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一株微黄白链霉菌及其应用制造技术

技术编号:8880814 阅读:300 留言:0更新日期:2013-07-03 19:37
本发明专利技术公开了一株微黄白链霉菌及其应用,属于生物防治植物病害领域。该菌株为微黄白链霉菌(Streptomyces?albidoflavus)菌株L44,保藏编号为CGMCC?No.7504。本发明专利技术还公开了含有上述菌株的生物防治制剂及其制备方法。本发明专利技术的微黄白链霉菌菌株具有生长速度快、产孢量大、作用谱广、抗逆性强,在植物根际能够快速大量定殖等特点,因此具有良好的应用前景。由该微黄白链霉菌制备的生物防治制剂,不仅能够高效的防治植物土传病害,还能有效提高作物产量,是一种极具应用前景的生物防治制剂。该微生物制剂可以作为生物农药或生物肥料,防治多种土传植物病害,尤其是冬枣黑斑病。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物防治植物病害领域。具体而言,本专利技术涉及一株能够高效防治植物病害的微黄白链霉菌及其用途,以及采用该微黄白链霉菌制备的生物防治制剂。
技术介绍
冬枣为中国特有的晚熟枣品种,营养丰富,含有Vc、环磷酸腺苷、环磷酸鸟苷等,对人类多种疾病具有良好的医疗保健作用。冬枣是黄三角流域主要经济果木,也是当地的主导产业之一,发展势头迅猛,仅沾化县种植面积就达50万亩,产量3亿公斤。但近年来,由于气候及种植模式的原因,冬枣病虫害发生严重,用药量激增,冬枣品质下降,冬枣产业发展面临着技术瓶颈。冬率黑斑病(“Dongzao” jujuba black patch)是由细极链格孢Alternaria tenuissima引起的一种果实性真菌病害,是近几年在山东、河北冬率产区普遍发生的一类新的病害,为害日益严重。该病主要为害果实,病果率在30%左右,严重的在80%以上,造成产量、品质下降,不能贮存,严重影响果实的商品性,给枣农造成重大经济损失。因此以生物药物为主的生物防治技术是冬枣黑斑病防治的必然趋势。链霉菌属于原核生物界放线菌目链霉菌科,是一类菌丝体呈分枝状的好氧革兰氏阳性细菌,广泛分布在自然界的各种环境中,尤其是土壤中,因此具有很强的根际定植能力。链霉菌作为生防菌防治植物病害的机制主要有:抗生作用、营养竞争、空间竞争、重寄生作用以及诱导植物产生抗性等机制,链霉菌的生防作用主要是由其产生的抗生素实现的,具有高效、低残留、与环境友好等优点。现已筛选出的抗生素中,有80%以上是由放线菌产生,而其中的90%以上是由链霉菌产生。由于链霉菌是重要的天然抗生素来源的微生物类群,因此从土壤中分离具有农用活性的链霉菌是目前微生物农药开发的一个重要途径。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种用于高效防治多种植物病害的新的放线菌——微黄白链霉菌菌株L44。该微黄白链`霉菌菌株具有生长速度快、产孢量大、作用谱广、抗逆性强,在植物根际能够快速大量定殖等特点,因此具有良好的应用前景。本专利技术所提供的菌株为微黄白链霉菌(Streptomyces albidoflavus)L44,是从山东省潍坊市潍北地区沿海滩涂地块的土壤中分离获得的,已于2013年4月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCCJia:北京市朝阳区北辰西路I号院3号,中国科学院微生物研究所),保藏号为CGMCC N0.7504。其具有以下生物学特性:(I)在高氏合成I号培养基上培养时,气丝初肉色,后变暗灰色。基丝暗棕色。可溶色素微粉褐色。(2)在淀粉培养基上培养时,气丝灰色。基丝黄褐色。无可溶色素。(3)在纤维素培养基上培养时,气丝暗灰色。基丝无色。无可溶色素。(4)在高氏有机2号培养基上培养时,气丝初肉色,后暗灰色。基丝暗棕色;可溶色素褐色。(5)在PDA培养基上培养时,气丝暗灰色,粉状,有白色和乳脂色次生丛。基丝初黄色,后暗棕色。可溶色素暗棕色。产生类黑色素。孢子丝螺旋形,2— 5圈,有时6— 9圈。孢子球形、卵圆形,表面带短刺。本专利技术微黄白链霉菌菌株L44的培养方法或繁殖方法包括:(I)普通培养保存采用高氏一号培养基,配方为:可溶性淀粉20g,硝酸钾lg,氯化钠0.5g,磷酸氢二钾0.5g,硫酸亚铁0.0lg,硫酸镁0.5g,琼脂20g,蒸懼水IOOOmL, pH调至7.2-7.4 ;(2)实验室液体培养采用小米培养基,配方为:小米10g,加入到IOOOmL蒸馏水中煮沸30min后过滤,加入葡萄糖IOg,氯化钠2g,蛋白胨3g,碳酸I丐2g,蒸懼水补足至1000ml, pH 调至 7.2 7.4 ;(3)固体发酵培养基:麸皮40g,玉米稻杆粉60g,无机盐溶液IOOg,所述无机盐溶液按质量百分比计,包含 KNO30.7%, K2HPO40.2%, NaCl0.15%, MgSO4 *7H200.15%, FeSO40.003%,剩余为水。先将玉米秸杆粉和麸皮搅拌均匀,将配好的无机盐溶液倒入,搅拌均匀。本专利技术还提供一种用于防治植物土传病害的生物防治制剂,所述生物防治制剂包括所述的微黄白链霉菌菌株L44。并且,本专利技术还提供了一种用于防治植物土传病害的生物防治方法,所述生物防治方法包括向具有土传病害的植物施用上述微黄白链霉菌菌株L44或者上述生物防治制剂。本专利技术也提供了上述微黄白链霉菌菌株L44或者上述生物防治制剂在防治植物土传病害中的用途。就上述生物防治制剂、生物防治方法以及用途而言,所述植物病害可以选自冬枣黑斑病、黄瓜炭疽病、核桃炭疽病、苹果炭疽病、葡萄炭疽病、葡萄白腐病、西瓜炭疽病、板栗枝枯病、石榴干腐病等一种或几种。本专利技术所述的生 物防治制剂的制备方法包括以下步骤:( I)制备所述微黄白链霉菌菌株L44的种子液;(2)将步骤(I)制备的种子液接种到固体培养基中,28_30°C下恒温培养;(3)将步骤(2)培养的培养物用无菌水按质量比1:15的比例混合,过滤,将滤液接种至大量发酵培养基,在室温28-30°C、相对湿度85%以上的发酵室中进行发酵培养。在本专利技术的一个具体实施方案中,所述制备方法包括以下步骤:(I)将微黄白链霉菌菌株L44的孢子移植到PDB液体培养基或者小米液体培养基中,28-30°C摇床振荡培养3 5d得到种子液;(2)将步骤(I)制备的种子液按质量比10%的比例接种到固体培养基中,28_30°C下振荡培养3 5d ;(3)将步骤(2)培养的培养物用无菌水按质量比1:15的比例混合,过滤,将滤液按体积比1:6的比例接种至大量发酵培养基,室温28-30°C、相对湿度85%以上的发酵室中发酵培养10 12d。其中,步骤(I)中的所述PDB液体培养基包含去皮马铃薯0.2g/mL,葡萄糖0.02g/mL,剩余为蒸懼水;其中,步骤(2)中的固体培养基由固料和无机盐溶液组成,所述固料和无机盐溶液的比例为质量比1:1 ;所述固料由质量比为40:60的麸皮和玉米秸杆粉组成;按质量百分比计,所述无机盐溶液包含 KNO30.7%,K2HPO40.2%,NaCl0.15%,MgSO4 7H200.15%,FeSO40.003%,剩余为水。所述步骤(3)中的大量发酵培养基同固体培养基。实验表明,本专利技术的微黄白链霉菌菌株具有生长速度快、产孢量大、作用谱广、抗逆性强,在植物根际能够快速大量定殖等特点,因此具有良好的应用前景。由该微黄白链霉菌制备的生物防治制剂,不仅能够高效的防治植物土传病害,还能有效提高作物产量,是一种极具应用前景的生物防治制剂。该微生物制剂可以作为生物农药或生物肥料,防治多种土传植物病害,包括冬枣黑斑病、黄瓜炭疽病、核桃炭疽病、苹果炭疽病、葡萄炭疽病、葡萄白腐病、西瓜炭疽病、板栗枝枯病、石榴干腐病等一种或几种。具体实施例方式下面结合具体实施例来进一步描述本专利技术,本专利技术的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是示例性的,并不对本专利技术的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是,在不偏离本专利技术的精神和范围下可以对本专利技术技术方案的细节和形式进行修改或替换,但这些修改和替换均落入本专利技术的保护范围内。实施例11、微黄白链霉菌菌株L44的分离与纯化本专利技术的微黄白链霉菌菌株L44是从土壤中采用稀释平板法和平板划线法分离获得的,本文档来自技高网
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【技术保护点】
微黄白链霉菌(Streptomyces?albidoflavus)菌株L44,所述菌株的保藏编号为CGMCC?No.7504。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:牛赡光李鹏王清海刘幸红李泉涌段春华
申请(专利权)人:牛赡光李鹏
类型:发明
国别省市:

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