本发明专利技术公开了一种厌氧菌菌种保藏的有氧操作方法及其装置，所述的厌氧菌菌种保藏的有氧操作方法其使用的装置设有注射器、保藏管；所述的注射器包括注射件、注射管和注射针，所述的保藏管包括管体、管盖和接种管，所述厌氧菌菌种保藏的有氧操作方法包括无菌保藏管的制备、无菌保护剂的制备、菌种培养、保藏管内保护剂的注入、菌种低温保藏和活化等步骤。
Aerobic operation method and device for preservation of anaerobic bacteria strain
The invention discloses an aerobic operation method and its device for the preservation of anaerobic bacteria. The aerobic operation method for the preservation of anaerobic bacteria is provided with a syringe and a preservation tube; the syringe comprises an injection piece, an injection tube and an injection needle, and the preservation tube comprises a tube body, a tube cover and a seed tube. The aerobic operation method of anaerobic bacteria preservation includes the preparation of aseptic preservation tube, the preparation of aseptic protectant, the culture of bacteria, the injection of protectant in preservation tube, the low temperature preservation and activation of bacteria.
【技术实现步骤摘要】
一种厌氧菌菌种保藏的有氧操作方法及其装置
本专利技术涉及一种厌氧菌菌种保藏的有氧操作方法及其装置。
技术介绍
厌氧菌是一类需要在无分子氧条件下才能正常生长繁殖的微生物，在自然界中分布广泛，种类繁多。对厌氧菌菌种资源进行长期有效的保藏是这类资源实施有效共享的前提，其保藏技术的关键是要使该类微生物处于无氧环境中。菌种保藏技术是微生物研究、食品微生物检测等方面必不可少的基础技术，菌种保藏通常选择适宜菌龄的健壮繁殖体，保存于低温﹑隔氧﹑干燥﹑避光等环境中﹐尽量降低或停止微生物的代谢活动﹐减慢或停止生长繁殖，以在较长时期内保持菌株的性状和活力。目前菌种保藏方法主要包括定期移植法、矿油封藏法、沙土管法、麸皮法、液体干燥法、冷冻真空干燥法、低温冻结法、磁珠冷冻法等，但是上述方法应用于厌氧菌的保藏时，需要采用亨盖特厌氧技术或在厌氧操作箱内进行，还需要特制的无菌氮气。对于普通企业的发酵实验室，很难创造无菌且厌氧的实验环境，且菌种的厌氧保藏管在活化后难以排除氧气的干扰，只能废弃，造成利用率低。因此有必要进行改革创新。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种结构简单、操作便捷的厌氧菌菌种保藏的有氧操作方法及其装置，为达到该目的，本专利技术采用的技术方案是：本专利技术的厌氧菌菌种保藏的有氧操作方法及其装置，所述的厌氧菌菌种保藏的有氧操作方法其使用的装置设有注射器、保藏管；所述的注射器设有注射件、注射管和注射针；所述的注射件包括活塞和活塞管,活塞的外径与活塞管内径对应并置入活塞管中，可沿活塞管作上下运动；活塞与活塞杆连接，活塞杆顶端设有手柄，手柄为平台,并与活塞杆构成丅形；活塞管底部直通固定管，固定管与固定套连接，活塞管顶端突出形成提手，提手与活塞管成“L”形；所述的注射管由细长软管制成，注射管两端分别设有固定套和管针套，管针套连接注射针；在注射管靠近固定套的一端，设有至少一条第一标线，在注射管靠近管针套的一端，设有至少一条第二标线；所述的注射针呈细长管状，顶端膨大形成针尾，针尾连接管针套，注射针底端为针头；所述注射针的长度大于所述管体的长度；所述固定管与固定套的连接，使固定管直通注射管；所述管针套与注射针的连接，使注射管直通注射针；所述的保藏管设有管体、管盖、以及置于管体内的至少一个接种管；所述的管体呈圆柱形，底部封闭，上端开口，所述管体的上端在外壁设有第二螺纹，所述管体的外壁设有至少一条刻度线；所述的管盖呈圆柱形，上端封闭，底部开口，内测设有第一螺纹；所述第一螺纹与第二螺纹的配合，可将所述的管盖紧密固定于所述的管体；所述的接种管呈细长圆柱形，底端设有至少一个开口，开口上方设有至少一个封隔层，开口下方凹陷形成集液池；依据上述装置进行厌氧菌菌种保藏的有氧操作方法包括以下步骤：a.根据待保藏的菌种选择适宜的液体培养基，取适量注入所述保藏管的管体，再取液体石蜡至管体内，液体石蜡层的高度大于1cm，并确保管体内置有至少一个接种管，将管盖松弛旋置于管体后，于适宜条件下高压蒸汽灭菌，灭菌后将保藏管迅速转移至洁净环境中、旋紧管盖后冷却备用；b．配置浓度为50%的甘油溶液至适宜容器内，再注入适量液体石蜡，并使液体石蜡层的高度大于1cm，容器封口后置于121℃条件下高压蒸汽灭菌30min，之后迅速转移至洁净环境中，冷却，制成保护剂存储瓶，备用；c.向备用的保藏管内液体培养基中，接种待保藏的菌种，然后将保藏管转移至适宜条件下培养；d．培养结束后，于洁净环境中，取出无菌注射器的注射针，置于保护剂存储瓶中，所述的针头停留于液体石蜡处，抽动所述注射件的手柄，使液体石蜡经注射管流入活塞管，待活塞管内液体石蜡层的高度大于1cm时，将注射针的针头由液体石蜡层移动至甘油溶液处，继续抽动手柄，抽取与液体培养基等体积的甘油溶液至活塞管，再将注射针的针头由甘油溶液层移动至液体石蜡层处，继续抽动手柄，当注射管内的液体石蜡与甘油溶液的接触面移动至注射管的第一标线处时，停止抽动手柄，静置片刻，待注射管内的液体不再流动时，将注射针自保护剂存储瓶中取出；操作过程中注射器始终保持正置；e．将注射针插入保藏管内，使所述的针头停留于液体石蜡层处，推动手柄，将液体石蜡由注射管注入保藏管内，当注射管内的液体石蜡与甘油溶液的接触面移动至注射管的第二标线处时，将注射针的针头由液体石蜡层移动至液体培养基层，继续推动手柄，将甘油溶液注入液体培养基中，当注射管内的液体石蜡与甘油溶液的接触面移动至注射管的第二标线处时，停止推动手柄，轻轻旋转搅动注射针，将甘油溶液与液体培养基搅拌均匀，将注射针自保藏管内取出后，旋紧保藏管的管盖；操作过程中注射器始终保持正置，保藏管始终保持正置；f．将保藏管正置于低温冷冻环境中保藏；g．菌种需要活化转接时，将保藏管自冷冻环境中取出解冻后，轻轻取出一个接种管，将接种管的集液池内的液体转移至适宜的培养基中，之后丢弃接种管，并将保藏管再次正置于低温冷冻环境中保藏备用；将接种的培养基置于适宜的条件培养；h．所述的保藏管和保护剂存储瓶在制备、灭菌、保藏和使用过程中始终保持正置。与现有技术比较，采用本专利技术的技术方案，可以在普通含氧气的环境下，完成厌氧微生物菌种的保藏，每只保藏管可以多次使用，多次活化目标菌株，且不需要专用的厌氧设备，使厌氧微生物的菌种保藏工作更方便快捷。本专利技术的有益效果是：注射器和保藏管的配合使用，采用厌氧菌菌种保藏的有氧操作方法，可以在普通含氧气的环境下，完成厌氧菌菌种的保藏。且保藏管内置有多个接种管，可以多次活化目标菌种。因此使厌氧菌的菌种保藏工作更加便捷，且不需要专用的厌氧设备。可以加强厌氧微生物资源的安全与质量管理，以达到保护、利用和实现资源共享的目的。附图说明为了更清楚的说明本专利技术的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单的介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。图1是本专利技术的注射器和保藏管配合使用时的结构示意图；图2是本专利技术的保藏管的结构示意图;图3是本专利技术的接种管底部的局部放大截面图；图中：1—注射件，11—手柄，12—活塞杆，13—提手，14—活塞管，15—活塞，16—固定管，2—注射管，21—固定套，22—管针套，23—第一标线，24—第二标线，3—注射针，31—针尾，32—针头，4—保藏管盖，41—第一螺纹，5—保藏管体，51—第二螺纹，52—刻度线，6—接种管，61—封隔层，62—开口，63—集液池。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清晰，以下结合附图和实施例，对本专利技术进行进一步的详细说明，应当理解，所描述的实施例仅仅用以解释本专利技术，不用于限定本专利技术。凡是基于本专利技术的技术方案所作的简化或者等同变化，均属于本专利技术的保护范围。实施例1：本专利技术公开了一种厌氧菌菌种保藏的有氧操作方法及其装置，当本专利技术被应用于婴儿双歧杆菌（菌株编号：CICC6069）的菌株保藏时，采用以下技术方案以达到本专利技术的有益效果：所述的厌氧菌菌种保藏的有氧操作方法其使用的装置设有注射器、保藏管；所述的注射器包括注射件1、注射管2和注射针3；所述的注射件1包括活塞15和活塞管14,活塞15的外径与活塞管14内径对应并置入活塞管15中，可沿活塞管本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种厌氧菌菌种保藏的有氧操作方法及其装置，其特征在于，所述的厌氧菌菌种保藏的有氧操作方法其使用的装置设有注射器、保藏管；所述的注射器设有注射件、注射管和注射针；所述的注射件包括活塞和活塞管,活塞的外径与活塞管内径对应并置入活塞管中，可沿活塞管作上下运动；活塞与活塞杆连接，活塞杆顶端设有手柄，手柄为平台,并与活塞杆构成丅形；活塞管底部直通固定管，固定管与固定套连接，活塞管顶端突出形成提手，提手与活塞管成 “L”形；所述的注射管由细长软管制成，注射管两端分别设有固定套和管针套，管针套连接注射针；在注射管靠近固定套的一端，设有至少一条第一标线，在注射管靠近管针套的一端，设有至少一条第二标线；所述的注射针呈细长管状，顶端膨大形成针尾，针尾连接管针套，注射针底端为针头；所述注射针的长度大于所述管体的长度；所述固定管与固定套的连接，使固定管直通注射管；所述管针套与注射针的连接，使注射管直通注射针；所述的保藏管设有管体、管盖、以及置于管体内的至少一个接种管；所述的管体呈圆柱形，底部封闭，上端开口，所述管体的上端在外壁设有第二螺纹，所述管体的外壁设有至少一条刻度线；所述的管盖呈圆柱形，上端封闭，底部开口，内测设有第一螺纹；所述第一螺纹与第二螺纹的配合，可将所述的管盖紧密固定于所述的管体；所述的接种管呈细长圆柱形，底端设有至少一个开口，开口上方设有至少一个封隔层，开口下方凹陷形成集液池；依据上述装置进行厌氧菌菌种保藏的有氧操作方法包括以下步骤：a.根据待保藏的菌种选择适宜的液体培养基，取适量注入所述保藏管的管体，再取液体石蜡至管体内，液体石蜡层的高度大于1 cm，并确保管体内置有至少一个接种管，将管盖松弛旋置于管体后，于适宜条件下高压蒸汽灭菌，灭菌后将保藏管迅速转移至洁净环境中、旋紧管盖后冷却备用；b．配置浓度为50 %的甘油溶液至适宜容器内，再注入适量液体石蜡，并使液体石蜡层的高度大于1 cm，容器封口后置于121 ℃条件下高压蒸汽灭菌30 min，之后迅速转移至洁净环境中，冷却，制成保护剂存储瓶，备用；c.向备用的保藏管内液体培养基中，接种待保藏的菌种，然后将保藏管转移至适宜条件下培养；d．培养结束后，于洁净环境中，取出无菌注射器的注射针，置于保护剂存储瓶中，所述的针头停留于液体石蜡处，抽动所述注射件的手柄，使液体石蜡经注射管流入活塞管，待活塞管内液体石蜡层的高度大于1 cm时，将注射针的针头由液体石蜡层移动至甘油溶液处，继续抽动手柄，抽取与液体培养基等体积的甘油溶液至活塞管，再将注射针的针头由甘油溶液层移动至液体石蜡层处，继续抽动手柄，当注射管内的液体石蜡与甘油溶液的接触面移动至注射管的第一标线处时，停止抽动手柄，静置片刻，待注射管内的液体不再流动时，将注射针自保护剂存储瓶中取出；操作过程中注射器始终保持正置；e．将注射针插入保藏管内，使所述的针头停留于液体石蜡层处，推动手柄，将液体石蜡由注射管注入保藏管内，当注射管内的液体石蜡与甘油溶液的接触面移动至注射管的第二标线处时，将注射针的针头由液体石蜡层移动至液体培养基层，继续推动手柄，将甘油溶液注入液体培养基中，当注射管内的液体石蜡与甘油溶液的接触面移动至注射管的第二标线处时，停止推动手柄，轻轻旋转搅动注射针，将甘油溶液与液体培养基搅拌均匀，将注射针自保藏管内取出后，旋紧保藏管的管盖；操作过程中注射器始终保持正置，保藏管始终保持正置；f．将保藏管正置于低温冷冻环境中保藏；g． 菌种需要活化转接时，将保藏管自冷冻环境中取出解冻后，轻轻取出一个接种管，将接种管的集液池内的液体转移至适宜的培养基中，之后丢弃接种管，并将保藏管再次正置于低温冷冻环境中保藏备用；将接种的培养基置于适宜的条件培养；h． 所述的保藏管和保护剂存储瓶在制备、灭菌、保藏和使用过程中始终保持正置。...
【技术特征摘要】
1.一种厌氧菌菌种保藏的有氧操作方法及其装置，其特征在于，所述的厌氧菌菌种保藏的有氧操作方法其使用的装置设有注射器、保藏管；所述的注射器设有注射件、注射管和注射针；所述的注射件包括活塞和活塞管,活塞的外径与活塞管内径对应并置入活塞管中，可沿活塞管作上下运动；活塞与活塞杆连接，活塞杆顶端设有手柄，手柄为平台,并与活塞杆构成丅形；活塞管底部直通固定管，固定管与固定套连接，活塞管顶端突出形成提手，提手与活塞管成“L”形；所述的注射管由细长软管制成，注射管两端分别设有固定套和管针套，管针套连接注射针；在注射管靠近固定套的一端，设有至少一条第一标线，在注射管靠近管针套的一端，设有至少一条第二标线；所述的注射针呈细长管状，顶端膨大形成针尾，针尾连接管针套，注射针底端为针头；所述注射针的长度大于所述管体的长度；所述固定管与固定套的连接，使固定管直通注射管；所述管针套与注射针的连接，使注射管直通注射针；所述的保藏管设有管体、管盖、以及置于管体内的至少一个接种管；所述的管体呈圆柱形，底部封闭，上端开口，所述管体的上端在外壁设有第二螺纹，所述管体的外壁设有至少一条刻度线；所述的管盖呈圆柱形，上端封闭，底部开口，内测设有第一螺纹；所述第一螺纹与第二螺纹的配合，可将所述的管盖紧密固定于所述的管体；所述的接种管呈细长圆柱形，底端设有至少一个开口，开口上方设有至少一个封隔层，开口下方凹陷形成集液池；依据上述装置进行厌氧菌菌种保藏的有氧操作方法包括以下步骤：a.根据待保藏的菌种选择适宜的液体培养基，取适量注入所述保藏管的管体，再取液体石蜡至管体内，液体石蜡层的高度大于1cm，并确保管体内置有至少一个接种管，将管盖松弛旋置于管体后，于适宜条件下高压蒸汽灭菌，灭菌后将保藏管迅速转移至洁净环境中、旋紧管盖后冷却备用；b．配置浓度为50%的甘油溶液至适宜容器内，再注入适量液体石蜡...
【专利技术属性】
技术研发人员：韩涛，孟鹏，戴明，高宇，柯振华，张静霞，张芳，
申请(专利权)人：福建省产品质量检验研究院，
类型：发明
国别省市：福建,35
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