一种没食子鞣质类成分的一测多评质量控制方法技术

本发明专利技术公开了一种没食子鞣质类成分的分析方法，该方法包括如下步骤：1)对照品溶液的制备；2)供试品溶液的制备；3)将所述对照品溶液分别稀释后与所述供试品溶液注入高效液相色谱仪，进行色谱条件检测；以及4)根据检测结果，获得药材或饮片或者制剂的成分信息，或者成分信息和含量信息。该方法具有优良的灵敏度、稳定性、重复性和准确度，可用于没食子药材或饮片及其制剂的质量检测、质量评价或质量控制。制。制。

【技术实现步骤摘要】
一种没食子鞣质类成分的一测多评质量控制方法


[0001]本专利技术涉及药材或饮片或者中药制剂的成分检测
，具体涉及一种没食子鞣质类成分的一测多评质量控制方法及其应用。

技术介绍

[0002]没食子鞣质(gallotannins)是没食子药材中的主要化学成分，其含量高达50～70％。没食子鞣质是存在于植物体内的一类结构比较复杂的水溶性多元酚类化合物，其中没食子酸是没食子鞣质的水解单体。大量研究结果表明没食子鞣质在抑菌、抗氧化、降血糖、抗肿瘤、抗病毒、抗炎及镇痛等方面具有良好的效果。众多中药民族药含有没食子鞣质类成分，如五倍子、大黄、老鹳草、白芍、覆盆子、地稔、余甘子、石榴皮、石榴花、西青果、诃子、毛诃子、沙棘叶、叶下珠、地榆、金樱子等。由于鞣质的结构复杂且不稳定，分离纯化较为困难，其单体化合物难以获得，极大的制约了质量评价和质量控制方法的建立。目前，对于没食子鞣质类成分的定量分析方法，主要以没食子酸作为质量控制的指标。
[0003]没食子(Gall of Q.infectoria Oliv.)为没食子蜂科昆虫没食子蜂(Cynips gallae
‑
tinctoriae Oliv.)的幼虫寄生于壳斗科植物没食子树(Quercus infectoria Oliv.)幼枝上形成的干燥虫瘿，主产于土耳其、叙利亚、希腊、伊朗及印度等地，尤以小亚细亚和阿勒颇产量大、质量优。没食子作为我国维吾尔医传统特色药，具有生干生寒，燥湿收敛，固齿止痛，清热消炎，祛腐愈伤，凉血止血，止泻止痢等作用，临床上主要用于治疗牙齿酸软、牙龈出血、口舌生疮、溃疡性结肠炎、湿性白带过多、子宫出血和泻痢不止等。
[0004]没食子的单味制剂——西帕依固龈液，是没食子经加工制成的漱口液，具有健齿固龈，清血止痛的作用，主要用于牙周疾病引起的牙齿酸软，咀嚼无力，松动移位，牙龈出血以及口舌生疮，咽喉肿痛，口臭烟臭等。其次，含没食子药材的维吾尔药复方制剂有玛木然止泻胶囊、肛宁巴瓦斯尔软膏、阿哪尔妇洁液、清涩比黑马尔江散、复方班鲁提散、健阴栓和孜衣尔胶囊等。
[0005]“一测多评”(Quantitative Analysis of Multi
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components by Single
‑
marker，QAMS)中药质量评价模式是一种基于待测成分间的相对校正因子(Relative Correction Factors，RCFs)，仅使用一种对照品，便可实现对多个指标成分进行同步测定的定量分析方法。该法不仅弥补了多指标定量分析中一些对照品制备困难、价格昂贵、难以批量供应、甚者无市售产品等缺陷，而且可以低成本、高效率的实现中药多指标性成分的同步测定，全面而又客观的反映中药的内在质量。QAMS法自2006年提出以来，已成为行业内认可度高、应用广泛的中药质量控制模式，《中国药典》中多个中药品种的【含量测定】项中纳入了该法。
[0006]本专利技术以没食子药材及其制剂为例，建立没食子酸(gallic acid，GA)、1
‑
没食子酸酰葡萄糖(1
‑
galloylglucose,1
‑
GG)、没食子酸甲酯(methylgallate，MG)、1,2,3,6
‑
四没食子酰葡萄糖(1,2,3,6
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tetragalloylglucose，TeGG)和1,2,3,4,6
‑
五没食子酰葡萄糖(1,2,3,4,6
‑
pentagalloylglucose，PGG)5种没食子鞣质类成分的同步测定方法(例如“一测多
评”法)，可用于没食子药材及其成方制剂的质量检测、质量评价或质量控制。
[0007]目前，尚未见文献报道对上述没食子药材及其制剂的五种化学成分进行分析研究的方法。

技术实现思路

[0008]本专利技术的主要目的是提供一种灵敏度、稳定性、重复性和准确度优良的没食子鞣质类成分的分析方法，以解决现有技术中的常见的没食子药材或饮片及其制剂的一些对照品制备困难、价格昂贵或者难以批量供应，以及对于没食子鞣质类成分的定量分析方法主要以没食子酸这一单一成分作为质量控制指标从而无法客观全面反映没食子药材或饮片及其制剂的内在质量的问题。
[0009]为了实现上述目的，根据本专利技术的一个方面，提供了一种没食子鞣质类成分的分析方法，该方法包括如下步骤：
[0010]1)对照品溶液的制备：制备没食子酸、1
‑
没食子酸酰葡萄糖、没食子酸甲酯、1,2,3,6
‑
四没食子酰葡萄糖和/或1,2,3,4,6
‑
五没食子酰葡萄糖的对照品溶液；
[0011]2)供试品溶液的制备：取适量的药材或饮片或者包含药材或饮片的制剂置于容器中，加入溶剂称定重量后冷浸、超声或者回流提取，提取后再次加入溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，得到供试品溶液；
[0012]3)将该对照品溶液分别稀释后与该供试品溶液注入高效液相色谱仪，进行色谱条件检测，该色谱条件为：采用C
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色谱柱，以甲醇或乙腈为流动相A、酸水溶液为流动相B，梯度洗脱程序为：0～30min，3％～10％A；30～70min，10％～15％A；70～120min，15％～30％A；流速为0.6～1.5mL/min；柱温为30～40℃；检测波长为250～300nm；进样体积为3～10μL；以及
[0013]4)根据检测结果，获得该药材或饮片或该制剂的成分信息，或者成分信息和含量信息。
[0014]进一步地，该方法进一步包括：利用没食子酸或没食子酸甲酯为内参物分别计算目标化合物的相对保留值、相对校正因子和/或含量，其中该目标化合物选自以下中的一种或多种：没食子酸、1
‑
没食子酸酰葡萄糖、没食子酸甲酯、1,2,3,6
‑
四没食子酰葡萄糖和1,2,3,4,6
‑
五没食子酰葡萄糖。
[0015]进一步地，该药材或饮片为没食子。
[0016]进一步地，该包含药材或饮片的制剂为包含没食子的单一或复方制剂。
[0017]进一步地，该包含药材或饮片的制剂为西帕依固龈液。
[0018]进一步地，该回流提取为水浴回流提取。
[0019]进一步地，该水浴回流提取的时间为3至5小时。
[0020]进一步地，该水浴回流提取的时间为约4小时。
[0021]进一步地，该溶剂为甲醇和/或乙醇的水溶液。
[0022]进一步地，该溶剂的浓度为30％～50％。
[0023]进一步地，该溶剂的浓度为约40％。
[0024]进一步地，该滤过进一步包括通过0.45μm微孔滤膜进行滤过。
[0025]进一步地，该C
18
色谱柱为C
18 ODS色谱柱。
[0026]进一步地，该C
18
色谱柱为Phenomenex C...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种没食子鞣质类成分的分析方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：1)对照品溶液的制备：制备没食子酸、1
‑
没食子酸酰葡萄糖、没食子酸甲酯、1,2,3,6
‑
四没食子酰葡萄糖和/或1,2,3,4,6
‑
五没食子酰葡萄糖的对照品溶液；2)供试品溶液的制备：取适量的药材或饮片或者包含药材或饮片的制剂置于容器中，加入溶剂称定重量后冷浸、超声或者回流提取，提取后再次加入溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，得到供试品溶液；3)将所述对照品溶液分别稀释后与所述供试品溶液注入高效液相色谱仪，进行色谱条件检测，所述色谱条件为：采用C
18
色谱柱，以甲醇或乙腈为流动相A、酸水溶液为流动相B，梯度洗脱程序为：0～30min，3％～10％A；30～70min，10％～15％A；70～120min，15％～30％A；流速为0.6～1.5mL/min；柱温为30～40℃；检测波长为250～300nm；进样体积为3～10μL；以及4)根据检测结果，获得所述药材或饮片或者所述制剂的成分信息，或者成分信息和含量信息。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法进一步包括利用没食子酸或没食子酸甲酯为内参物分别计算目标化合物的相对保留值、相对校正因子和/或含量，其中所述目标化合物选自以下中的一种或多种：没食子酸、1
‑
没食子酸酰葡萄糖、没食子酸甲酯、1,2,3,6
‑
四没食子酰葡萄糖和1,2,3,4,6
‑
五没食子酰葡萄糖；优选地，所述药材或饮片为没食子；更优选地，所述包含药材或饮片的制剂为包含没食子的单一或复方制剂；特别优选地，所述包含药材或饮片的制剂为西帕依固龈液。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述回流提取为水浴回流提取；优选地，所述水浴回流提取的时间为3至5小时；更优选地，所述水浴回流提取的时间为约4小时；又优选地，所述溶剂为甲醇和/或乙醇的水溶液；尤其优选地，所述溶剂的浓度为30％～50％；又尤其优选地，所述溶剂的浓度为约40％；特别优选地，所述滤过进一步包括通过0.45μm微孔滤膜进行滤过。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述C
18
色谱柱为C
18
ODS色谱柱；优选地，所述C
18
色谱柱为Phenomenex C
18
色谱柱，4.6
×
250mm，5μm、Shimaduz VP
‑
ODS C
18
色谱柱，4.6
×
250mm，5μm、Kromasil C
18
色谱柱，4.6
×
250mm，5μm、或Agilent C
18
色谱柱，4.6
×
250mm，5μm；更优选地，所述C
18
色谱柱为Phenomenex C
18
色谱柱，4.6
×
250mm，5μm；又优选地，所述酸水溶液为0.1％～0.3％的酸水溶液；特别优选地，所述酸水溶液为0.1％～0.3％的磷酸水溶液；尤其优选地，所述酸水溶液为约0.2％的磷酸水溶液；最优选地，各个色谱峰分离度R大于1.5，拖尾因子T为0.95～1.05。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱程序为：0～20min，3％～8％A；20～30min，8％～10％A；30～70min，10％～15％A；70～100min，15％～18％A；100～120min，18％～30％A；
优选地，所述流速为0.8～1.2mL/min；又优选地，所述流速为约1.0mL/min；更优选地，所述柱温为32～37℃；尤其优选地，所述柱温为约35℃；特别优选地，所述检测波长为260～290nm；又特别优选地，所述检测波长为约275nm；又尤其优选地，所述进样体积为5～10μL；最优选地，所述进样体积为约5μL。6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，当以没食子酸为内参物时，目标化合物为1
‑
没食子酸酰葡萄糖、没食子酸甲酯、1,2,3,6
‑
四没食子酰葡萄糖和/或1,2,3,4,6
‑
五没食子酰葡萄糖；优选地，当以没食子酸为内参物时，采用相对保留值对所述目标化合物进行色谱峰的定位，1
‑
没食子酸酰葡萄糖、没食子酸甲酯、1,2,3,6
‑
四没食子...

【专利技术属性】
技术研发人员：霍仕霞，陈两绵，买买提，
申请(专利权)人：新疆维吾尔自治区维吾尔医药研究所，
类型：发明
国别省市：