The invention discloses a method for improving the storage time of wheat powdery mildew fungi in vitro, which belongs to the application technical field of plant pathogen specific parasitic fungi preservation method. The wheat powdery mildew fungus is a plant pathogen-specific parasitic fungus, which needs the existence of the wheat leaf host to survive. Although the inventor has discovered a method for preserving the wheat powdery mildew fungus in vitro without the host, the method has the shortcomings of short storage time, needing to collect a large number of conidia, etc. The spores of wheat powdery mildew were suspended in perfluoroalkane solution by inoculation. The preservation time in vitro of the spores of wheat powdery mildew was six times longer than that of the original method, extending from one year to six years, and the required spore mass was reduced by four times. This method overcomes the shortcomings of the existing methods, and can fully guarantee the smooth development of research work on wheat powdery mildew pathogens.
【技术实现步骤摘要】
一种提高小麦白粉菌离体保存时间的方法
本专利技术属于植物病原专性寄生菌保存方法的应用
,具体涉及一种提高小麦白粉菌离体保存时间的方法。
技术介绍
小麦白粉病是由白粉菌(Blumeriagraminisf.sp.tritici,Bgt)引起的真菌病害,其病原菌是专化型的活体寄生菌,不能在人工培养基上生长,病菌的繁殖转接均需在小麦活体幼苗上每隔10天左右进行一次;此外,小麦白粉病菌分生孢子的繁殖收集耗时长,工作量大,另一方面往往会产生交互污染,致使特定致病性菌株的丢失。因此,建立长期保存方法可用于病菌种群遗传多样性、分子抗药性监测等研究。近年,对于白粉病菌的离体长期保存也开展了一些相关研究,如喻大昭等在“一种小麦白粉病菌菌株的长期保存方法(CN201310180918.4)”的专利中公开,采用硅胶干燥、低温冷冻保存方法,可以长期保存1年,但是该方法存在两个明显的不足:1)保存的时间较短,仅可保存1年;2)需要的分子孢子的质量较多(20mg),收集分生孢子耗费较多的工作量。龚双军等在“一种小麦白粉菌喷雾接种方法(申请号:201710716834.6)中公开,采用C5-18-全氟烷(FC-40)溶液能够使小麦白粉病菌分子孢子喷雾接种更均匀,进行精确定量的接种;同时,该专利技术中也指出,由于使用无菌水配制白粉菌孢子悬浮液,小麦白粉菌的分生孢子在6-8h内可保持外形不变,10h后会因吸水而胀裂而死亡,而该方法采用电子氟化液作为悬浮孢子的载体,在悬浮液中分子孢子的形态和发芽率可以保持在12h,最长可以达到24h。但该专利技术中并未发现电子氟化液可以延长小麦白粉病菌 ...
【技术保护点】
1.一种提高小麦白粉菌离体保存时间的方法,其特征在于:该方法包括如下步骤:(1)分生孢子的收集及硅胶干燥:将预先培养好的小麦白粉菌培养皿倒扣在硫酸纸上,用镊子敲打2‑3次,将分生孢子收集到无菌离心管中,将3‑4块的硅胶颗粒置于离心管中,置于23℃下干燥5h,密封后置于‑70℃超低温冰箱保存;(2)菌株的复活接种:从‑70℃超低温冰箱中取出步骤(1)保存的离心管,移去离心管中的硅胶颗粒,用C5‑18‑全氟烷悬浮分生孢子粉,制成接种体悬浮液,使用震荡器振荡15s,使孢子在溶液中悬浮均匀,最后用毛笔将孢子悬浮液均匀的涂抹到叶片上。
【技术特征摘要】
1.一种提高小麦白粉菌离体保存时间的方法,其特征在于:该方法包括如下步骤:(1)分生孢子的收集及硅胶干燥:将预先培养好的小麦白粉菌培养皿倒扣在硫酸纸上,用镊子敲打2-3次,将分生孢子收集到无菌离心管中,将3-4块的硅胶颗粒置于离心管中,置于23℃下干燥5h,密封后置于-70℃超低温冰箱保存;(2)菌株的复活接种:从-70℃超低...
【专利技术属性】
技术研发人员:杨立军,龚双军,薛敏锋,向礼波,史文琦,曾凡松,刘美玲,陈婷婷,喻大昭,
申请(专利权)人:湖北省农业科学院植保土肥研究所,
类型:发明
国别省市:湖北,42
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