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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种测定运动营养食品中β-羟基-β-甲基丁酸钙含量的方法。
技术介绍
1、β-羟基-β-甲基丁酸(β-hydroxy-β-methylbutyrate, hmb)是一个含五碳的有机酸,是亮氨酸在体内通过其代谢产物α-酮异己酸产生的一种衍生物。hmb具有促进肌肉蛋白质合成、抑制肌肉蛋白质分解、维持瘦体重、提高运动能力、维护细胞膜完整性、提高免疫功能和降低炎症反应等作用。但由于 hmb性质活泼,在工业化生产中hmb 通常转化合成为钙盐即β-羟基-β-甲基丁酸钙(calcium β-hydroxy-βmethylbutyrate, cahmb),以便于储存和使用。目前主要运用于动物营养、运动营养和功能性食品中。在gb 24154—2015《食品安全国家标准运动营养食品通则》中,将cahmb列为动营养食品中建议添加的成分之一,但是未见有参考检验方法。因此,专利技术一种测定运动营养食品中β-羟基-β-甲基丁酸钙含量的方法具有重要的现实意义。
技术实现思路
1、专利技术的目的在于提供一种测定运动营养食品中β-羟基-β-甲基丁酸钙含量的方法,用于弥补和解决目前尚无运动营养食品中β-羟基-β-甲基丁酸钙含量检测方法的不足,使得该方法能够针对运动营养食品中β-羟基-β-甲基丁酸钙含量进行准确分析。
2、为实现上述目的,本专利技术采用如下技术方案:
3、该方法是一种能够实现运动营养食品中β-羟基-β-甲基丁酸钙含量的检测方法,其主要特点是,本专利技术是一种运动营养
4、(1)制备标准储备液和标准工作液,所述标准储备液为1.05 mg/ml的标准储备液,标准工作液为将β-羟基-β-甲基丁酸钙的标准储备液采用逐级稀释法用0.1 mol/l盐酸溶液配制浓度为21.0 μg/ml、52.5 μg/ml、105 μg/ml、210 μg/ml、525 μg/ml、1050 μg/ml的系列标准工作溶液。
5、(2)制备待测样品:将待测样品置于25 ml比色管中,加入20 ml0.1 mol/l盐酸溶液涡旋混匀,置于超声振荡器中超声30 min,放置至室温后加入1 ml100 g/l亚铁氰化钾溶液和1 ml200 g/l乙酸锌溶液,用0.1 mol/l盐酸溶液定容至刻度线并摇匀,于4500 r/min离心5 min,取适量上清液过0.45μm水相滤膜,待液相色谱测定;
6、(3)所用仪器为高效液相色谱仪,检测器为光电二极管阵列检测器;色谱柱为反向c18柱;流动相:a相为0.1%磷酸水溶液,b相为甲醇;等度洗脱:0.1%磷酸水溶液(a)/甲醇(b)=90/10;运行时间:20min;柱温:30℃;进样量:20μl;流速:1.0 ml/min;检测波长为210nm;
7、(4)标准曲线的绘制:将β-羟基-β-甲基丁酸钙的系列标准工作溶液注入高效液相色谱仪中,在步骤(3)的色谱条件下进行检测,以保留时间定性,根据各浓度所测峰面积的大小与其浓度的对应关系绘制标准曲线;
8、(5)结果分析:取(2)中样品滤液注入高效液相色谱仪中,在步骤(3)的色谱条件下进行检测,测得样品中β-羟基-β-甲基丁酸钙的峰面积,以保留时间定性,根据(4)中制作的标准曲线定量,计算出待测样品中β-羟基-β-甲基丁酸钙的含量。
9、与现有技术相比较,本专利技术具有以下突出优点:
10、1.本专利技术填补了运动营养食品中β-羟基-β-甲基丁酸钙含量检测领域空白,急需建立新的技术来满足运动营养食品中β-羟基-β-甲基丁酸钙含量的检测需求。
11、2.本专利技术选择c18柱为固定相,发现常见流动相为乙腈水或甲醇水时,β-羟基-β-甲基丁酸钙的峰形、分离度及对称性较差,为解决此问题,通过不断摸索,选择0.1%磷酸作为流动相水溶液,同时不断优化流动相水溶液和有机相组成和比例,最终研究得出适合本专利技术β-羟基-β-甲基丁酸钙含量分离的色谱条件,使得目标物和杂质能够完全分离,同时获得最佳的峰形、分离度及对称性。
12、3.本专利技术所使用的分析仪器为高效色谱仪配备有光电二极管阵列检测器,是市场易购通用仪器,相对于液质联用仪等造价高昂的仪器,更加易于方法普及和推广应用。
13、本专利技术建立了高效色谱法测定运动营养食品中β-羟基-β-甲基丁酸钙含量。该方法简单快速,重现性好,适用于运动营养食品中β-羟基-β-甲基丁酸钙含量的定量检测,可为相关生产企业、监督部门及进出口检测部门提供技术支持。
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1.一种测定运动营养食品中β-羟基-β-甲基丁酸钙含量的方法,其特征在于,所述的检测方法包括:
2.根据权利要求1所述运动营养食品中β-羟基-β-甲基丁酸钙含量的测定方法,其特征在于,(1)中所述标准储备液的配制具体步骤为:取盐酸 (36%~38%)8.3 mL,小心注入适量水中并用水稀释至1000 mL,混匀,配制成0.1 mol/L盐酸溶液,准确称取β-羟基-β-甲基丁酸钙对照品0.05348g,用0.1 mol/L盐酸溶液溶解并定容至50mL,配制得浓度为1.05mg/mL标准储备液;(1)中所述标准工作溶液的配制具体步骤为:将β-羟基-β-甲基丁酸钙的标准储备液采用逐级稀释法用0.1 mol/L盐酸溶液配制浓度为21.0 μg/mL、52.5 μg/mL、105 μg/mL、210 μg/mL、525 μg/mL、1050 μg/mL的系列标准工作溶液,所有标准储备液和标准工作溶液置于冰箱4℃温度下保存。
3.根据权利要求1所述运动营养食品中β-羟基-β-甲基丁酸钙含量的测定方法,其特征在于,(2)中所述的待测样品溶液的制备具体步骤为:称取待测样品
4.根据权利要求1所述运动营养食品中β-羟基-β-甲基丁酸钙含量的测定方法,其特征在于,(3)中所述反相C18色谱柱规格为250mm×4.6mm内径,颗粒粒径5μm。
5.根据权利要求1所述运动营养食品中β-羟基-β-甲基丁酸钙含量的测定方法,其特征在于,(4)中所述标准曲线系数不小于0.999。
...【技术特征摘要】
1.一种测定运动营养食品中β-羟基-β-甲基丁酸钙含量的方法,其特征在于,所述的检测方法包括:
2.根据权利要求1所述运动营养食品中β-羟基-β-甲基丁酸钙含量的测定方法,其特征在于,(1)中所述标准储备液的配制具体步骤为:取盐酸 (36%~38%)8.3 ml,小心注入适量水中并用水稀释至1000 ml,混匀,配制成0.1 mol/l盐酸溶液,准确称取β-羟基-β-甲基丁酸钙对照品0.05348g,用0.1 mol/l盐酸溶液溶解并定容至50ml,配制得浓度为1.05mg/ml标准储备液;(1)中所述标准工作溶液的配制具体步骤为:将β-羟基-β-甲基丁酸钙的标准储备液采用逐级稀释法用0.1 mol/l盐酸溶液配制浓度为21.0 μg/ml、52.5 μg/ml、105 μg/ml、210 μg/ml、525 μg/ml、1050 μg/ml的系列标准工作溶液,所有标准储备液和标准工作溶液置于冰箱4℃温度下保存。<...
【专利技术属性】
技术研发人员:蔡小明,黄何何,郑秋萍,戴明,何孟杭,吴少明,
申请(专利权)人:福建省产品质量检验研究院,
类型:发明
国别省市:
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