一种海藻酸钙多相微载体的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种海藻酸钙多相微载体的制备方法。所述方法采用静电喷射技术，将海藻酸钠水溶液在静电作用下双针头并喷形成均匀液滴，液滴进入到氯化钙溶液中，制得两相凝胶微球。本发明专利技术的制备方法简单，制备的微球粒径在150‑250μm，可控性较强。海藻酸钠具有良好的生物安全性、生物相容性、生物降解性与可加工性。本发明专利技术方法制得的海藻酸钙多相微载体，微球两相区域能够促进细胞的功能表达，可同时担载多种细胞和多种生长因子，考察细胞的生物活性，进一步开发具有磁性、热学等性能的功能性微载体。

【技术实现步骤摘要】
一种海藻酸钙多相微载体的制备方法
本专利技术属于静电喷射
，涉及一种海藻酸钙多相微载体的制备方法。
技术介绍
细胞培养技术作为研究细胞结构和功能的基础与批量化生产商品型细胞及其产物的重要方法，作用十分关键。微载体培养兼具贴壁培养和悬浮培养的优势，具有很高的比表面积，扩散路径短，易于操作和监控等特点。国内目前常见的微载体类型有实心微载体和多孔微载体。已有的单相微载体培养极大地限制了不同细胞或生物因子等相互作用下的功能表达(周燕等.微载体培养技术的研究与进展[J].中国组织工程研究与临床康复,2010,(16):2945-2948.)。将微载体培养的细胞注入生物体内时，由于体内成型困难和微球游走，其定位性与固定性不强。同时由于生物体内免疫系统的排斥，使其细胞的功能表达明显减少。另外，在选择制造微载体的生物材料时，必须考虑其是否具有良好的生物安全性、生物相容性、生物降解性与可加工性。海藻酸钠，一种天然多糖，具有药物制剂辅料所需的稳定性、溶解性、粘性和安全性。目前海藻酸钠主要用于食品工业、制药业等，而未用于细胞培养方面，特别是多相细胞微载体的构建。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种海藻酸钙多相微载体的制备方法。该方法采用电喷技术，将海藻酸钠水溶液在静电作用下双针头并喷形成均匀液滴，调控承接液氯化钙溶液的浓度，海藻酸钠液滴经螯合作用形成球状微球。本专利技术方法制得的微载体由两相组成，可同时担载多种细胞和多种生长因子，为细胞的共培养创造良好的条件，为组织工程、细胞治疗等奠定良好的基础。实现本专利技术目的的技术解决方案是：一种海藻酸钙多相微载体的制备方法，包括以下步骤：采用双针头并喷的方式，设置电压为8～12kv，接收距离为10～15cm，推进速度为0.8～1.0mL/h，将质量分数为0.2～0.75％的海藻酸钠溶液进行静电喷射，喷出的液滴进入到质量分数为1.0～2.0％的氯化钙溶液中，制得海藻酸钙多相微载体。优选地，所述的海藻酸钠溶液的质量分数为0.5％。优选地，所述的氯化钙溶液的质量分数为1.5％。优选地，针头直径为0.60mm。本专利技术利用海藻酸钠具有形成凝胶的稳定性，采用双针头静电喷射的方法，再加以利用适宜浓度的承接液氯化钙溶液的螯合作用，形成球形水凝胶。本专利技术方法简单，成本低廉，反应条件温和，能够有效调控水凝胶形状、大小及其分相区。本专利技术的海藻酸钙微载体具有多相区域，有利于不同细胞或生物因子等相互作用下的功能表达。附图说明图1为海藻酸钙两相微球的示意图。图2为海藻酸钙两相微球的光学显微镜图。具体实施方式下面结合实施例和附图对本专利技术作进一步详述。实施例1以氯化钙及浓度为0.2％的海藻酸钠为原料制备多相微载体：(1)配制质量分数为0.2％的海藻酸钠溶液，并在磁力搅拌下至溶液澄清均一，然后静置一夜；(2)将1.5克氯化钙溶于100mL水中，溶解混匀用作承接液；(3)在电喷装置中进行电喷，采用两针头并喷，用两支1.0mL针管吸取海藻酸钠溶液，针头直径为0.60mm，电喷参数：在8kv的电压下，接收距离为15cm，以0.8mL/h的推进速度进行电喷，将微球承接于氯化钙承接液中即得到两相微球。(4)取微量朱红色和酞箐蓝丙烯颜料分别加入海藻酸钠溶液中混匀(加入量为5-10mg/mL)，用染色后的海藻酸钠溶液再重复步骤(2)和步骤(3)，即可在显微镜下观察到微球的红、蓝色的两相区域分布。实施例2以氯化钙及浓度为0.5％的海藻酸钠为原料制备多相微载体：(1)配制质量分数为0.5％的海藻酸钠溶液，并在磁力搅拌下至溶液澄清均一，然后静置一夜；(2)将1.5克氯化钙溶于100mL水中，溶解混匀用作承接液；(3)在电喷装置中进行电喷，采用两针头并喷，用两支1.0mL针管吸取已配制好的海藻酸钠溶液，针头直径为0.60mm，电喷参数：在8kv的电压下，接收距离为15cm，以1.0mL/h的推进速度进行电喷，将微球承接于氯化钙承接液中即得到两相微球。(4)取微量朱红色和酞箐蓝丙烯颜料分别加入海藻酸钠溶液中混匀(加入量为5-10mg/mL)，用染色后的海藻酸钠溶液再重复步骤(2)和步骤(3)，即可在显微镜下观察到微球的红、蓝色的两相区域分布。实施例3以氯化钙及浓度为0.75％的海藻酸钠为原料制备多相微载体：(1)配制质量分数为0.75％的海藻酸钠溶液，并在磁力搅拌下至溶液澄清均一，然后静置一夜；(2)将1.5克氯化钙溶于100mL水中，溶解混匀用作承接液。(3)在电喷装置中进行电喷，采用两针头并喷，用两支1.0mL针管吸取已配制好的海藻酸钠溶液，针头直径为0.60mm，电喷参数：在12kv的电压下，接收距离为10cm，以1.0mL/h的推进速度进行电喷，将微球承接于氯化钙承接液中即得到两相微球。(4)取微量朱红色和酞箐蓝丙烯颜料分别加入海藻酸钠溶液中混匀(加入量为5-10mg/mL)，用染色后的海藻酸钠溶液再重复步骤(2)和步骤(3)，即可在显微镜下观察到微球的红、蓝色的两相区域分布。对比例1以氯化钙及浓度为1.5％的海藻酸钠为原料制备多相微载体：(1)配制质量分数为1.5％的海藻酸钠溶液，并在磁力搅拌下至溶液澄清均一，然后静置一夜；(2)将1.5克氯化钙溶于100mL水中，溶解混匀用作承接液。(3)在电喷装置中进行电喷，采用两针头并喷，用两支1.0mL针管吸取已配制好的海藻酸钠溶液，针头直径为0.60mm，电喷参数：在8kv的电压下，接收距离为15cm，以1.0mL/h的推进速度进行电喷，将微球承接于氯化钙承接液中即得到两相微球。在喷射过程中，可以观察到针头喷射液滴断断续续，且微球尺寸较大不易控制。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种海藻酸钙多相微载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：采用双针头并喷的方式，设置电压为8～12kv，接收距离为10～15cm，推进速度为0.8～1.0mL/h，将质量分数为0.2～0.75％的海藻酸钠溶液进行静电喷射，喷出的液滴进入到质量分数为1.0～2.0％的氯化钙溶液中，制得海藻酸钙多相微载体。

【技术特征摘要】
1.一种海藻酸钙多相微载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：采用双针头并喷的方式，设置电压为8～12kv，接收距离为10～15cm，推进速度为0.8～1.0mL/h，将质量分数为0.2～0.75％的海藻酸钠溶液进行静电喷射，喷出的液滴进入到质量分数为1.0～2.0％的氯...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘柯蕊，林辉，冯章启，
申请(专利权)人：南京理工大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32