松果菊苷对照品各10mg，精密称定，分别加体积浓度为50%甲醇制成每1ml含毛蕊花糖苷、松果菊苷各0.2mg的溶液，0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液作为对照品溶...
【专利技术属性】
技术研发人员：霍仕霞，闫明，高莉，毛乐静，谭雪，
申请(专利权)人：新疆维吾尔自治区维吾尔医药研究所，
类型：发明
国别省市：新疆,65
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