The invention discloses a screening method for pathogenic bacteria of Clematis leaf spot disease, taking mature Clematis leaves with brown necrotic spots to culture pathogenic bacteria suspension, adding 100 u/mL penicillin PDA medium to prepare primary screening medium, diluting pathogenic bacteria suspension into different concentrations with sterile physiological saline, and coating the primary screening with 1 mL dilution solution. Pathogenic colonies were obtained by incubating 72-76 hours at 24-26 C for 3-5 times in PDA medium containing 10% Clematis juice. The method has strong selectivity, good separation effect and high purification rate.
【技术实现步骤摘要】
一种铁线莲叶斑病致病菌的筛选方法
本专利技术涉及一种园林植物病原菌分离方法,尤其涉及一种铁线莲叶斑病致病菌的分离方法,属于植物保护
技术介绍
铁线莲(ClematisfloridaThunb.)为毛茛科铁线莲属植物,多为木质藤本,是攀援绿化中不可缺少的良好材料,有些铁线莲的花枝、叶枝与果枝,还可作为瓶饰、切花等。近年来,随着城市现代化建设的发展和城市规模的不断扩大,人们的生态意识和环境意识逐渐增强。园林绿化在城市环境中起着重要的作用。要提高城市的绿化覆盖率,改善城市的环境质量,不仅需要平面绿化,还要把平面绿化和垂直绿化有机的结合起来,因此铁线莲作为构成垂直绿化主体的藤本植物之一,可在园林绿化中充分发挥其优势。但铁线莲的叶斑病严重影响其观赏性,筛选并鉴定出导致铁线莲叶斑病的主要病原物,对建立有效的铁线莲叶斑病防治技术具有重要意义。
技术实现思路
专利技术目的:本专利技术的目的在于针对现有技术的不足,提供一种铁线莲叶斑病致病菌的筛选方法,该方法分离周期短,纯化率高。为解决上述技术问题,本专利技术所采用的技术手段为:一种铁线莲叶斑病致病菌的筛选方法,包括如下步骤:步骤1,致病菌悬液的制备:取带有叶斑的铁线莲叶片,切碎后置无菌生理盐水中,混合物溶液的浓度为20~25%,于一定温度下培养得到致病菌悬液;步骤2,初筛培养基的制备:往PDA培养基中加入100u/mL青霉素,混合均匀后,灭菌,得到初筛培养基;步骤3,致病菌落群培养:将步骤1中的致病菌悬液用无菌生理盐水梯度稀释成各个浓度的稀释液,每个浓度下取1mL稀释液涂布于步骤2的初筛培养基上进行培养,获得致病菌落 ...
【技术保护点】
1.一种铁线莲叶斑病致病菌的筛选方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤1,致病菌悬液的制备:取带有叶斑的铁线莲叶片,切碎后置无菌生理盐水中,混合物溶液的浓度为20~25%,于一定温度下培养得到致病菌悬液;步骤2,初筛培养基的制备:往PDA培养基中加入100u/mL青霉素,混合均匀后,灭菌,得到初筛培养基;步骤3,致病菌落群培养:将步骤1中的致病菌悬液用无菌生理盐水梯度稀释成各个浓度的稀释液,每个浓度下取1mL稀释液涂布于步骤2的初筛培养基上进行培养,获得致病菌落群;步骤4,单菌落培养:挑取初筛培养基上长出的菌落,接种至含铁线莲汁的培养基中进行纯培养,反复分:3~5次,获得的单一菌落为致病菌落;步骤5:从初筛菌种中筛选出铁线莲叶斑病致病菌,再进行鉴定,确定致病菌的种类。
【技术特征摘要】
1.一种铁线莲叶斑病致病菌的筛选方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤1,致病菌悬液的制备:取带有叶斑的铁线莲叶片,切碎后置无菌生理盐水中,混合物溶液的浓度为20~25%,于一定温度下培养得到致病菌悬液;步骤2,初筛培养基的制备:往PDA培养基中加入100u/mL青霉素,混合均匀后,灭菌,得到初筛培养基;步骤3,致病菌落群培养:将步骤1中的致病菌悬液用无菌生理盐水梯度稀释成各个浓度的稀释液,每个浓度下取1mL稀释液涂布于步骤2的初筛培养基上进行培养,获得致病菌落群;步骤4,单菌落培养:挑取初筛培养基上长出的菌落,接种至含铁线莲汁的培养基中进行纯培养,反复分:3~5次,获得的单一菌落为致病菌落;步骤5:从初筛菌种中筛选出铁线莲叶斑病致病菌,再进行鉴定,确定致病菌的种类。2.根据权利要求1所述的铁线莲叶斑病致病菌的筛选方法,其特征在于:步骤1中,致病菌悬液的培养条件为:于25℃,2500r...
【专利技术属性】
技术研发人员:宋微,王磊,张虎,杨广荣,周莉,刘梦,
申请(专利权)人:江苏农林职业技术学院,
类型:发明
国别省市:江苏,32
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