具有预防或治疗中枢神经系统疾病作用的肽和包含其作为活性成分的用于预防和治疗中枢神经系统疾病的药物组合物技术方案

本发明专利技术具有能够以优异效率渗透未曾显著渗透的中枢神经系统的血脑屏障和血脊髓屏障的功能，由此能够通过低剂量施用获得迅速、快速且更加有效的治疗效果。此外，本发明专利技术能够实现不同于常规治疗剂的局部施用，从而减少副作用，并且能够以高浓度局部施用治疗剂，从而潜在地能够实现新的治疗和处方。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有预防或治疗中枢神经系统疾病作用的肽和包含其作为活性成分的用于预防和治疗中枢神经系统疾病的药物组合物
本专利技术涉及具有预防或治疗中枢神经系统疾病的作用的肽和包含其作为活性成分的用于预防或治疗中枢神经系统疾病的药物组合物。
技术介绍
多发性硬化(MS)是一种人自身免疫病，其由穿过血脑屏障(BBB)的保护性环境的髓鞘特异性T细胞在中枢神经系统(cCNS)中诱导炎症引起。作为MS的小鼠模型，已广泛研究了通过MOG35-55免疫接种诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)和表达干扰素-γ(IFN-γ)或白介素-17A(IL-17A)的辅助性T细胞1(Th1)或辅助性T细胞17(Th17)。在Th1和Th17细胞的高水平下，这些细胞在包括脑和脊髓的中枢神经系统中诱导炎症和神经细胞坏死。虽然这些效应细胞可以是潜在的治疗靶标，但是由于BBB和血脊髓屏障(BSCB)，多种治疗性生物分子不能转移到中枢神经系统并且不可避免地因此无法表现出治疗效果(非专利文件1和2)。因此，克服这一现象的多种方法已经被开发。然而，开发的治疗性生物分子来源于合成化合物或其他生物体并且由于长期毒性或其他副作用以及被BBB和BSCB限制渗透而因此仍具有无法表现出足够治疗效果的问题。例如，已经报道了与改善对血脑屏障之渗透的基于肽的渗透剂或药物载体相关的常规专利文件。例如，韩国专利No.10-0242597公开了血脑屏障渗透剂，其包含具有NH2-精氨酸-脯氨酸-羟脯氨酸-甘氨酸-噻吩丙氨酸-丝氨酸-脯氨酸-4-Me-酪氨酸(CH2NH)-精氨酸-COOH的氨基酸序列的肽或其具有预定修饰的结构类似物(专利文件1)，并且韩国专利特许No.10-2014-0026372公开了由预定序列表所示并且能够渗透血脑屏障的氨基酸序列(专利文件2)。
技术实现思路
技术问题因此，本专利技术是基于以上问题而做出的，并且本专利技术的一个目的是提供能够有效地穿过血脑屏障或血脊髓屏障并且对IL-2具有优异抑制活性的肽、包含其的药物组合物和使用其来预防或治疗疾病的方法。技术方案根据本专利技术，上述和其他目的可通过提供具有由序列IDNo.1所示的氨基酸序列对IL-2具有抑制活性的肽来实现。根据本专利技术的另一个方面，提供了对IL-2具有抑制活性的肽，其包含由序列IDNo.2或3所示的CTLA-4蛋白中胞质结构域的片段，或者两个或更多个所述片段的融合肽。融合肽可以具有由序列IDNo.4所示的氨基酸序列。根据本专利技术的另一个方面，提供了融合产物，其包含：具有由序列IDNo.1所示的氨基酸序列的肽、其片段、或者两个或更多个所述片段的融合肽；和细胞渗透肽。所述片段可以具有由序列IDNo.2或序列IDNo.3所示的氨基酸序列。所述融合肽可以具有由序列IDNo.4所示的氨基酸序列。细胞渗透肽可以包括选自以下的任一种：HIV-1tat(47-57)、D-氨基酸取代的HIV-1tat(48-60)、精氨酸取代的HIV-1tat(48-60)、果蝇触角足肽(DrosophilaAntennapaedia)(43-58)、包含7个或更多个氨基酸的病毒RNA结合肽、包含7个或更多个精氨酸的DNA结合肽、包含6至8个精氨酸的聚精氨酸多肽、包含7至11个赖氨酸的多肽、具有由序列IDNo.5所示的氨基酸序列的dNP2蛋白、Hph-1(序列IDNo.6)、Transportan(序列IDNo.8)、Pep-1(序列IDNo.9)、pVEC(序列IDNo.10)、M918(序列IDNo.11)、TP10(序列IDNo.12)、VP22(序列IDNo.13)、Buforin2(序列IDNo.14)、KALA(序列IDNo.15)、CL22(序列IDNo.16)和响尾蛇胺(Crotamine)(序列IDNo.17)。细胞渗透肽可以是氨基酸序列由序列IDNo.5所示的dNP2蛋白。根据本专利技术的另一个方面，提供了包含编码融合产物的基因的重组表达载体。根据本专利技术的另一个方面，提供了用于预防或治疗中枢神经系统疾病的药物组合物，其包含所述融合产物作为活性成分。在融合产物中的细胞渗透肽可以具有渗透血脑屏障或血脊髓屏障的活性。中枢神经系统疾病可以包括选自以下的任一种：脊髓损伤、卒中、脑梗死、脑缺血、阿尔茨海默病和多发性硬化。根据本专利技术的另一个方面，提供了通过向对象施用药物组合物来在动物中预防或治疗中枢神经系统疾病的方法，所述动物不包括人。专利技术效果根据本专利技术，在高度有效地渗透过去不能显著渗透的中枢神经系统的血脑屏障和血脊髓屏障的功能和与此同时IL-2抑制活性下，可以以甚至更低的剂量更快速地实现更有效的治疗效果。此外，与常规的治疗剂相比，本专利技术由于可能的局部施用而可减少副作用，并且由于高浓度治疗剂的可能局部施用而可提供潜在新的治疗和处方。附图简述本专利技术的以上和其他目的、特征和其他优点将从以下详细描述并结合附图更清楚地理解，在附图中：图1A示出了根据本专利技术的CTLA-4蛋白中胞质结构域的片段和变化部分的鉴定结果；图1B示出了根据本专利技术的人来源细胞渗透肽dNP2的鉴定结果；图2示出了根据本专利技术的dNP2-ctCTLA-4融合蛋白的结构和使用SDS-PAGE对dNP2-ctCTLA-4融合蛋白的分析结果；图3是示出了ctCTLA-4肽以及dNP2-ctCTLA-4和Hph-1-ctCTLA-4融合产物在原代小鼠CD4T细胞中的细胞内转移效率的图；图4是示出了1μMPBS、dNP2-ctCTLA-4融合产物和TAT-ctCTLA-4融合产物的IL-2表达抑制效率的图。数值代表平均值±s.e.m，并且*代表p＜0.05，**代表p＜0.01且***代表p＜0.001；学生t检验；图5A和5B是示出了dNP2-ctCTLA-4融合产物和dNP2-EGFP融合产物的IL-2表达抑制效率的图。数值代表平均值±s.e.m，并且*代表p＜0.05，**代表p＜0.01且***代表p＜0.001；学生t检验；图6A是示出了dNP2-ctCTLA-4融合产物和dNP2-EGFP融合产物的IFN-γ表达抑制效率的图，并且图6B是示出了dNP2-ctCTLA-4融合产物和dNP2-EGFP融合产物的IL-17A表达抑制效率的图。数值代表平均值±S.e.m，并且*代表p＜0.05，**代表p＜0.01且***代表p＜0.001；学生t检验；图7是示出了测试例3中1)的测试结果的图，并且该图示出了各组中作为疾病诱导后天数(x轴)之函数的EAE动物模型中的临床评分(y轴)。数值代表平均值±s.e.m，并且*代表p＜0.05，**代表p＜0.01且***代表p＜0.001；学生t检验；图8是示出了测试例3中2)的测试结果的图，并且该图示出了各组中作为疾病诱导后天数(x轴)之函数的EAE动物模型中的临床评分(y轴)。数值代表平均值±s.e.m，并且*代表p＜0.05，**代表p＜0.01且***代表p＜0.001；学生t检验；图9是示出了测试例3中3)的测试结果的图，并且该图示出了各组中作为疾病诱导后天数(x轴)之函数的EAE动物模型中的临床评分(y轴)。数值代表平均值±s.e.m，并且*代表p＜0.05，**代表p＜0.01且***代表p＜0.001；学生t检验；图10是示本文档来自技高网...

【技术保护点】
对IL‑2具有抑制活性的肽，其具有由序列ID No.1所示的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.08.21 KR 10-2015-01179661.对IL-2具有抑制活性的肽，其具有由序列IDNo.1所示的氨基酸序列。2.对IL-2具有抑制活性的肽，其包含由序列IDNo.2或3所示的CTLA-4蛋白中胞质结构域的片段，或者两个或更多个所述片段的融合肽。3.根据权利要求1所述的肽，其中所述融合肽具有由序列IDNo.4所示的氨基酸序列。4.融合产物，其包含：具有由序列IDNo.1所示的氨基酸序列的肽、其片段、或者两个或更多个所述片段的融合肽；和细胞渗透肽。5.根据权利要求4所述的融合产物，其中所述片段具有由序列IDNo.2或序列IDNo.3所示的氨基酸序列。6.根据权利要求4所述的融合产物，其中所述融合肽具有由序列IDNo.4所示的氨基酸序列。7.根据权利要求4所述的融合产物，其中所述细胞渗透肽包含选自以下的任一种：HIV-1tat(47-57)、D-氨基酸取代的HIV-1tat(47-57)、精氨酸取代的HIV-1tat(47-57)、果蝇触角足肽(43-58)、包含7个或更多个氨基酸的病毒RNA结合肽、包含7个或更多个精氨酸的DNA结合肽、包含6至8个精氨酸的聚精氨酸多肽、包含7至11...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔济民，林相昊，
申请(专利权)人：汉阳大学校产学协力团，
类型：发明
国别省市：韩国,KR