一株白黄黑链霉菌菌株及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株白黄黑链霉菌(Streptomyces albiflaviniger)菌株MS160002，其已于2017年11月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏号为CGMCC No.14871。其具有很好的抗结核菌活性，在抗结核治疗研究方面具有重大意义。

【技术实现步骤摘要】
一株白黄黑链霉菌菌株及其应用
本专利技术涉及一株海洋放线菌及其次级代谢产物在制备抗结核药物中的应用。
技术介绍
结核(Tuberculosis，TB)是一种由结核杆菌感染引起的慢性传染病，几千年来一直威胁着人类健康，目前仍是世界范围内致死率最高的单一性传染病。自1942年首个抗结核药物链霉素问世以来，人们开始着眼于从微生物天然产物中寻找抗结核的有效化合物。海洋作为地球表面71％的组分，拥有着极为丰富的物质及生物资源，其中海洋微生物更是种类繁多，数量庞大，且多具有复杂奇妙的生理代谢功能，其次级代谢产物不仅能提供地球上近一半的初级生产力，还能作为一种新兴的化合物资源库，为人类疾病治疗提供更安全有效的新型药物，目前已成为研究者们开发寻找新型活性物质的重点和热点。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一株海洋放线菌及其次级代谢产物在制备抗结核药物中的应用。本专利技术提供的化合物如式(I)所示；本专利技术保护所述化合物在制备抗菌药物中的应用。所述抗菌药物为抗细菌药物和/或抗真菌药物。所述细菌为革兰氏阳性细菌，具体为金黄色葡萄球菌、结核分枝杆菌。所述真菌具体可为白色念珠菌。所述药物包括药学上允许的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂、增效剂、添加剂和溶剂等。制备所述抗菌药物时，可将有效剂量的所述化合物与药学上允许的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂、增效剂、添加剂和溶剂等混合，制成各种药用制剂。所述药物的形态可为片剂、胶囊、软胶囊、散剂、颗粒剂、细粒剂、液剂、丸剂、乳剂或悬浊剂等口服制剂，亦可为针剂(如粉剂、水剂、油剂)栓剂、软膏、硬膏、贴剂、喷雾剂、酊剂或滴眼剂等非口服制剂。这些制剂都可采用本领域技术人员熟知常用的制备方法而获得。其给药途径可为口服、经皮，静脉或肌肉注射。菌株MS160002已于2017年11月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏号为CGMCCNo.14871。白黄黑链霉菌(Streptomycesalbiflaviniger)MS160002CGMCCNo.14871简称链霉菌MS160002。本专利技术提供的化合物具有很好的抗结核菌活性，在抗结核治疗研究方面具有重大意义。附图说明图1为菌株MS160002在ISP2培养基上28℃生长15天时的菌落照片。图2为基于16SrRNA基因序列的系统发育树。图3为化合物的质谱图。图4为化合物溶于CDCL3中的1H-NMR谱图。图5为化合物于CDCL3中的13C-NMR谱图。图6为化合物于CDCL3中的HSQC谱图。图7为化合物于CDCL3中的COSY谱图。图8为化合物于CDCL3中的HMBC谱图。图9为化合物于CDCL3中的ROESY谱图。具体实施方式以下的实施例便于更好地理解本专利技术，但并不限定本专利技术。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。牛型分枝杆菌(Mycobacteriumbovis)：法国巴斯德研究所，保藏编号1173P2；StrainDesignations:BCGJP15。结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis)：ATCC编号为27294；StrainDesignations:TMC102[H37Rv]。白色念珠菌(Candidaalbicans)：ATCC编号为MYA-2876；StrainDesignation：SC5314。铜绿假单孢菌(Pseudomonasaeruginosa)：ATCC编号为15692；StrainDesignations:PA14。金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)：ATCC编号为6538；StrainDesignations:FDA209。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)：参考文献ShangJL,GuoH,LiZS,RenB,LiZM,DaiHQ,ZhangLX,WangJG.2013.SynthesisandevaluationofnovelsulfenamidesasnovelantiMethicillin-resistantStaphylococcusaureusagents.BioorgMedChemLett23(3):724-727。实施例1菌株MS160002的分离与鉴定一、菌株MS160002的分离取1g海泥样品(采集自中国南海海底沉积物)，放入装有9mL无菌水的50mL离心管中，以20KHz、100W功率超声2min，200rpm振摇2h；取1mL悬浊液，放入装有9mL无菌水的50mL离心管中，充分震荡混匀；取1mL悬浊液，放入装有9mL无菌水的50mL离心管中，充分震荡混匀；取1mL悬浊液，放入装有9mL无菌水的50mL离心管中，充分震荡混匀，置于60℃下1h，取0.2mL涂布于菌株分离培养基上，获得一株菌，将其命名为菌株MS160002。菌株分离培养基的成分如下(％均为质量百分比)：可溶性淀粉2％、L-天冬素0.05％、KNO30.1％、K2HPO4·H2O0.05％、NaCl0.05％、MgSO4·7H2O0.05％、CaCO30.1％、Agar2％和水，pH7.2-7.5。二、菌株MS160002的鉴定菌株MS160002在ISP2培养基上28℃生长15天时的菌落照片(图1)，气生菌丝和基内菌丝均呈白色，孢子呈灰黑色，有少量灰褐色色素产生。菌株MS160002的16SrRNA的编码序列如序列表的序列1所示，将序列信息提交EzBioCloud数据库(EzTaxonServerversion2.1)进行序列比对。菌株MS160002与模式菌株StreptomycesalbiflavinigerNRRLB-1356(T)的16SrRNA的编码序列的相似性为99.86％。利用MEGA5.0软件中的邻接法生成系统发育树图(图2)(步缺值设定为1000)。根据菌落形态及序列比对的结果，菌株MS160002属于链霉菌(Streptomycessp.)。菌株MS160002已于2017年11月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏号为CGMCCNo.14871。白黄黑链霉菌(Streptomycesalbiflaviniger)MS160002CGMCCNo.14871，简称链霉菌MS160002。实施例2应用白黄黑链霉菌(Streptomycesalbiflaviniger)菌株MS160002生产制备化合物一、种子液的制备1、将白黄黑链霉菌(Streptomycesalbiflaviniger)菌株MS160002接种于ISP2培养基上，28℃培养7天(使气生菌丝生长丰满)，得到菌种。2、将菌种接种至ISP2培养基中，28℃、200rpm振荡培养3天，得到种子液。ISP2培养基：酵母粉4g，麦芽浸提物10g，葡萄糖4g，蒸馏水1000mL，pH7本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株白黄黑链霉菌(Streptomyces albiflaviniger)菌株MS160002CGMCC No.14871。

【技术特征摘要】
1.一株白黄黑链霉菌(Streptomycesalbiflaviniger)菌株MS160002CGMCCNo.14871。2.一种化合物的制备方法，其特征在于，包括：将白黄黑链霉菌(Streptomycesalbiflaviniger)菌株MS160002接种于ISP2固体培养基上，28℃培养7天，得到菌种；将菌种接种至ISP2培养基中，28℃、200rpm振荡培养3天，得到种子液；将种子液按5％的接种量接入MPG发酵培养基中，28℃、200rpm振荡培养7天，得发酵体系；将发酵体系于20℃、10000rpm离心10min，合并上清和沉淀提取液得发酵液；将发酵液以甲醇:水＝100:0(体积比)为流动相进行常压柱层析收集洗脱液并减压蒸馏得到馏分；将馏分用二氯甲烷：甲醇＝2:1重新溶解，过滤去除不溶物后进行凝胶柱层析，收集洗脱液并减压蒸馏得到精馏分。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的ISP...

【专利技术属性】
技术研发人员：张立新，高婕妤，宋福行，代焕琴，胡建森，杨海进，曹佳倩，李峥，
申请(专利权)人：中国科学院微生物研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11